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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8fvr | ||||||||||||||||||
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タイトル | CryoEM structure of E.coli transcription elongation complex | ||||||||||||||||||
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![]() | TRANSCRIPTION/DNA/RNA / Transcription elongation / TRANSCRIPTION-DNA-RNA complex | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / nitrate assimilation / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation ...RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / nitrate assimilation / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / DNA-templated transcription initiation / cell motility / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat / protein-containing complex assembly / intracellular iron ion homeostasis / protein dimerization activity / response to antibiotic / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() | ||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.42 Å | ||||||||||||||||||
![]() | Duan, W. / Serganov, A. | ||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Control of transcription elongation and DNA repair by alarmone ppGpp. 著者: Jacob W Weaver / Sergey Proshkin / Wenqian Duan / Vitaly Epshtein / Manjunath Gowder / Binod K Bharati / Elena Afanaseva / Alexander Mironov / Alexander Serganov / Evgeny Nudler / ![]() ![]() 要旨: Second messenger (p)ppGpp (collectively guanosine tetraphosphate and guanosine pentaphosphate) mediates bacterial adaptation to nutritional stress by modulating transcription initiation. More ...Second messenger (p)ppGpp (collectively guanosine tetraphosphate and guanosine pentaphosphate) mediates bacterial adaptation to nutritional stress by modulating transcription initiation. More recently, ppGpp has been implicated in coupling transcription and DNA repair; however, the mechanism of ppGpp engagement remained elusive. Here we present structural, biochemical and genetic evidence that ppGpp controls Escherichia coli RNA polymerase (RNAP) during elongation via a specific site that is nonfunctional during initiation. Structure-guided mutagenesis renders the elongation (but not initiation) complex unresponsive to ppGpp and increases bacterial sensitivity to genotoxic agents and ultraviolet radiation. Thus, ppGpp binds RNAP at sites with distinct functions in initiation and elongation, with the latter being important for promoting DNA repair. Our data provide insights on the molecular mechanism of ppGpp-mediated adaptation during stress, and further highlight the intricate relationships between genome stability, stress responses and transcription. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 666.5 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 524.8 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 29491MC ![]() 8fvwC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-DNA-directed RNA polymerase subunit ... , 4種, 5分子 DEFGH
#1: タンパク質 | 分子量: 36558.680 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() #2: タンパク質 | | 分子量: 150820.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: rpoB, groN, nitB, rif, ron, stl, stv, tabD, b3987, JW3950 発現宿主: ![]() ![]() #3: タンパク質 | | 分子量: 156504.969 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() #4: タンパク質 | | 分子量: 10249.547 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
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-DNA鎖 , 2種, 2分子 AB
#5: DNA鎖 | 分子量: 16211.382 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() ![]() |
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#7: DNA鎖 | 分子量: 16269.433 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() ![]() |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 C
#6: RNA鎖 | 分子量: 5224.208 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() ![]() |
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-非ポリマー , 3種, 204分子 ![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/HOH.gif)
![](data/chem/img/MG.gif)
![](data/chem/img/HOH.gif)
#8: 化合物 | #9: 化合物 | ChemComp-MG / | #10: 水 | ChemComp-HOH / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: E. coli transcription elongation complex (EC) / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#7 / 由来: MULTIPLE SOURCES | ||||||||||||
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由来(天然) |
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由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() | ||||||||||||
緩衝液 | pH: 8 詳細: 20 mM HEPES, pH 8.0, 150 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 10 uM ZnCl2, 5 mM DTT | ||||||||||||
試料 | 濃度: 6.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 283.15 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 105000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 1900 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 900 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 70 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER 最高温度: 79.95 K / 最低温度: 79.95 K / Residual tilt: 0.05 mradians |
撮影 | 平均露光時間: 2 sec. / 電子線照射量: 59.07 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 3298 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
画像スキャン | サンプリングサイズ: 5 µm / 横: 5760 / 縦: 4092 |
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解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 786069 詳細: In total, 786,069 particles were picked in template-free mode | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.42 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 212142 / クラス平均像の数: 70 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT |