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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8aye | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| タイトル | E. coli 70S ribosome bound to thermorubin and fMet-tRNA | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / Antibiotic / Initiator tRNA / Complex / Macromolecule | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報negative regulation of cytoplasmic translational initiation / transcription antitermination factor activity, RNA binding / ornithine decarboxylase inhibitor activity / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / positive regulation of ribosome biogenesis / RNA-binding transcription regulator activity ...negative regulation of cytoplasmic translational initiation / transcription antitermination factor activity, RNA binding / ornithine decarboxylase inhibitor activity / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / positive regulation of ribosome biogenesis / RNA-binding transcription regulator activity / four-way junction DNA binding / negative regulation of cytoplasmic translation / DnaA-L2 complex / regulation of mRNA stability / translation repressor activity / negative regulation of translational initiation / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / regulation of DNA-templated transcription elongation / positive regulation of RNA splicing / transcription elongation factor complex / cytosolic ribosome assembly / response to reactive oxygen species / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / transcription antitermination / DNA endonuclease activity / translational initiation / regulation of cell growth / response to radiation / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / mRNA 5'-UTR binding / regulation of translation / large ribosomal subunit / ribosomal small subunit assembly / transferase activity / ribosome biogenesis / ribosome binding / ribosomal small subunit biogenesis / 5S rRNA binding / small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / small ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic small ribosomal subunit / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / structural constituent of ribosome / ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / hydrolase activity / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 生物種 | ![]() | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 1.96 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Sanyal, S. / Parajuli, N.P. / Emmerich, A.G. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 資金援助 | スウェーデン, 米国, 7件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023タイトル: Antibiotic thermorubin tethers ribosomal subunits and impedes A-site interactions to perturb protein synthesis in bacteria. 著者: Narayan Prasad Parajuli / Andrew Emmerich / Chandra Sekhar Mandava / Michael Y Pavlov / Suparna Sanyal / ![]() 要旨: Thermorubin (THB) is a long-known broad-spectrum ribosome-targeting antibiotic, but the molecular mechanism of its action was unclear. Here, our precise fast-kinetics assays in a reconstituted ...Thermorubin (THB) is a long-known broad-spectrum ribosome-targeting antibiotic, but the molecular mechanism of its action was unclear. Here, our precise fast-kinetics assays in a reconstituted Escherichia coli translation system and 1.96 Å resolution cryo-EM structure of THB-bound 70S ribosome with mRNA and initiator tRNA, independently suggest that THB binding at the intersubunit bridge B2a near decoding center of the ribosome interferes with the binding of A-site substrates aminoacyl-tRNAs and class-I release factors, thereby inhibiting elongation and termination steps of bacterial translation. Furthermore, THB acts as an anti-dissociation agent that tethers the ribosomal subunits and blocks ribosome recycling, subsequently reducing the pool of active ribosomes. Our results show that THB does not inhibit translation initiation as proposed earlier and provide a complete mechanism of how THB perturbs bacterial protein synthesis. This in-depth characterization will hopefully spur efforts toward the design of THB analogs with improved solubility and effectivity against multidrug-resistant bacteria. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 8aye.cif.gz | 3.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8aye.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
| PDBx/mmJSON形式 | 8aye.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ay/8aye ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ay/8aye | HTTPS FTP |
|---|
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 15712MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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|---|---|
| 1 |
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要素
+50S ribosomal protein ... , 29種, 29分子 01234cdefghijklmnopqrstuvwxyz
-RNA鎖 , 6種, 6分子 5AXZab
| #6: RNA鎖 | 分子量: 589.430 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
|---|---|
| #7: RNA鎖 | 分子量: 499873.406 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #28: RNA鎖 | 分子量: 1923.237 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #29: RNA鎖 | 分子量: 24497.602 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #30: RNA鎖 | 分子量: 941505.375 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #31: RNA鎖 | 分子量: 38790.090 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-30S ribosomal protein ... , 20種, 20分子 BCDEFGHIJKLMNOPQRSTU
| #8: タンパク質 | 分子量: 26781.670 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
|---|---|
| #9: タンパク質 | 分子量: 26031.316 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #10: タンパク質 | 分子量: 23514.199 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #11: タンパク質 | 分子量: 17629.398 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #12: タンパク質 | 分子量: 15727.512 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #13: タンパク質 | 分子量: 20055.156 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #14: タンパク質 | 分子量: 14146.557 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #15: タンパク質 | 分子量: 14886.270 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #16: タンパク質 | 分子量: 11755.597 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #17: タンパク質 | 分子量: 13871.959 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #18: タンパク質 | 分子量: 13768.157 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #19: タンパク質 | 分子量: 13128.467 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #20: タンパク質 | 分子量: 11606.560 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #21: タンパク質 | 分子量: 10290.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #22: タンパク質 | 分子量: 9207.572 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #23: タンパク質 | 分子量: 9724.491 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #24: タンパク質 | 分子量: 9005.472 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #25: タンパク質 | 分子量: 10455.355 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #26: タンパク質 | 分子量: 9708.464 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
| #27: タンパク質 | 分子量: 8524.039 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-非ポリマー , 3種, 311分子 




| #56: 化合物 | | #57: 化合物 | ChemComp-MG / #58: 化合物 | ChemComp-T8B / | |
|---|
-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
|---|---|
| Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: E. coli 70S ribosome bound to thermorubin and fMet-tRNA タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#3, #6, #8-#29, #34-#54 / 由来: NATURAL |
|---|---|
| 分子量 | 実験値: NO |
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
| 緩衝液 | pH: 7.5 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 600 nm |
| 撮影 | 電子線照射量: 30.745 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
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解析
| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
|---|---|
| 3次元再構成 | 解像度: 1.96 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 1088035 / 対称性のタイプ: POINT |
ムービー
コントローラー
万見について






スウェーデン,
米国, 7件
引用
PDBj































FIELD EMISSION GUN