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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6zm1 | ||||||||||||||||||
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タイトル | Open-closed state of the Bt1762-Bt1763 levan transport system | ||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN / Levan / transporter / SusCD / TonB-dependent | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | ||||||||||||||||||
生物種 | Bacteroides thetaiotaomicron (バクテリア) | ||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.7 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | White, J.B.R. / van den Berg, B. / Ranson, N.A. | ||||||||||||||||||
資金援助 | 英国, スイス, 5件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2021 タイトル: Insights into SusCD-mediated glycan import by a prominent gut symbiont. 著者: Declan A Gray / Joshua B R White / Abraham O Oluwole / Parthasarathi Rath / Amy J Glenwright / Adam Mazur / Michael Zahn / Arnaud Baslé / Carl Morland / Sasha L Evans / Alan Cartmell / Carol ...著者: Declan A Gray / Joshua B R White / Abraham O Oluwole / Parthasarathi Rath / Amy J Glenwright / Adam Mazur / Michael Zahn / Arnaud Baslé / Carl Morland / Sasha L Evans / Alan Cartmell / Carol V Robinson / Sebastian Hiller / Neil A Ranson / David N Bolam / Bert van den Berg / 要旨: In Bacteroidetes, one of the dominant phyla of the mammalian gut, active uptake of large nutrients across the outer membrane is mediated by SusCD protein complexes via a "pedal bin" transport ...In Bacteroidetes, one of the dominant phyla of the mammalian gut, active uptake of large nutrients across the outer membrane is mediated by SusCD protein complexes via a "pedal bin" transport mechanism. However, many features of SusCD function in glycan uptake remain unclear, including ligand binding, the role of the SusD lid and the size limit for substrate transport. Here we characterise the β2,6 fructo-oligosaccharide (FOS) importing SusCD from Bacteroides thetaiotaomicron (Bt1762-Bt1763) to shed light on SusCD function. Co-crystal structures reveal residues involved in glycan recognition and suggest that the large binding cavity can accommodate several substrate molecules, each up to ~2.5 kDa in size, a finding supported by native mass spectrometry and isothermal titration calorimetry. Mutational studies in vivo provide functional insights into the key structural features of the SusCD apparatus and cryo-EM of the intact dimeric SusCD complex reveals several distinct states of the transporter, directly visualising the dynamics of the pedal bin transport mechanism. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6zm1.cif.gz | 685 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6zm1.ent.gz | 533.7 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6zm1.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6zm1_validation.pdf.gz | 850.1 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6zm1_full_validation.pdf.gz | 902.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6zm1_validation.xml.gz | 85.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6zm1_validation.cif.gz | 127.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/zm/6zm1 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/zm/6zm1 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 66142.625 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Bacteroides thetaiotaomicron (strain ATCC 29148 / DSM 2079 / NCTC 10582 / E50 / VPI-5482) (バクテリア) 遺伝子: BT_1762 発現宿主: Bacteroides thetaiotaomicron (バクテリア) 参照: UniProt: Q8A6W4 #2: タンパク質 | 分子量: 115483.602 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacteroides thetaiotaomicron (strain ATCC 29148 / DSM 2079 / NCTC 10582 / E50 / VPI-5482) (バクテリア) 参照: UniProt: Q8A6W3 Has protein modification | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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分子量 | 値: 0.36 MDa / 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||
由来(天然) |
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由来(組換発現) | 生物種: Bacteroides thetaiotaomicron (バクテリア) | ||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.02 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 63.84 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.14_3260: / 分類: 精密化 | |||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 4.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 22205 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL | |||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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