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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6y83 | ||||||
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タイトル | Capsid structure of Leishmania RNA virus 1 | ||||||
要素 | Capsid protein | ||||||
キーワード | VIRUS LIKE PARTICLE / virus-like particle / capsid structure | ||||||
機能・相同性 | Totivirus coat / Totivirus coat protein / Capsid protein 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Leishmania RNA virus 1 - 4 (ウイルス) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.65 Å | ||||||
Model details | Virus-like particle assembled from LRV1-4 capsid protein | ||||||
データ登録者 | Prochazkova, M. / Fuzik, T. / Grybtchuk, D. / Falginella, F. / Podesvova, L. / Yurchenko, V. / Vacha, R. / Plevka, P. | ||||||
資金援助 | チェコ, 1件
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引用 | ジャーナル: J Virol / 年: 2021 タイトル: Capsid Structure of RNA Virus 1. 著者: Michaela Procházková / Tibor Füzik / Danyil Grybchuk / Francesco Luca Falginella / Lucie Podešvová / Vyacheslav Yurchenko / Robert Vácha / Pavel Plevka / 要旨: parasites cause a variety of symptoms, including mucocutaneous leishmaniasis, which results in the destruction of the mucous membranes of the nose, mouth, and throat. The species of carrying RNA ... parasites cause a variety of symptoms, including mucocutaneous leishmaniasis, which results in the destruction of the mucous membranes of the nose, mouth, and throat. The species of carrying RNA virus 1 (LRV1), from the family , are more likely to cause severe disease and are less sensitive to treatment than those that do not contain the virus. Although the importance of LRV1 for the severity of leishmaniasis was discovered a long time ago, the structure of the virus remained unknown. Here, we present a cryo-electron microscopy reconstruction of the virus-like particle of LRV1 determined to a resolution of 3.65 Å. The capsid has icosahedral symmetry and is formed by 120 copies of a capsid protein assembled in asymmetric dimers. RNA genomes of viruses from the family are synthetized, but not capped at the 5' end, by virus RNA polymerases. To protect viral RNAs from degradation, capsid proteins of the L-A totivirus cleave the 5' caps of host mRNAs, creating decoys to overload the cellular RNA quality control system. Capsid proteins of LRV1 form positively charged clefts, which may be the cleavage sites for the 5' cap of mRNAs. The putative RNA binding site of LRV1 is distinct from that of the related L-A virus. The structure of the LRV1 capsid enables the rational design of compounds targeting the putative decapping site. Such inhibitors may be developed into a treatment for mucocutaneous leishmaniasis caused by LRV1-positive species of Twelve million people worldwide suffer from leishmaniasis, resulting in more than 30 thousand deaths annually. The disease has several variants that differ in their symptoms. The mucocutaneous form, which leads to disintegration of the nasal septum, lips, and palate, is caused predominantly by parasites carrying RNA virus 1 (LRV1). Here, we present the structure of the LRV1 capsid determined using cryo-electron microscopy. Capsid proteins of a related totivirus, L-A virus, protect viral RNAs from degradation by cleaving the 5' caps of host mRNAs. Capsid proteins of LRV1 may have the same function. We show that the LRV1 capsid contains positively charged clefts that may be sites for the cleavage of mRNAs of cells. The structure of the LRV1 capsid enables the rational design of compounds targeting the putative mRNA cleavage site. Such inhibitors may be used as treatments for mucocutaneous leishmaniasis. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 6y83.cif.gz | 211.7 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb6y83.ent.gz | 175.8 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 6y83.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 6y83_validation.pdf.gz | 890.6 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 6y83_full_validation.pdf.gz | 903.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | 6y83_validation.xml.gz | 47 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 6y83_validation.cif.gz | 71.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/y8/6y83 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/y8/6y83 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
| x 60
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 87536.930 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: Subunit A model for residues 15-204, 210-520, 541-635. Subunit B model for residues 19-290, 300-517, 541-576, 583-642.,Subunit A model for residues 15-204, 210-520, 541-635. Subunit B model ...詳細: Subunit A model for residues 15-204, 210-520, 541-635. Subunit B model for residues 19-290, 300-517, 541-576, 583-642.,Subunit A model for residues 15-204, 210-520, 541-635. Subunit B model for residues 19-290, 300-517, 541-576, 583-642. 由来: (組換発現) Leishmania RNA virus 1 - 4 (ウイルス) プラスミド: pET42b / 詳細 (発現宿主): C-terminal 8xHis tag / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: L7XUU7 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Leishmania RNA virus 1 - 4 / タイプ: VIRUS / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT | |||||||||||||||||||||||||
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分子量 | 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: Leishmania RNA virus 1 - LgM5313 (ウイルス) | |||||||||||||||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) | |||||||||||||||||||||||||
ウイルスについての詳細 | 中空か: YES / エンベロープを持つか: NO / 単離: OTHER / タイプ: VIRUS-LIKE PARTICLE | |||||||||||||||||||||||||
天然宿主 | 生物種: Leishmania guyanensis / 株: MHOM/BR/75/M4147 | |||||||||||||||||||||||||
ウイルス殻 | 名称: capsid / 直径: 422 nm / 三角数 (T数): 2 | |||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 8 | |||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 15 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | |||||||||||||||||||||||||
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 | |||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK II / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 70 % / 凍結前の試料温度: 295 K / 詳細: blot force 3 blot time 5 wait time 10 |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 75000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 0.5 nm / 最小 デフォーカス(公称値): -0.5 nm / C2レンズ絞り径: 50 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 0.5 sec. / 電子線照射量: 21 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 12000 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 28000 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: I (正20面体型対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.65 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 16901 / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 174 / プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: RECIPROCAL / Target criteria: R-factor | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 1M1C PDB chain-ID: A |