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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6xbd | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of MlaFEDB in nanodiscs with phospholipid substrates | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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![]() | LIPID TRANSPORT / bacterial cell envelope / mla pathway / MCE | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・物質の膜輸送を触媒する / phospholipid transport / ATPase-coupled transmembrane transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / hydrolase activity / ATP binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.05 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Coudray, N. / Isom, G.L. / MacRae, M.R. / Saiduddin, M. / Ekiert, D.C. / Bhabha, G. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structure of bacterial phospholipid transporter MlaFEDB with substrate bound. 著者: Nicolas Coudray / Georgia L Isom / Mark R MacRae / Mariyah N Saiduddin / Gira Bhabha / Damian C Ekiert / ![]() 要旨: In double-membraned bacteria, phospholipid transport across the cell envelope is critical to maintain the outer membrane barrier, which plays a key role in virulence and antibiotic resistance. An MCE ...In double-membraned bacteria, phospholipid transport across the cell envelope is critical to maintain the outer membrane barrier, which plays a key role in virulence and antibiotic resistance. An MCE transport system called Mla has been implicated in phospholipid trafficking and outer membrane integrity, and includes an ABC transporter, MlaFEDB. The transmembrane subunit, MlaE, has minimal sequence similarity to other transporters, and the structure of the entire inner-membrane MlaFEDB complex remains unknown. Here, we report the cryo-EM structure of MlaFEDB at 3.05 Å resolution, revealing distant relationships to the LPS and MacAB transporters, as well as the eukaryotic ABCA/ABCG families. A continuous transport pathway extends from the MlaE substrate-binding site, through the channel of MlaD, and into the periplasm. Unexpectedly, two phospholipids are bound to MlaFEDB, suggesting that multiple lipid substrates may be transported each cycle. Our structure provides mechanistic insight into substrate recognition and transport by MlaFEDB. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 388.9 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 316.3 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 22116MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | ![]() Data size: 5.2 TB Data #1: Unaligned multi-frame micrographs of MlaFEDB complex [micrographs - multiframe] Data #2: Polished particles (using Relion 3.1) [picked particles - single frame - processed]) |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-Phospholipid ... , 4種, 12分子 ABCDEFGHIJKL
#1: タンパク質 | 分子量: 21937.674 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() #2: タンパク質 | 分子量: 27885.162 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() #3: タンパク質 | 分子量: 29128.801 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() 参照: UniProt: H4UPQ0, 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・物質の膜輸送を触媒する #4: タンパク質 | 分子量: 10690.313 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() ![]() |
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-タンパク質 / 非ポリマー , 2種, 4分子 MN![](data/chem/img/PEF.gif)
![](data/chem/img/PEF.gif)
#5: タンパク質 | 分子量: 13975.214 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() #6: 化合物 | |
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-詳細
構成要素の詳細 | Molecule-4 was modeled as a poly-ala chain. The register of the model with the sequence is unknown |
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研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
配列の詳細 | sequence of entity-4 MSP1D1 ...sequence of entity-4 MSP1D1 STFSKLREQL |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: MlaFEDB complex with two bound phospholipid substrates in MSP1D1 nanodisc タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#5 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 0.266 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 7.4 |
試料 | 濃度: 0.95 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 29000 X / Cs: 2.7 mm |
試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 6 sec. / 電子線照射量: 71 e/Å2 / 検出モード: SUPER-RESOLUTION フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 3212 |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 30 / 利用したフレーム数/画像: 1-30 |
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解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.16_3549: / 分類: 精密化 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 1283606 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.05 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 731205 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: REAL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 3D fitting-ID: 1 / Source name: PDB / タイプ: experimental model
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拘束条件 |
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