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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 4cy4 | ||||||
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タイトル | The Cryo-Electron Microscopy Structure of the CorA channel from Methanocaldococcus jannaschii at 21.6 Angstrom in low magnesium. | ||||||
要素 | MAGNESIUM TRANSPORT PROTEIN CORA | ||||||
キーワード | MEMBRANE PROTEIN / MAGNESIUM ION CHANNEL | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 cobalt ion transmembrane transporter activity / magnesium ion transmembrane transporter activity / cobalt ion binding / magnesium ion binding / identical protein binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | METHANOCALDOCOCCUS JANNASCHII (メタン生成菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 21.6 Å | ||||||
Model type details | CA ATOMS ONLY, CHAIN A, B, C, D, E | ||||||
データ登録者 | Cleverley, R.M. / Kean, J. / Shintre, C.A. / Baldock, C. / Derrick, J.P. / Ford, R.C. / Prince, S.M. | ||||||
引用 | ジャーナル: Biochim Biophys Acta / 年: 2015 タイトル: The Cryo-EM structure of the CorA channel from Methanocaldococcus jannaschii in low magnesium conditions. 著者: Robert M Cleverley / James Kean / Chitra A Shintre / Clair Baldock / Jeremy P Derrick / Robert C Ford / Stephen M Prince / 要旨: CorA channels are responsible for the uptake of essential magnesium ions by bacteria. X-ray crystal structures have been resolved for two full-length CorA channels, each in a non-conducting state ...CorA channels are responsible for the uptake of essential magnesium ions by bacteria. X-ray crystal structures have been resolved for two full-length CorA channels, each in a non-conducting state with magnesium ions bound to the protein: These structures reveal a homo-pentameric quaternary structure with approximate 5-fold rotational symmetry about a central pore axis. We report the structure of the detergent solubilized Methanocaldococcus jannaschii CorA channel determined by Cryo-Electron Microscopy and Single Particle Averaging, supported by Small Angle X-ray Scattering and X-ray crystallography. This structure also shows a pentameric channel but with a highly asymmetric domain structure. The asymmetry of the domains includes differential separations between the trans-membrane segments, which reflects mechanical coupling of the cytoplasmic domain to the trans-membrane domain. This structure therefore reveals an important aspect of the gating mechanism of CorA channels by providing an indication of how the absence of magnesium ions leads to major structural changes. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 4cy4.cif.gz | 58.4 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb4cy4.ent.gz | 37 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 4cy4.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 4cy4_validation.pdf.gz | 749.6 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 4cy4_full_validation.pdf.gz | 749.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | 4cy4_validation.xml.gz | 23.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 4cy4_validation.cif.gz | 35.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/cy/4cy4 ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/cy/4cy4 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 37182.586 Da / 分子数: 5 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: RECOMBINANTLY OVER-EXPRESSED PROTEIN, SOLUBILIZED FROM MEMBRANE FRACTION. PURIFIED BY AFFINITY (HIS-TAG), SIZE EXCLUSION CHROMATOGRAPHY. PROTEOLYTIC TAG CLEAVEAGE. 由来: (組換発現) METHANOCALDOCOCCUS JANNASCHII (メタン生成菌) 解説: PCR FROM GENOMIC DNA / プラスミド: POPINF / 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21 / Variant (発現宿主): STAR / 参照: UniProt: Q58439 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: CORA CHANNEL FROM METHANOCALDOCOCCUS JANNASCHII / タイプ: COMPLEX |
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緩衝液 | 名称: 200MM NACL, 20MM TRIS/HCL, 0.04% DODECYLMALTOSIDE ( DDM) pH: 8 詳細: 200MM NACL, 20MM TRIS/HCL, 0.04% DODECYLMALTOSIDE ( DDM) |
試料 | 濃度: 1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: HOLEY CARBON |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK I / 凍結剤: ETHANE / 詳細: LIQUID ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI F20 / 日付: 2009年6月5日 / 詳細: LOW DOSE MODE |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 4800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 3300 nm |
試料ホルダ | 温度: 100 K |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) |
画像スキャン | デジタル画像の数: 28 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: WITH REFERENCE TO X-RAY SCATTERING CURVE | ||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||
3次元再構成 | 手法: 3D RECONSTRUCTION FROM RANDOMLY ORIENTED PARTICLE IMAGES 解像度: 21.6 Å / 粒子像の数: 44064 / ピクセルサイズ(公称値): 3.5 Å / ピクセルサイズ(実測値): 3.5 Å 詳細: THE HIGH-RES MJCORA PDB 4EV6 STRUCTURE WAS DOCKED AS AN UNMODIFIED RIGID BODY. THERE ARE DIFFERENCES IN THE CRYO- EM AND CRYSTAL STRUCTURE DUE TO DIFFERENCES IN SOLUTION CONDITIONS ...詳細: THE HIGH-RES MJCORA PDB 4EV6 STRUCTURE WAS DOCKED AS AN UNMODIFIED RIGID BODY. THERE ARE DIFFERENCES IN THE CRYO- EM AND CRYSTAL STRUCTURE DUE TO DIFFERENCES IN SOLUTION CONDITIONS SPECIFICALLY MG ION CONCENTRATION. SUBMISSION BASED ON EXPERIMENTAL DATA FROM EMDB EMD-2626. (DEPOSITION ID: 12440). 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL / Target criteria: Cross-correlation coefficient 詳細: METHOD--RIGID BODY REFINEMENT PROTOCOL--DOCKING OF X-RAY CRYSTAL STRUCTURE | ||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 4EV6 Accession code: 4EV6 / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 21.6 Å | ||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 21.6 Å
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