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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 11mx | |||||||||||||||||||||||||||||||||
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| タイトル | Influenza A virus Hemagglutinin (A/California/04/2009 H1N1), E47K HA2 stabilizing mutation (C1 symmetry) determined using the SPT Labtech chameleon in the presence of 0.25x SurfACT | |||||||||||||||||||||||||||||||||
要素 | Hemagglutinin | |||||||||||||||||||||||||||||||||
キーワード | VIRAL PROTEIN / Hemagglutinin / Influenza A virus / H1N1 / Viral Entry / Trimer / Glycoprotein / Membrane Fusion | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報viral budding from plasma membrane / clathrin-dependent endocytosis of virus by host cell / host cell surface receptor binding / fusion of virus membrane with host plasma membrane / fusion of virus membrane with host endosome membrane / viral envelope / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / virion membrane / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 生物種 | ![]() Influenza A virus (A型インフルエンザウイルス) | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.94 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Enos, S.E. / Cook, B.D. / Rahmani, H. / Narehood, S.M. / Li, Y. / Kuschnerus, I.C. / Redford, H.T. / Dukakis, P. / Ji, D. / Bachochin, M.J. ...Enos, S.E. / Cook, B.D. / Rahmani, H. / Narehood, S.M. / Li, Y. / Kuschnerus, I.C. / Redford, H.T. / Dukakis, P. / Ji, D. / Bachochin, M.J. / Grotjahn, D.A. / Herzik, M.A. | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 資金援助 | 米国, 5件
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引用 | ジャーナル: bioRxiv / 年: 2026タイトル: A Surfactant Cocktail Overcomes Air-Water Interface Artifacts in Single-Particle CryoEM. 著者: Suzanne E Enos / Brian D Cook / Hamidreza Rahmani / Sarah M Narehood / Yizhou Li / Inga C Kuschnerus / Trevor H Redford / Peter Dukakis / Daniel Ji / Maxwell J Bachochin / Danielle A Grotjahn / Mark A Herzik / ![]() 要旨: Single-particle cryogenic electron microscopy (cryoEM) is a widely used technique for structure determination of biomacromolecules to near-atomic resolution. Random distributions of these molecules ...Single-particle cryogenic electron microscopy (cryoEM) is a widely used technique for structure determination of biomacromolecules to near-atomic resolution. Random distributions of these molecules in vitrified ice are necessary to accumulate enough two-dimensional views to generate a complete three-dimensional (3-D) reconstruction. However, interactions between the sample and the air-water interface (AWI) that occur during vitrification often bias the views of the sample, a phenomenon termed preferred orientation, limiting our ability to obtain 3-D reconstructions. Surfactants are often used as sample additives to prevent AWI-induced deterioration, but no general strategy exists for surfactant choice, requiring laborious screening for each sample. To circumvent these issues, we developed SurfACT, a cocktail of diverse surfactants with distinct physicochemical properties that limits AWI-dependent sample denaturation and orientation bias, while mitigating individual surfactant-specific drawbacks. Here we demonstrate SurfACT's effectiveness with four proteins plagued by AWI-induced issues, including two species of hemagglutinin (HA), molybdenum-iron protein (MoFeP) from the nitrogenase enzyme, and aldolase. All four samples show drastically improved viewing distribution and map completeness when SurfACT is applied. Cryogenic electron tomography demonstrates that SurfACT redistributes particles from the AWI into the bulk ice, driving signal recovery and inhibiting denaturation. This versatile sample additive minimizes sample-specific screening and expands the capabilities and range of suitable samples for cryoEM. | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 11mx.cif.gz | 308 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb11mx.ent.gz | 246.5 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 11mx.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/1m/11mx ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/1m/11mx | HTTPS FTP |
|---|
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 75851MC ![]() 11msC ![]() 11mtC ![]() 11muC ![]() 11mvC ![]() 11mzC ![]() 11naC ![]() 11nbC ![]() 11ncC ![]() 11ndC ![]() 11neC ![]() 11nfC ![]() 11nhC ![]() 11niC ![]() 11njC ![]() 11nkC ![]() 11nlC ![]() 11nmC ![]() 11nnC ![]() 11noC ![]() 11npC ![]() 11nrC ![]() 11ntC ![]() 11nuC ![]() 11nwC ![]() 11nxC ![]() 11obC ![]() 11ocC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
| #1: タンパク質 | 分子量: 64906.629 Da / 分子数: 3 / 変異: E47K / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() Influenza A virus (A型インフルエンザウイルス)遺伝子: HA / 細胞株 (発現宿主): Expi293F / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: A0A6M3Z334#2: 水 | ChemComp-HOH / | Has protein modification | Y | |
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-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: Influenza A virus Hemagglutinin (A/California/04/2009 H1N1), E47K HA2 stabilizing mutation (C1 symmetry) determined using the SPT Labtech chameleon in the presence of 0.25x SurfACT タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 分子量 | 値: 0.185 MDa / 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 由来(天然) | 生物種: ![]() Influenza A virus (A型インフルエンザウイルス) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液 | pH: 8 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 緩衝液成分 |
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| 試料 | 濃度: 3.7 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil Active R1.2/0.8 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 急速凍結 | 装置: SPT LABTECH CHAMELEON / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 75 % / 凍結前の試料温度: 298.15 K / 詳細: Samples were frozen with the SPT Labtech chameleon |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 165000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 2.7 mm / アライメント法: COMA FREE |
| 試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
| 撮影 | 平均露光時間: 5 sec. / 電子線照射量: 65 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: TFS FALCON 4i (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1966 |
| 電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: TFS Selectris X / エネルギーフィルタースリット幅: 10 eV |
| 画像スキャン | 横: 4096 / 縦: 4096 |
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解析
| EMソフトウェア |
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 2.94 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 26950 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | B value: 61.7 / プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | 詳細: ModelAngelo / Source name: Other / タイプ: experimental model | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 精密化 | 最高解像度: 2.94 Å 立体化学のターゲット値: REAL-SPACE (WEIGHTED MAP SUM AT ATOM CENTERS) | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
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ムービー
コントローラー
万見について





Influenza A virus (A型インフルエンザウイルス)
米国, 5件
引用


































































PDBj






Homo sapiens (ヒト)

FIELD EMISSION GUN