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- EMDB-50562: Aerolysin heptamer in membrane inserted form reconstituted in amp... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-50562
タイトルAerolysin heptamer in membrane inserted form reconstituted in amphipoles.
マップデータpostprocessed map of aerolysin heptamer in A8-35.
試料
  • 複合体: aerolysin heptamer in A8-35
    • タンパク質・ペプチド: Aerolysin
キーワードpore forming toxin / aerolysin / amphipole reconstitution / cryo-EM / TOXIN
機能・相同性
機能・相同性情報


symbiont-mediated cytolysis of host cell / toxin activity / host cell plasma membrane / extracellular region / identical protein binding
類似検索 - 分子機能
Aerolysin / : / Aerolysin toxin / Aerolysin toxin / Aerolysin/Pertussis toxin domain / Aerolysin/Pertussis toxin (APT), N-terminal domain superfamily / Aerolysin/Pertussis toxin (APT) domain / Aerolysin/haemolysin toxin, conserved site / Aerolysin type toxins signature. / C-type lectin fold
類似検索 - ドメイン・相同性
生物種Aeromonas hydrophila (バクテリア)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.2 Å
データ登録者Iacovache I / Zuber B
資金援助 スイス, 3件
OrganizationGrant number国
Swiss National Science Foundation31003A_179520 スイス
Swiss National Science Foundation32NE30_185536 スイス
Swiss National Science Foundation32NE30_185536 スイス
引用ジャーナル: J Am Chem Soc / 年: 2025
タイトル: Aerolysin Nanopore Structures Revealed at High Resolution in a Lipid Environment.
著者: Jana S Anton / Ioan Iacovache / Juan F Bada Juarez / Luciano A Abriata / Louis W Perrin / Chan Cao / Maria J Marcaida / Benoît Zuber / Matteo Dal Peraro /
要旨: Aerolysin is a β-pore-forming toxin produced by most Aeromonas bacteria, which has attracted large attention in the field of nanopore sensing due to its narrow and charged pore lumen. Structurally ...Aerolysin is a β-pore-forming toxin produced by most Aeromonas bacteria, which has attracted large attention in the field of nanopore sensing due to its narrow and charged pore lumen. Structurally similar proteins, belonging to the aerolysin-like family, are present throughout all kingdoms of life, but very few of them have been structurally characterized in a lipid environment. Here, we present the first high-resolution atomic cryo-EM structures of aerolysin prepore and pore in a membrane-like environment. These structures allow the identification of key interactions, which are relevant for understanding the pore formation mechanism and for correctly positioning the pore β-barrel and its anchoring β-turn motif in the membrane. Moreover, we elucidate at high resolution the architecture of key pore mutations and precisely identify four constriction rings in the pore lumen that are highly relevant for nanopore sensing experiments.
履歴
登録2024年6月6日-
ヘッダ(付随情報) 公開2025年2月12日-
マップ公開2025年2月12日-
更新2025年2月19日-
現状2025年2月19日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_50562.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_50562.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 52.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈postprocessed map of aerolysin heptamer in A8-35.
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
0.94 Å/pix.
x 240 pix.
= 225.6 Å		0.94 Å/pix.
x 240 pix.
= 225.6 Å		0.94 Å/pix.
x 240 pix.
= 225.6 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.94 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.015
最小 - 最大-0.10551148 - 0.18214285
平均 (標準偏差)0.00022193223 (±0.005799765)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ240240240
Spacing240240240
セルA=B=C: 225.6 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_50562_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: refinement map

ファイルemd_50562_additional_1.map
注釈refinement map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: half map 2

ファイルemd_50562_half_map_1.map
注釈half map 2
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: half map 1

ファイルemd_50562_half_map_2.map
注釈half map 1
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : aerolysin heptamer in A8-35

全体名称: aerolysin heptamer in A8-35
要素
  • 複合体: aerolysin heptamer in A8-35
    • タンパク質・ペプチド: Aerolysin

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超分子 #1: aerolysin heptamer in A8-35

超分子名称: aerolysin heptamer in A8-35 / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
詳細: Heptamerization was induced by trypsinization of proaerolysin.
由来(天然)生物種: Aeromonas hydrophila (バクテリア)
分子量理論値: 350 KDa

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分子 #1: Aerolysin

分子名称: Aerolysin / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 7 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Aeromonas hydrophila (バクテリア)
分子量理論値: 51.980453 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: AEPVYPDQLR LFSLGQGVCG DKYRPVNREE AQSVKSNIVG MMGQWQISGL ANGWVIMGPG YNGEIKPGTA SNTWCYPTNP VTGEIPTLS ALDIPDGDEV DVQWRLVHDS ANFIKPTSYL AHYLGYAWVG GNHSQYVGED MDVTRDGDGW VIRGNNDGGC D GYRCGDKT ...文字列:
AEPVYPDQLR LFSLGQGVCG DKYRPVNREE AQSVKSNIVG MMGQWQISGL ANGWVIMGPG YNGEIKPGTA SNTWCYPTNP VTGEIPTLS ALDIPDGDEV DVQWRLVHDS ANFIKPTSYL AHYLGYAWVG GNHSQYVGED MDVTRDGDGW VIRGNNDGGC D GYRCGDKT AIKVSNFAYN LDPDSFKHGD VTQSDRQLVK TVVGWAVNDS DTPQSGYDVT LRYDTATNWS KTNTYGLSEK VT TKNKFKW PLVGETELSI EIAANQSWAS QNGGSTTTSL SQSVRPTVPA RSKIPVKIEL YKADISYPYE FKADVSYDLT LSG FLRWGG NAWYTHPDNR PNWNHTFVIG PYKDKASSIR YQWDKRYIPG EVKWWDWNWT IQQNGLSTMQ NNLARVLRPV RAGI TGDFS AESQFAGNIE IGAPVPLAAD SKVRRARSVD GAGQGLRLEI PLDAQELSGL GFNNVSLSVT PAANQ

UniProtKB: Aerolysin

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度1 mg/mL
緩衝液pH: 7.4 / 詳細: 20mM Hepes 7.4 100mM NaCl 0.05% A8-35
グリッドモデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 2 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 5 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 2e-05 kPa
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 298 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: TFS Selectris / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k)
平均電子線量: 40.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 3.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.2 µm
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: EMDB MAP
EMDB ID:

8187

最終 再構成想定した対称性 - 点群: C7 (7回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 5) / 使用した粒子像数: 1070455
初期 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION
最終 角度割当タイプ: ANGULAR RECONSTITUTION / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 5)
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルChain - Source name: Other / Chain - Initial model type: other / 詳細: modelangelo
詳細ModelAngelo was used with the final map to generate the first model.
精密化プロトコル: OTHER
得られたモデル

PDB-9fml:
Aerolysin heptamer in membrane inserted form reconstituted in amphipoles.

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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