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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Klebsiella pneumoniae DyP peroxidase-loaded encapsulin shell | |||||||||
![]() | Klebsiella pneumoniae DyP peroxidase-loaded encapsulin shell | |||||||||
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![]() | Encapsulin / nanocompartment / DyP peroxidase / VIRUS LIKE PARTICLE | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.52 Å | |||||||||
![]() | Andreas MP / Jones JA / Giessen TW | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural basis for peroxidase encapsulation inside the encapsulin from the Gram-negative pathogen Klebsiella pneumoniae. 著者: Jesse A Jones / Michael P Andreas / Tobias W Giessen / ![]() 要旨: Encapsulins are self-assembling protein nanocompartments capable of selectively encapsulating dedicated cargo proteins, including enzymes involved in iron storage, sulfur metabolism, and stress ...Encapsulins are self-assembling protein nanocompartments capable of selectively encapsulating dedicated cargo proteins, including enzymes involved in iron storage, sulfur metabolism, and stress resistance. They represent a unique compartmentalization strategy used by many pathogens to facilitate specialized metabolic capabilities. Encapsulation is mediated by specific cargo protein motifs known as targeting peptides (TPs), though the structural basis for encapsulation of the largest encapsulin cargo class, dye-decolorizing peroxidases (DyPs), is currently unknown. Here, we characterize a DyP-containing encapsulin from the enterobacterial pathogen Klebsiella pneumoniae. By combining cryo-electron microscopy with TP and TP-binding site mutagenesis, we elucidate the molecular basis for cargo encapsulation. TP binding is mediated by cooperative hydrophobic and ionic interactions as well as shape complementarity. Our results expand the molecular understanding of enzyme encapsulation inside protein nanocompartments and lay the foundation for rationally modulating encapsulin cargo loading for biomedical and biotechnological applications. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 204.1 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 18.7 KB 18.7 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 12.6 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 158.8 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 6.1 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 200.5 MB 200.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 21.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 27.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||
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注釈 | Klebsiella pneumoniae DyP peroxidase-loaded encapsulin shell | ||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.91 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: Half Map 1
ファイル | emd_41905_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | Half Map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half Map 2
ファイル | emd_41905_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | Half Map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Klebsiella pneumoniae DyP peroxidase-loaded encapsulin shell
全体 | 名称: Klebsiella pneumoniae DyP peroxidase-loaded encapsulin shell |
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要素 |
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-超分子 #1: Klebsiella pneumoniae DyP peroxidase-loaded encapsulin shell
超分子 | 名称: Klebsiella pneumoniae DyP peroxidase-loaded encapsulin shell タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
-超分子 #2: Klebsiella pneumoniae family 1 encapsulin shell
超分子 | 名称: Klebsiella pneumoniae family 1 encapsulin shell / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
-超分子 #3: Klebsiella pneumoniae encapsulated DyP peroxidase
超分子 | 名称: Klebsiella pneumoniae encapsulated DyP peroxidase / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 2 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
-分子 #1: Klebsiella pneumoniae family 1 encapsulin shell
分子 | 名称: Klebsiella pneumoniae family 1 encapsulin shell / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
分子量 | 理論値: 28.841129 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MNNLHRELAP VSDAAWEQIE EEASRTLKRF LAARRVVDVS DPQGPAFSAV GTGHVTRLEG PGDSVGAVKR QSQPVVEFRV PFILTRQAI DDVERGSQDS DWSPLKEAAR KIAGAEDRAV FDGYAAAGIG GIRPQSSNSP LTLPVAASGY PDVIARALDQ L RVAGVNGP ...文字列: MNNLHRELAP VSDAAWEQIE EEASRTLKRF LAARRVVDVS DPQGPAFSAV GTGHVTRLEG PGDSVGAVKR QSQPVVEFRV PFILTRQAI DDVERGSQDS DWSPLKEAAR KIAGAEDRAV FDGYAAAGIG GIRPQSSNSP LTLPVAASGY PDVIARALDQ L RVAGVNGP YHLVLGENAY TLITSGNEDG YPVLQHIHRL IDGEIVWAPA IEGGVLLSTR GGDFAMDIGQ DISIGYLSHT AT HVELYLQ ESFTFRTLTS EAVVSLLPSE D |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 3.0 mg/mL | |||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: 20 mM Tris pH 7.5, 150 mM NaCl | |||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 詳細: Glow discharged for 60 seconds at 5 mA | |||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: Blot force: 20 Blot time: 4 seconds. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - サイズ - 横: 3710 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3838 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1183 / 平均露光時間: 5.0 sec. / 平均電子線量: 41.67 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.8 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.8 µm / 倍率(公称値): 45000 |
試料ステージ | ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model |
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詳細 | Initial fitting was performed using ChimeraX v1.2.5. The model was then manually refined and mutated using Coot v9.8.1 followed by real-space refinement using Phenix v1.20.1-4487-000. |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 95.2 当てはまり具合の基準: Cross-correlation coefficient |
得られたモデル | ![]() PDB-8u50: |