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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-38935 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of E.coli spermidine transporter PotD-PotABC in pre-translocation state | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | ABC transporter / TRANSPORT PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 ABC-type polyamine transporter / ABC-type putrescine transporter activity / spermidine transmembrane transport / spermidine binding / spermidine transport / putrescine binding / putrescine transport / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / transmembrane transport / outer membrane-bounded periplasmic space ...ABC-type polyamine transporter / ABC-type putrescine transporter activity / spermidine transmembrane transport / spermidine binding / spermidine transport / putrescine binding / putrescine transport / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / transmembrane transport / outer membrane-bounded periplasmic space / ATP hydrolysis activity / ATP binding / membrane / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Qiao Z / Gao YG | |||||||||
資金援助 | シンガポール, 1件
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引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2024 タイトル: Structural insights into polyamine spermidine uptake by the ABC transporter PotD-PotABC. 著者: Zhu Qiao / Phong Hoa Do / Joshua Yi Yeo / Rya Ero / Zhuowen Li / Liying Zhan / Sandip Basak / Yong-Gui Gao / 要旨: Polyamines, characterized by their polycationic nature, are ubiquitously present in all organisms and play numerous cellular functions. Among polyamines, spermidine stands out as the predominant type ...Polyamines, characterized by their polycationic nature, are ubiquitously present in all organisms and play numerous cellular functions. Among polyamines, spermidine stands out as the predominant type in both prokaryotic and eukaryotic cells. The PotD-PotABC protein complex in , belonging to the adenosine triphosphate-binding cassette transporter family, is a spermidine-preferential uptake system. Here, we report structural details of the polyamine uptake system PotD-PotABC in various states. Our analyses reveal distinct "inward-facing" and "outward-facing" conformations of the PotD-PotABC transporter, as well as conformational changes in the "gating" residues (F222, Y223, D226, and K241 in PotB; Y219 and K223 in PotC) controlling spermidine uptake. Therefore, our structural analysis provides insights into how the PotD-PotABC importer recognizes the substrate-binding protein PotD and elucidates molecular insights into the spermidine uptake mechanism of bacteria. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_38935.map.gz | 27.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-38935-v30.xml emd-38935.xml | 18.1 KB 18.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_38935.png | 48.2 KB | ||
Filedesc metadata | emd-38935.cif.gz | 6.4 KB | ||
その他 | emd_38935_half_map_1.map.gz emd_38935_half_map_2.map.gz | 28.4 MB 28.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-38935 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-38935 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_38935_validation.pdf.gz | 773.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_38935_full_validation.pdf.gz | 772.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_38935_validation.xml.gz | 10.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_38935_validation.cif.gz | 12.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-38935 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-38935 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_38935.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.216 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_38935_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_38935_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : ABC transporter
全体 | 名称: ABC transporter |
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要素 |
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-超分子 #1: ABC transporter
超分子 | 名称: ABC transporter / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#4 |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 186.1 kDa/nm |
-分子 #1: Spermidine/putrescine import ATP-binding protein PotA
分子 | 名称: Spermidine/putrescine import ATP-binding protein PotA タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 43.079137 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MGQSKKLNKQ PSSLSPLVQL AGIRKCFDGK EVIPQLDLTI NNGEFLTLLG PSGCGKTTVL RLIAGLETVD SGRIMLDNED ITHVPAENR YVNTVFQSYA LFPHMTVFEN VAFGLRMQKT PAAEITPRVM EALRMVQLET FAQRKPHQLS GGQQQRVAIA R AVVNKPRL ...文字列: MGQSKKLNKQ PSSLSPLVQL AGIRKCFDGK EVIPQLDLTI NNGEFLTLLG PSGCGKTTVL RLIAGLETVD SGRIMLDNED ITHVPAENR YVNTVFQSYA LFPHMTVFEN VAFGLRMQKT PAAEITPRVM EALRMVQLET FAQRKPHQLS GGQQQRVAIA R AVVNKPRL LLLDQSLSAL DYKLRKQMQN ELKALQRKLG ITFVFVTHDQ EEALTMSDRI VVMRDGRIEQ DGTPREIYEE PK NLFVAGF IGEINMFNAT VIERLDEQRV RANVEGRECN IYVNFAVEPG QKLHVLLRPE DLRVEEINDD NHAEGLIGYV RER NYKGMT LESVVELENG KMVMVSEFFN EDDPDFDHSL DQKMAINWVE SWEVVLADEE HK UniProtKB: Spermidine/putrescine import ATP-binding protein PotA |
-分子 #2: Spermidine/putrescine ABC transporter membrane protein
分子 | 名称: Spermidine/putrescine ABC transporter membrane protein タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 32.234164 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MKNTSKFQNV VIVTIVGWLV LFVFLPNLMI IGTSFLTRDD ASFVKMVFTL DNYTRLLDPL YFEVLLHSLN MALIATLACL VLGYPFAWF LAKLPHKVRP LLLFLLIVPF WTNSLIRIYG LKIFLSTKGY LNEFLLWLGV IDTPIRIMFT PSAVIIGLVY I LLPFMVMP ...文字列: MKNTSKFQNV VIVTIVGWLV LFVFLPNLMI IGTSFLTRDD ASFVKMVFTL DNYTRLLDPL YFEVLLHSLN MALIATLACL VLGYPFAWF LAKLPHKVRP LLLFLLIVPF WTNSLIRIYG LKIFLSTKGY LNEFLLWLGV IDTPIRIMFT PSAVIIGLVY I LLPFMVMP LYSSIEKLDK PLLEAARDLG ASKLQTFIRI IIPLTMPGII AGCLLVMLPA MGLFYVSDLM GGAKNLLIGN VI KVQFLNI RDWPFGAATS ITLTIVMGLM LLVYWRASRL LNKKVELE UniProtKB: Spermidine/putrescine ABC transporter membrane protein |
-分子 #3: Spermidine/putrescine transport system permease protein PotC
分子 | 名称: Spermidine/putrescine transport system permease protein PotC タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 29.13285 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MIGRLLRGGF MTAIYAYLYI PIIILIVNSF NSSRFGINWQ GFTTKWYSLL MNNDSLLQAA QHSLTMAVFS ATFATLIGSL TAVALYRYR FRGKPFVSGM LFVVMMSPDI VMAISLLVLF MLLGIQLGFW SLLFSHITFC LPFVVVTVYS RLKGFDVRML E AAKDLGAS ...文字列: MIGRLLRGGF MTAIYAYLYI PIIILIVNSF NSSRFGINWQ GFTTKWYSLL MNNDSLLQAA QHSLTMAVFS ATFATLIGSL TAVALYRYR FRGKPFVSGM LFVVMMSPDI VMAISLLVLF MLLGIQLGFW SLLFSHITFC LPFVVVTVYS RLKGFDVRML E AAKDLGAS EFTILRKIIL PLAMPAVAAG WVLSFTLSMD DVVVSSFVTG PSYEILPLKI YSMVKVGVSP EVNALATILL VL SLVMVIA SQLIARDKTK GNTGDVK UniProtKB: Spermidine/putrescine transport system permease protein PotC |
-分子 #4: Spermidine/putrescine-binding periplasmic protein
分子 | 名称: Spermidine/putrescine-binding periplasmic protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 38.906938 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MKKWSRHLLA AGALALGMSA AHADDNNTLY FYNWTEYVPP GLLEQFTKET GIKVIYSTYE SNETMYAKLK TYKDGAYDLV VPSTYYVDK MRKEGMIQKI DKSKLTNFSN LDPDMLNKPF DPNNDYSIPY IWGATAIGVN GDAVDPKSVT SWADLWKPEY K GSLLLTDD ...文字列: MKKWSRHLLA AGALALGMSA AHADDNNTLY FYNWTEYVPP GLLEQFTKET GIKVIYSTYE SNETMYAKLK TYKDGAYDLV VPSTYYVDK MRKEGMIQKI DKSKLTNFSN LDPDMLNKPF DPNNDYSIPY IWGATAIGVN GDAVDPKSVT SWADLWKPEY K GSLLLTDD AREVFQMALR KLGYSGNTTD PKEIEAAYNE LKKLMPNVAA FNSDNPANPY MEGEVNLGMI WNGSAFVARQ AG TPIDVVW PKEGGIFWMD SLAIPANAKN KEGALKLINF LLRPDVAKQV AETIGYPTPN LAARKLLSPE VANDKTLYPD AET IKNGEW QNDVGAASSI YEEYYQKLKA GR UniProtKB: Spermidine/putrescine-binding periplasmic protein |
-分子 #5: SPERMIDINE
分子 | 名称: SPERMIDINE / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 1 / 式: SPD |
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分子量 | 理論値: 145.246 Da |
Chemical component information | ChemComp-SPD: |
-分子 #6: water
分子 | 名称: water / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 1 / 式: HOH |
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分子量 | 理論値: 18.015 Da |
Chemical component information | ChemComp-HOH: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 10 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 61273 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |