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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Lumazine Synthase from Aquifex aeolicus | |||||||||
![]() | CryoEM map of Lumazine synthase from Aquifex aeolicus at 2.3 Angstrom resolution | |||||||||
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![]() | Thermostable Transferase / TRANSFERASE | |||||||||
機能・相同性 | ![]() 6,7-dimethyl-8-ribityllumazine synthase / 6,7-dimethyl-8-ribityllumazine synthase activity / riboflavin synthase complex / riboflavin biosynthetic process / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.33 Å | |||||||||
![]() | Sobhy MA / Hamdan SM | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cryo-electron structures of the extreme thermostable enzymes Sulfur Oxygenase Reductase and Lumazine Synthase. 著者: Mohamed A Sobhy / Lingyun Zhao / Dalaver Anjum / Ali Behzad / Masateru Takahashi / Muhammad Tehseen / Alfredo De Biasio / Rachid Sougrat / Samir Hamdan / ![]() 要旨: Thermostable enzymes have the potential for use in a wide variety of biotechnological applications. Cryo-electron microscopy (cryo-EM) enables the imaging of biomolecules in their native aqueous ...Thermostable enzymes have the potential for use in a wide variety of biotechnological applications. Cryo-electron microscopy (cryo-EM) enables the imaging of biomolecules in their native aqueous environment. Here, we present high resolution cryo-EM structures of two thermostable enzymes that exhibit multimeric cage-like structures arranged into two different point-group symmetries. First, we determined the structure of the Sulfur Oxygenase Reductase (SOR) enzyme that catalyzes both the oxygenation and disproportionation of elemental sulfur in Archea and is composed of 24 homomeric units each of MW ≃ 35 kDa arranged in octahedral symmetry. The structure of SOR from Acidianus ambivalens (7X9W) was determined at 2.78 Å resolution. The active site of each subunit inside the central nanocompartment is composed of Fe3+ coordinated to two water molecules and the three amino acids (H86, H90 and E114). Second, we determined the structure of Lumazine Synthase (LS) from Aquifex aeolicus (7X7M) at 2.33 Å resolution. LS forms a cage-like structure consisting of 60 identical subunits each of MW ≃ 15 kDa arranged in a strict icosahedral symmetry. The LS subunits are interconnected by ion-pair network. Due to their thermostability and relatively easy purification scheme, both SOR and LS can serve as a model for the catalytic and structural characterization of biocatalysts as well as a benchmark for cryo-EM sample preparation, optimization of the acquisition parameters and 3D reconstruction. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 128.2 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 15.8 KB 15.8 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 11.6 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 313.4 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 5.7 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 107.2 MB 107.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 18.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 24.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 7x7mMC ![]() 7x9wC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||
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注釈 | CryoEM map of Lumazine synthase from Aquifex aeolicus at 2.3 Angstrom resolution | ||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.06 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: half map 2
ファイル | emd_33041_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map 1
ファイル | emd_33041_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : CryoEM structure of Lumazine synthase composed of 60 identical su...
全体 | 名称: CryoEM structure of Lumazine synthase composed of 60 identical subunits |
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要素 |
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-超分子 #1: CryoEM structure of Lumazine synthase composed of 60 identical su...
超分子 | 名称: CryoEM structure of Lumazine synthase composed of 60 identical subunits タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
-分子 #1: 6,7-dimethyl-8-ribityllumazine synthase
分子 | 名称: 6,7-dimethyl-8-ribityllumazine synthase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 60 / 光学異性体: LEVO / EC番号: 6,7-dimethyl-8-ribityllumazine synthase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 16.727201 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MQIYEGKLTA EGLRFGIVAS RFNHALVDRL VEGAIDCIVR HGGREEDITL VRVPGSWEIP VAAGELARKE DIDAVIAIGV LIRGATPHF DYIASEVSKG LANLSLELRK PITFGVITAD TLEQAIERAG TKHGNKGWEA ALSAIEMANL FKSLR UniProtKB: 6,7-dimethyl-8-ribityllumazine synthase |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 6 mg/mL | |||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. | |||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 295 K / 装置: FEI VITROBOT MARK I 詳細: The purified protein was applied to the glow discharged grids inside the chamber, blotted for a duration of 1.5 s, and then plunge-frozen in liquid ethane cooled by liquid nitrogen.. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 平均電子線量: 70.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.2 µm / 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |