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- EMDB-3064: Cryo-EM structure of the Slo2.2 Na+-activated K+ channel -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-3064
タイトルCryo-EM structure of the Slo2.2 Na+-activated K+ channel
マップデータFocus refinement of chicken Slo2.2 transmembrane domain
試料
  • 試料: chicken Slo2.2
  • タンパク質・ペプチド: Slo2.2
キーワードIon channel / potassium channel
機能・相同性
機能・相同性情報


intracellular sodium-activated potassium channel activity / outward rectifier potassium channel activity / potassium ion transmembrane transport / protein homotetramerization / metal ion binding / plasma membrane
類似検索 - 分子機能
Calcium-activated potassium channel BK, alpha subunit / : / Calcium-activated BK potassium channel alpha subunit / Calcium-activated potassium channel slowpoke-like RCK domain / Regulator of K+ conductance, N-terminal / RCK N-terminal domain profile. / Potassium channel domain / Ion channel
類似検索 - ドメイン・相同性
Potassium channel subfamily T member 1
類似検索 - 構成要素
生物種Gallus gallus (ニワトリ)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.2 Å
データ登録者Hite RK / Yuan P / Li Z / Hsuing Y / Walz T / MacKinnon R
引用ジャーナル: Nature / 年: 2015
タイトル: Cryo-electron microscopy structure of the Slo2.2 Na(+)-activated K(+) channel.
著者: Richard K Hite / Peng Yuan / Zongli Li / Yichun Hsuing / Thomas Walz / Roderick MacKinnon /
要旨: Na(+)-activated K(+) channels are members of the Slo family of large conductance K(+) channels that are widely expressed in the brain, where their opening regulates neuronal excitability. These ...Na(+)-activated K(+) channels are members of the Slo family of large conductance K(+) channels that are widely expressed in the brain, where their opening regulates neuronal excitability. These channels fulfil a number of biological roles and have intriguing biophysical properties, including conductance levels that are ten times those of most other K(+) channels and gating sensitivity to intracellular Na(+). Here we present the structure of a complete Na(+)-activated K(+) channel, chicken Slo2.2, in the Na(+)-free state, determined by cryo-electron microscopy at a nominal resolution of 4.5 ångströms. The channel is composed of a large cytoplasmic gating ring, in which resides the Na(+)-binding site and a transmembrane domain that closely resembles voltage-gated K(+) channels. In the structure, the cytoplasmic domain adopts a closed conformation and the ion conduction pore is also closed. The structure reveals features that can explain the unusually high conductance of Slo channels and how contraction of the cytoplasmic gating ring closes the pore.
履歴
登録2015年6月25日-
ヘッダ(付随情報) 公開2015年8月12日-
マップ公開2015年10月14日-
更新2015年11月25日-
現状2015年11月25日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.015
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.015
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-5a6g
  • 表面レベル: 0.015
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-5a6g
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_3064.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_3064.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 62.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Focus refinement of chicken Slo2.2 transmembrane domain
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.04 Å/pix.
x 256 pix.
= 266.24 Å		1.04 Å/pix.
x 256 pix.
= 266.24 Å		1.04 Å/pix.
x 256 pix.
= 266.24 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.04 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.015 / ムービー #1: 0.015
最小 - 最大-0.00896501 - 0.03216699
平均 (標準偏差)0.00063002 (±0.00273895)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ256256256
Spacing256256256
セルA=B=C: 266.24 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.041.041.04
M x/y/z256256256
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z266.240266.240266.240
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS256256256
D min/max/mean-0.0090.0320.001

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : chicken Slo2.2

全体名称: chicken Slo2.2
要素
  • 試料: chicken Slo2.2
  • タンパク質・ペプチド: Slo2.2

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超分子 #1000: chicken Slo2.2

超分子名称: chicken Slo2.2 / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: tetramer / Number unique components: 1
分子量理論値: 550 KDa

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分子 #1: Slo2.2

分子名称: Slo2.2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: Slack, KCNT1 / コピー数: 4 / 集合状態: tetramer / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Gallus gallus (ニワトリ) / 別称: chicken / 細胞中の位置: Plasma membrane
分子量実験値: 550 KDa
組換発現生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
組換細胞: Sf9 / 組換プラスミド: pFastbac
配列UniProtKB: Potassium channel subfamily T member 1

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度4.0 mg/mL
緩衝液pH: 7.4
詳細: 20 mM HEPES pH 7.4, 300 mM KCl, 1.5 mM dodecyl maltoside, 0.05 mg/ml POPE:POPG (3:1)
グリッド詳細: 300 mesh Cu Quantifoil R1.2 / 1.3
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 84 % / チャンバー内温度: 120 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 手法: 4 second blot prior to plunging

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
アライメント法Legacy - 非点収差: FEI Image corrector
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: Gatan
エネルギーフィルター - エネルギー下限: 0.0 eV
エネルギーフィルター - エネルギー上限: 30.0 eV
日付2014年7月7日
撮影カテゴリ: CCD / フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 (4k x 4k) / デジタル化 - サンプリング間隔: 5 µm / 実像数: 2243 / 平均電子線量: 40 e/Å2
詳細: 25 sub-frames were recorded for each image in super-resolution counting mode.
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系倍率（補正後）: 105000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 4.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.5 µm / 倍率（公称値）: 105000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

詳細Manually picked particles with BOXER. 2D and 3D classification in RELION. Final map generated with FREALIGN using a mask that included only the transmembrane domain.
CTF補正詳細: Each Image
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C4 (4回回転対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 5.2 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: SPARX, RELION / 使用した粒子像数: 11303

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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