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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-22754 | |||||||||
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タイトル | Aldolase, rabbit muscle (no beam-tilt refinement) | |||||||||
![]() | Aldolase, rabbit muscle (no beam-tilt refinement) | |||||||||
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![]() | glycolysis / gluconeogenesis / Carbohydrate degradation / Homotetramer / LYASE | |||||||||
機能・相同性 | ![]() negative regulation of Arp2/3 complex-mediated actin nucleation / fructose-bisphosphate aldolase / fructose-bisphosphate aldolase activity / M band / I band / fructose 1,6-bisphosphate metabolic process / glycolytic process / protein homotetramerization / positive regulation of cell migration / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.9 Å | |||||||||
![]() | Cianfrocco MA / Kearns SE | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: High-resolution cryo-EM using beam-image shift at 200 keV. 著者: Jennifer N Cash / Sarah Kearns / Yilai Li / Michael A Cianfrocco / ![]() 要旨: Recent advances in single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM) data collection utilize beam-image shift to improve throughput. Despite implementation on 300 keV cryo-EM instruments, it ...Recent advances in single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM) data collection utilize beam-image shift to improve throughput. Despite implementation on 300 keV cryo-EM instruments, it remains unknown how well beam-image-shift data collection affects data quality on 200 keV instruments and the extent to which aberrations can be computationally corrected. To test this, a cryo-EM data set for aldolase was collected at 200 keV using beam-image shift and analyzed. This analysis shows that the instrument beam tilt and particle motion initially limited the resolution to 4.9 Å. After particle polishing and iterative rounds of aberration correction in , a 2.8 Å resolution structure could be obtained. This analysis demonstrates that software correction of microscope aberrations can provide a significant improvement in resolution at 200 keV. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 96.1 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 11.8 KB 11.8 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 10.7 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 74.1 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 5.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 7k9lMC ![]() 7k9xC ![]() 7ka2C ![]() 7ka3C ![]() 7ka4C M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | ![]() Data size: 87.6 Data #1: Unaligned micrographs of aldolase collected with beam-tilt at 200 kV [micrographs - single frame]) |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Aldolase, rabbit muscle (no beam-tilt refinement) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.91 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
-全体 : Homotetramer of aldolase
全体 | 名称: Homotetramer of aldolase |
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要素 |
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-超分子 #1: Homotetramer of aldolase
超分子 | 名称: Homotetramer of aldolase / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 157 kDa/nm |
-分子 #1: Fructose-bisphosphate aldolase A
分子 | 名称: Fructose-bisphosphate aldolase A / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 4 / 光学異性体: LEVO / EC番号: fructose-bisphosphate aldolase |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 39.263672 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() |
配列 | 文字列: PHSHPALTPE QKKELSDIAH RIVAPGKGIL AADESTGSIA KRLQSIGTEN TEENRRFYRQ LLLTADDRVN PCIGGVILFH ETLYQKADD GRPFPQVIKS KGGVVGIKVD KGVVPLAGTN GETTTQGLDG LSERCAQYKK DGADFAKWRC VLKIGEHTPS A LAIMENAN ...文字列: PHSHPALTPE QKKELSDIAH RIVAPGKGIL AADESTGSIA KRLQSIGTEN TEENRRFYRQ LLLTADDRVN PCIGGVILFH ETLYQKADD GRPFPQVIKS KGGVVGIKVD KGVVPLAGTN GETTTQGLDG LSERCAQYKK DGADFAKWRC VLKIGEHTPS A LAIMENAN VLARYASICQ QNGIVPIVEP EILPDGDHDL KRCQYVTEKV LAAVYKALSD HHIYLEGTLL KPNMVTPGHA CT QKYSHEE IAMATVTALR RTVPPAVTGV TFLSGGQSEE EASINLNAIN KCPLLKPWAL TFSYGRALQA SALKAWGGKK ENL KAAQEE YVKRALANSL ACQGKYTPSG QAGAAASESL FISNHAY UniProtKB: Fructose-bisphosphate aldolase A |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 1.6 mg/mL | ||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 / 構成要素:
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グリッド | モデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 | ||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV | ||||||
詳細 | Pure aldolase isolated from rabbit muscle was purchased as a lyophilized powder (Sigma Aldrich) and solubilized in 20 mM HEPES (pH 7.5), 50 mM NaCl at 1.6 mg/ml. Sample was blotted for 4 seconds with Whatman No. #1 filter paper immediately prior to plunge freezing in liquid ethane cooled by liquid nitrogen. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 BASE (4k x 4k) 平均露光時間: 10.0 sec. / 平均電子線量: 42.0 e/Å2 詳細: Images were collected on a Talos Arctica transmission electron microscope (Thermo Fisher) operating at 200 keV with a gun lens of 6, a spot size of 6, 70 um C2 aperture and 100 um objective ...詳細: Images were collected on a Talos Arctica transmission electron microscope (Thermo Fisher) operating at 200 keV with a gun lens of 6, a spot size of 6, 70 um C2 aperture and 100 um objective aperture using beam-image shift. Movies were collected using a K2 direct electron detector (Gatan Inc.) operating in counting mode at 45,000x corresponding to a physical pixel size of 0.91 A/pixel with a 10 sec exposure using 200 ms per frame. Using an exposure rate of 4.204 e/pix/sec, each movie had a total dose of approximately 42 e/A2 for the 2,111 movies over a defocus 0.8-2 um. |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 0.002 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.0008 µm / 倍率(公称値): 45000 |
実験機器 | ![]() モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |