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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-19802 | |||||||||
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タイトル | Structure of a yeast 48S-AUC preinitiation complex in closed conformation (model py48S-AUC-3.1) | |||||||||
マップデータ | For optimal visualization of eIF2 and eIF3 PCIs and 3b beta-propeller domains, gauss-filter the map by 1.34 and display it at 0.015 contour level, respectively. | |||||||||
試料 |
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キーワード | ribosome / translation / initiation factors / 40S / eIF1A / AUC codon / eIF2 / tRNAi / 48S PIC / small ribosome subunit | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 formation of translation initiation ternary complex / Recycling of eIF2:GDP / Cellular response to mitochondrial stress / eukaryotic translation initiation factor 3 complex, eIF3e / ABC-family proteins mediated transport / eukaryotic translation initiation factor 3 complex, eIF3m / methionyl-initiator methionine tRNA binding / incipient cellular bud site / translation reinitiation / eukaryotic translation initiation factor 2 complex ...formation of translation initiation ternary complex / Recycling of eIF2:GDP / Cellular response to mitochondrial stress / eukaryotic translation initiation factor 3 complex, eIF3e / ABC-family proteins mediated transport / eukaryotic translation initiation factor 3 complex, eIF3m / methionyl-initiator methionine tRNA binding / incipient cellular bud site / translation reinitiation / eukaryotic translation initiation factor 2 complex / eukaryotic translation initiation factor 3 complex / formation of cytoplasmic translation initiation complex / multi-eIF complex / protein-synthesizing GTPase / eukaryotic 43S preinitiation complex / formation of translation preinitiation complex / eukaryotic 48S preinitiation complex / positive regulation of translational fidelity / Formation of the ternary complex, and subsequently, the 43S complex / Translation initiation complex formation / Ribosomal scanning and start codon recognition / Formation of a pool of free 40S subunits / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / ribosomal small subunit binding / 90S preribosome / endonucleolytic cleavage to generate mature 3'-end of SSU-rRNA from (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / translation regulator activity / endonucleolytic cleavage in ITS1 to separate SSU-rRNA from 5.8S rRNA and LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / translation initiation factor binding / translation initiation factor activity / rescue of stalled ribosome / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of SSU-rRNA / small-subunit processome / translational initiation / protein kinase C binding / modification-dependent protein catabolic process / cytoplasmic stress granule / protein tag activity / rRNA processing / ribosomal small subunit biogenesis / double-stranded RNA binding / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosome binding / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / cytosolic small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / protein ubiquitination / translation / ribonucleoprotein complex / positive regulation of protein phosphorylation / GTPase activity / mRNA binding / ubiquitin protein ligase binding / nucleolus / GTP binding / protein kinase binding / RNA binding / zinc ion binding / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Kluyveromyces lactis (strain ATCC 8585 / CBS 2359 / DSM 70799 / NBRC 1267 / NRRL Y-1140 / WM37) (酵母) / Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) (パン酵母) / Kluyveromyces lactis (酵母) / Kluyveromyces lactis NRRL Y-1140 (酵母) / Saccharomyces cerevisiae S288C (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.85 Å | |||||||||
データ登録者 | Villamayor-Belinchon L / Sharma P / Llacer JL / Hussain T | |||||||||
資金援助 | スペイン, インド, 2件
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引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2024 タイトル: Structural basis of AUC codon discrimination during translation initiation in yeast. 著者: Laura Villamayor-Belinchón / Prafful Sharma / Yuliya Gordiyenko / Jose L Llácer / Tanweer Hussain / 要旨: In eukaryotic translation initiation, the 48S preinitiation complex (PIC) scans the 5' untranslated region of mRNAs to search for the cognate start codon (AUG) with assistance from various ...In eukaryotic translation initiation, the 48S preinitiation complex (PIC) scans the 5' untranslated region of mRNAs to search for the cognate start codon (AUG) with assistance from various eukaryotic initiation factors (eIFs). Cognate start codon recognition is precise, rejecting near-cognate codons with a single base difference. However, the structural basis of discrimination of near-cognate start codons was not known. We have captured multiple yeast 48S PICs with a near-cognate AUC codon at the P-site, revealing that the AUC codon induces instability in the codon-anticodon at the P-site, leading to a disordered N-terminal tail of eIF1A. Following eIF1 dissociation, the N-terminal domain of eIF5 fails to occupy the vacant eIF1 position, and eIF2β becomes flexible. Consequently, 48S with an AUC codon is less favourable for initiation. Furthermore, we observe hitherto unreported metastable states of the eIF2-GTP-Met-tRNAMet ternary complex, where the eIF2β helix-turn-helix domain may facilitate eIF5 association by preventing eIF1 rebinding to 48S PIC. Finally, a swivelled head conformation of 48S PIC appears crucial for discriminating incorrect and selection of the correct codon-anticodon pair during translation initiation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_19802.map.gz | 92.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-19802-v30.xml emd-19802.xml | 74.8 KB 74.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_19802.png | 133.7 KB | ||
マスクデータ | emd_19802_msk_1.map | 103 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-19802.cif.gz | 15.8 KB | ||
その他 | emd_19802_half_map_1.map.gz emd_19802_half_map_2.map.gz | 89.2 MB 88.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-19802 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-19802 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_19802_validation.pdf.gz | 989.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_19802_full_validation.pdf.gz | 989 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_19802_validation.xml.gz | 13.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_19802_validation.cif.gz | 15.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-19802 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-19802 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8s8eMC 8rw1C 8s8dC 8s8fC 8s8gC 8s8hC 8s8iC 8s8jC 8s8kC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_19802.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | For optimal visualization of eIF2 and eIF3 PCIs and 3b beta-propeller domains, gauss-filter the map by 1.34 and display it at 0.015 contour level, respectively. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.34 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_19802_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Structure of a yeast 48S-AUC preinitiation complex in closed conf...
+超分子 #1: Structure of a yeast 48S-AUC preinitiation complex in closed conf...
+超分子 #2: Ribosome
+超分子 #3: tRNA
+超分子 #4: Initiation factor eIF1A
+超分子 #5: Initiation factor eIF2
+超分子 #6: mRNA
+超分子 #7: Initiation factor eIF3
+分子 #1: 18S ribosomal RNA
+分子 #37: mRNA (5'-R(P*AP*AP*U)-3')
+分子 #38: Met-tRNAi
+分子 #2: Small ribosomal subunit protein uS2
+分子 #3: Small ribosomal subunit protein eS1
+分子 #4: Small ribosomal subunit protein uS5
+分子 #5: 40S ribosomal protein S4
+分子 #6: Small ribosomal subunit protein eS6
+分子 #7: 40S ribosomal protein S7
+分子 #8: 40S ribosomal protein S8
+分子 #9: KLLA0E23673p
+分子 #10: KLLA0A10483p
+分子 #11: KLLA0F18040p
+分子 #12: Small ribosomal subunit protein uS11
+分子 #13: 40S ribosomal protein S21
+分子 #14: Small ribosomal subunit protein uS8
+分子 #15: KLLA0B11231p
+分子 #16: 40S ribosomal protein S24
+分子 #17: 40S ribosomal protein S26
+分子 #18: 40S ribosomal protein S27
+分子 #19: 40S ribosomal protein S30
+分子 #20: 40S ribosomal protein L41-A
+分子 #21: 40S ribosomal protein S3
+分子 #22: KLLA0D10659p
+分子 #23: KLLA0B08173p
+分子 #24: 40S ribosomal protein S12
+分子 #25: KLLA0F07843p
+分子 #26: Small ribosomal subunit protein uS9
+分子 #27: KLLA0B01474p
+分子 #28: KLLA0B01562p
+分子 #29: KLLA0A07194p
+分子 #30: Small ribosomal subunit protein uS10
+分子 #31: 40S ribosomal protein S25
+分子 #32: Small ribosomal subunit protein eS28
+分子 #33: Small ribosomal subunit protein uS14
+分子 #34: Small ribosomal subunit protein eS31
+分子 #35: KLLA0E12277p
+分子 #36: Eukaryotic translation initiation factor 1A
+分子 #39: Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit alpha
+分子 #40: Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit gamma
+分子 #41: Eukaryotic translation initiation factor 2 subunit beta
+分子 #42: Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit A
+分子 #43: Eukaryotic translation initiation factor 3 subunit C
+分子 #44: MAGNESIUM ION
+分子 #45: ZINC ION
+分子 #46: PHOSPHOMETHYLPHOSPHONIC ACID GUANYLATE ESTER
+分子 #47: METHIONINE
+分子 #48: water
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.1 mg/mL | ||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 6.5 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 30 sec. | ||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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温度 | 最低: 90.0 K / 最高: 100.0 K |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 検出モード: INTEGRATING / 撮影したグリッド数: 8 / 実像数: 11245 / 平均露光時間: 1.1 sec. / 平均電子線量: 30.0 e/Å2 詳細: Images were collected in movie-mode at 30 frames per second |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 59000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: RECIPROCAL / プロトコル: OTHER / 当てはまり具合の基準: FSC |
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得られたモデル | PDB-8s8e: |