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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-18374 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | cryo-EM structure complex of Frizzled-7 and Clostridioides difficile toxin B | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料 |
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キーワード | micriobiology / class F G protein-coupled receptors / CROP dynamics / TOXIN | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of ectodermal cell fate specification / negative regulation of cardiac muscle cell differentiation / mesenchymal to epithelial transition / skeletal muscle satellite cell maintenance involved in skeletal muscle regeneration / somatic stem cell division / Wnt receptor activity / non-canonical Wnt signaling pathway / positive regulation of epithelial cell proliferation involved in wound healing / glucosyltransferase activity / Wnt-protein binding ...negative regulation of ectodermal cell fate specification / negative regulation of cardiac muscle cell differentiation / mesenchymal to epithelial transition / skeletal muscle satellite cell maintenance involved in skeletal muscle regeneration / somatic stem cell division / Wnt receptor activity / non-canonical Wnt signaling pathway / positive regulation of epithelial cell proliferation involved in wound healing / glucosyltransferase activity / Wnt-protein binding / WNT5:FZD7-mediated leishmania damping / frizzled binding / PCP/CE pathway / Class B/2 (Secretin family receptors) / negative regulation of cell-substrate adhesion / regulation of canonical Wnt signaling pathway / Wnt signaling pathway, planar cell polarity pathway / host cell cytosol / 転移酵素; グリコシル基を移すもの; 六炭糖残基を移すもの / stem cell population maintenance / canonical Wnt signaling pathway / positive regulation of phosphorylation / cellular response to retinoic acid / phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate binding / cysteine-type peptidase activity / substrate adhesion-dependent cell spreading / host cell endosome membrane / Asymmetric localization of PCP proteins / G protein-coupled receptor activity / PDZ domain binding / positive regulation of JNK cascade / neuron differentiation / recycling endosome membrane / T cell differentiation in thymus / toxin activity / positive regulation of MAPK cascade / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素; システインプロテアーゼ / intracellular membrane-bounded organelle / lipid binding / regulation of DNA-templated transcription / host cell plasma membrane / positive regulation of DNA-templated transcription / proteolysis / extracellular region / membrane / metal ion binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
生物種 | Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) / Priestia megaterium DSM 319 (バクテリア) / Clostridioides difficile (バクテリア) / Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.26 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Kinsolving J / Bous J | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | スウェーデン, デンマーク, 11件
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引用 | ジャーナル: Cell Rep / 年: 2024 タイトル: Structural and functional insight into the interaction of Clostridioides difficile toxin B and FZD. 著者: Julia Kinsolving / Julien Bous / Pawel Kozielewicz / Sara Košenina / Rawan Shekhani / Lukas Grätz / Geoffrey Masuyer / Yuankai Wang / Pål Stenmark / Min Dong / Gunnar Schulte / 要旨: The G protein-coupled receptors of the Frizzled (FZD) family, in particular FZD, are receptors that are exploited by Clostridioides difficile toxin B (TcdB), the major virulence factor responsible ...The G protein-coupled receptors of the Frizzled (FZD) family, in particular FZD, are receptors that are exploited by Clostridioides difficile toxin B (TcdB), the major virulence factor responsible for pathogenesis associated with Clostridioides difficile infection. We employ a live-cell assay examining the affinity between full-length FZDs and TcdB. Moreover, we present cryoelectron microscopy structures of TcdB alone and in complex with full-length FZD, which reveal that large structural rearrangements of the combined repetitive polypeptide domain are required for interaction with FZDs and other TcdB receptors, constituting a first step for receptor recognition. Furthermore, we show that bezlotoxumab, an FDA-approved monoclonal antibody to treat Clostridioides difficile infection, favors the apo-TcdB structure and thus disrupts binding with FZD. The dynamic transition between the two conformations of TcdB also governs the stability of the pore-forming region. Thus, our work provides structural and functional insight into how conformational dynamics of TcdB determine receptor binding. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_18374.map.gz | 444.4 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-18374-v30.xml emd-18374.xml | 27.6 KB 27.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_18374_fsc.xml emd_18374_fsc_2.xml emd_18374_fsc_3.xml emd_18374_fsc_4.xml | 16.5 KB 16.4 KB 16.5 KB 16.5 KB | 表示 表示 表示 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_18374.png | 37.2 KB | ||
マスクデータ | emd_18374_msk_1.map emd_18374_msk_2.map emd_18374_msk_3.map | 476.8 MB 476.8 MB 476.8 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-18374.cif.gz | 8.8 KB | ||
その他 | emd_18374_half_map_1.map.gz emd_18374_half_map_2.map.gz | 443 MB 443 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-18374 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-18374 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_18374_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_18374_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_18374_validation.xml.gz | 25 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_18374_validation.cif.gz | 33.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-18374 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-18374 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8qeoMC 8qenC C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_18374.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 476.8 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.1592 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_18374_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-マスク #2
ファイル | emd_18374_msk_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-マスク #3
ファイル | emd_18374_msk_3.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_18374_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_18374_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Complex of Frizzled-7 and Clostridioides difficile toxin B
全体 | 名称: Complex of Frizzled-7 and Clostridioides difficile toxin B |
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要素 |
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-超分子 #1: Complex of Frizzled-7 and Clostridioides difficile toxin B
超分子 | 名称: Complex of Frizzled-7 and Clostridioides difficile toxin B タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2 |
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由来(天然) | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
-超分子 #2: masked region--CROP domain
超分子 | 名称: masked region--CROP domain / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Priestia megaterium DSM 319 (バクテリア) |
-超分子 #3: masked region-core domain
超分子 | 名称: masked region-core domain / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Priestia megaterium DSM 319 (バクテリア) |
-超分子 #4: masked region-FZD7 CRD and leg of TcdB
超分子 | 名称: masked region-FZD7 CRD and leg of TcdB / タイプ: organelle_or_cellular_component / ID: 4 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#2 |
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由来(天然) | 生物種: Priestia megaterium DSM 319 (バクテリア) |
-分子 #1: Toxin B
分子 | 名称: Toxin B / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Clostridioides difficile (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 273.551562 KDa |
組換発現 | 生物種: Priestia megaterium DSM 319 (バクテリア) |
配列 | 文字列: MDKLVHLNQR GKCTMSLVNR KQLEKMANVR FRTQEDEYVA ILDALEEYHN MSENTVVEKY LKLKDINSLT DIYIDTYKKS GRNKALKKF KEYLVTEVLE LKNNNLTPVE KNLHFVWIGG QINDTAINYI NQWKDVNSDY NVNVFYDSNA FLINTLKKTV V ESAINDTL ...文字列: MDKLVHLNQR GKCTMSLVNR KQLEKMANVR FRTQEDEYVA ILDALEEYHN MSENTVVEKY LKLKDINSLT DIYIDTYKKS GRNKALKKF KEYLVTEVLE LKNNNLTPVE KNLHFVWIGG QINDTAINYI NQWKDVNSDY NVNVFYDSNA FLINTLKKTV V ESAINDTL ESFRENLNDP RFDYNKFFRK RMEIIYDKQK NFINYYKAQR EENPELIIDD IVKTYLSNEY SKEIDELNTY IE ESLNKIT QNSGNDVRNF EEFKNGESFN LYEQELVERW NLAAASDILR ISALKEIGGM YLDVDMLPGI QPDLFESIEK PSS VTVDFW EMTKLEAIMK YKEYIPEYTS EHFDMLDEEV QSSFESVLAS KSDKSEIFSS LGDMEASPLE VKIAFNSKGI INQG LISVK DSYCSNLIVK QIENRYKILN NSLNPAISED NDFNTTTNTF IDSIMAEANA DNGRFMMELG KYLRVGFFPD VKTTI NLSG PEAYAAAYQD LLMFKEGSMN IHLIEADLRN FEISKTNISQ STEQEMASLW SFDDARAKAQ FEEYKRNYFE GSLGED DNL DFSQNIVVDK EYLLEKISSL ARSSERGYIH YIVQLQGDKI SYEAACNLFA KTPYDSVLFQ KNIEDSEIAY YYNPGDG EI QEIDKYKIPS IISDRPKIKL TFIGHGKDEF NTDIFAGFDV DSLSTEIEAA IDLAKEDISP KSIEINLLGC NMFSYSIN V EETYPGKLLL KVKDKISELM PSISQDSIIV SANQYEVRIN SEGRRELLDH SGEWINKEES IIKDISSKEY ISFNPKENK ITVKSKNLPE LSTLLQEIRN NSNSSDIELE EKVMLTECEI NVISNIDTQI VEERIEEAKN LTSDSINYIK DEFKLIESIS DALCDLKQQ NELEDSHFIS FEDISETDEG FSIRFINKET GESIFVETEK TIFSEYANHI TEEISKIKGT IFDTVNGKLV K KVNLDTTH EVNTLNAAFF IQSLIEYNSS KESLSNLSVA MKVQVYAQLF STGLNTITDA AKVVELVSTA LDETIDLLPT LS EGLPIIA TIIDGVSLGA AIKELSETSD PLLRQEIEAK IGIMAVNLTT ATTAIITSSL GIASGFSILL VPLAGISAGI PSL VNNELV LRDKATKVVD YFKHVSLVET EGVFTLLDDK IMMPQDDLVI SEIDFNNNSI VLGKCEIWRM EGGSGHTVTD DIDH FFSAP SITYREPHLS IYDVLEVQKE ELDLSKDLMV LPNAPNRVFA WETGWTPGLR SLENDGTKLL DRIRDNYEGE FYWRY FAFI ADALITTLKP RYEDTNIRIN LDSNTRSFIV PIITTEYIRE KLSYSFYGSG GTYALSLSQY NMGINIELSE SDVWII DVD NVVRDVTIES DKIKKGDLIE GILSTLSIEE NKIILNSHEI NFSGEVNGSN GFVSLTFSIL EGINAIIEVD LLSKSYK LL ISGELKILML NSNHIQQKID YIGFNSELQK NIPYSFVDSE GKENGFINGS TKEGLFVSEL PDVVLISKVY MDDSKPSF G YYSNNLKDVK VITKDNVNIL TGYYLKDDIK ISLSLTLQDE KTIKLNSVHL DESGVAEILK FMNRKGNTNT SDSLMSFLE SMNIKSIFVN FLQSNIKFIL DANFIISGTT SIGQFEFICD ENDNIQPYFI KFNTLETNYT LYVGNRQNMI VEPNYDLDDS GDISSTVIN FSQKYLYGID SCVNKVVISP NIYTDEINIT PVYETNNTYP EVIVLDANYI NEKINVNIND LSIRYVWSND G NDFILMST SEENKVSQVK IRFVNVFKDK TLANKLSFNF SDKQDVPVSE IILSFTPSYY EDGLIGYDLG LVSLYNEKFY IN NFGMMVS GLIYINDSLY YFKPPVNNLI TGFVTVGDDK YYFNPINGGA ASIGETIIDD KNYYFNQSGV LQTGVFSTED GFK YFAPAN TLDENLEGEA IDFTGKLIID ENIYYFDDNY RGAVEWKELD GEMHYFSPET GKAFKGLNQI GDYKYYFNSD GVMQ KGFVS INDNKHYFDD SGVMKVGYTE IDGKHFYFAE NGEMQIGVFN TEDGFKYFAH HNEDLGNEEG EEISYSGILN FNNKI YYFD DSFTAVVGWK DLEDGSKYYF DEDTAEAYIG LSLINDGQYY FNDDGIMQVG FVTINDKVFY FSDSGIIESG VQNIDD NYF YIDDNGIVQI GVFDTSDGYK YFAPANTVND NIYGQAVEYS GLVRVGEDVY YFGETYTIET GWIYDMENES DKYYFNP ET KKACKGINLI DDIKYYFDEK GIMRTGLISF ENNNYYFNEN GEMQFGYINI EDKMFYFGED GVMQIGVFNT PDGFKYFA H QNTLDENFEG ESINYTGWLD LDEKRYYFTD EYIAATGSVI IDGEEYYFDP DTAQLVISEG YRPHAGLRGS HHHHHH UniProtKB: Toxin B |
-分子 #2: Frizzled-7
分子 | 名称: Frizzled-7 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
分子量 | 理論値: 67.460859 KDa |
組換発現 | 生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ) |
配列 | 文字列: MKTIIALSYI FCLVFADYKD DDDQPYHGEK GISVPDHGFC QPISIPLCTD IAYNQTILPN LLGHTNQEDA GLEVHQFYPL VKVQCSPEL RFFLCSMYAP VCTVLDQAIP PCRSLCERAR QGCEALMNKF GFQWPERLRC ENFPVHGAGE ICVGQNTSDG S GGPGGGPT ...文字列: MKTIIALSYI FCLVFADYKD DDDQPYHGEK GISVPDHGFC QPISIPLCTD IAYNQTILPN LLGHTNQEDA GLEVHQFYPL VKVQCSPEL RFFLCSMYAP VCTVLDQAIP PCRSLCERAR QGCEALMNKF GFQWPERLRC ENFPVHGAGE ICVGQNTSDG S GGPGGGPT AYPTAPYLPD LPFTALPPGA SDGRGRPAFP FSCPRQLKVP PYLGYRFLGE RDCGAPCEPG RANGLMYFKE EE RRFARLW VGVWSVLCCA STLFTVLTYL VDMRRFSYPE RPIIFLSGCY FMVAVAHVAG FLLEDRAVCV ERFSDDGYRT VAQ GTKKEG CTILFMVLYF FGMASSIWWV ILSLTWFLAA GMKWGHEAIE ANSQYFHLAA WAVPAVKTIT ILAMGQVDGD LLSG VCYVG LSSVDALRGF VLAPLFVYLF IGTSFLLAGF VSLFRIRTIM KHDGTKTEKL EKLMVRIGVF SVLYTVPATI VLACY FYEQ AFREHWERTW LLQTCKSYAV PCPPGHFPPM SPDFTVFMIK YLMTMIVGIT TGFWIWSGKT LQSWRRFYHR LSHSSK GET AVSRLEVLFQ GPWSHPQFEK GGGSGGGSGG GSWSHPQFEK UniProtKB: Frizzled-7 |
-分子 #3: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 1 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.272 mg/mL | ||||||||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
詳細: 100 mM TRIS-HCl pH 7.5 200 mM NaCl 0.002% LMNG 0.0002% CHS 0.0002% GDN | ||||||||||||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.101 kPa | ||||||||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 17269 / 平均露光時間: 3.0 sec. / 平均電子線量: 50.453 e/Å2 詳細: Images collected in super-resolution mode, faster acquisition mode, with 4 exposures per hole |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 105000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm |
試料ステージ | ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | Chain - Source name: AlphaFold / Chain - Initial model type: in silico model |
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精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |
得られたモデル | PDB-8qeo: |