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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-16904 | |||||||||
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タイトル | Structure of the MlaCD complex (1:6 stoichiometry) | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Outer membrane / gram-negative bacteria / lipid transfer / antibiotic resistance / LIPID BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 phospholipid transfer activity / intermembrane phospholipid transfer / phospholipid transporter activity / phospholipid-translocating ATPase complex / phospholipid transport / phospholipid binding / outer membrane-bounded periplasmic space / membrane / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.35 Å | |||||||||
データ登録者 | Wotherspoon P / Bui S / Sridhar P / Bergeron JRC / Knowles TJ | |||||||||
資金援助 | 英国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: Structure of the MlaC-MlaD complex reveals molecular basis of periplasmic phospholipid transport. 著者: Peter Wotherspoon / Hannah Johnston / David J Hardy / Rachel Holyfield / Soi Bui / Giedrė Ratkevičiūtė / Pooja Sridhar / Jonathan Colburn / Charlotte B Wilson / Adam Colyer / Benjamin F ...著者: Peter Wotherspoon / Hannah Johnston / David J Hardy / Rachel Holyfield / Soi Bui / Giedrė Ratkevičiūtė / Pooja Sridhar / Jonathan Colburn / Charlotte B Wilson / Adam Colyer / Benjamin F Cooper / Jack A Bryant / Gareth W Hughes / Phillip J Stansfeld / Julien R C Bergeron / Timothy J Knowles / 要旨: The Maintenance of Lipid Asymmetry (Mla) pathway is a multicomponent system found in all gram-negative bacteria that contributes to virulence, vesicle blebbing and preservation of the outer membrane ...The Maintenance of Lipid Asymmetry (Mla) pathway is a multicomponent system found in all gram-negative bacteria that contributes to virulence, vesicle blebbing and preservation of the outer membrane barrier function. It acts by removing ectopic lipids from the outer leaflet of the outer membrane and returning them to the inner membrane through three proteinaceous assemblies: the MlaA-OmpC complex, situated within the outer membrane; the periplasmic phospholipid shuttle protein, MlaC; and the inner membrane ABC transporter complex, MlaFEDB, proposed to be the founding member of a structurally distinct ABC superfamily. While the function of each component is well established, how phospholipids are exchanged between components remains unknown. This stands as a major roadblock in our understanding of the function of the pathway, and in particular, the role of ATPase activity of MlaFEDB is not clear. Here, we report the structure of E. coli MlaC in complex with the MlaD hexamer in two distinct stoichiometries. Utilising in vivo complementation assays, an in vitro fluorescence-based transport assay, and molecular dynamics simulations, we confirm key residues, identifying the MlaD β6-β7 loop as essential for MlaCD function. We also provide evidence that phospholipids pass between the C-terminal helices of the MlaD hexamer to reach the central pore, providing insight into the trajectory of GPL transfer between MlaC and MlaD. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_16904.map.gz | 154.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-16904-v30.xml emd-16904.xml | 15.2 KB 15.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_16904.png | 32.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-16904.cif.gz | 5.6 KB | ||
その他 | emd_16904_half_map_1.map.gz emd_16904_half_map_2.map.gz | 151.6 MB 151.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16904 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-16904 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_16904_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_16904_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_16904_validation.xml.gz | 14.5 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_16904_validation.cif.gz | 17 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16904 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-16904 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8oj4MC 8ojgC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_16904.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 163.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.71 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_16904_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_16904_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : MlaCD
全体 | 名称: MlaCD |
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要素 |
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-超分子 #1: MlaCD
超分子 | 名称: MlaCD / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-分子 #1: Intermembrane phospholipid transport system binding protein MlaC
分子 | 名称: Intermembrane phospholipid transport system binding protein MlaC タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 23.989559 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MFKRLMMVAL LVIAPLSAAT AADQTNPYKL MDEAAQKTFD RLKNEQPQIR ANPDYLRTIV DQELLPYVQV KYAGALVLGQ YYKSATPAQ REAYFAAFRE YLKQAYGQAL AMYHGQTYQI APEQPLGDKT IVPIRVTIID PNGRPPVRLD FQWRKNSQTG N WQAYDMIA ...文字列: MFKRLMMVAL LVIAPLSAAT AADQTNPYKL MDEAAQKTFD RLKNEQPQIR ANPDYLRTIV DQELLPYVQV KYAGALVLGQ YYKSATPAQ REAYFAAFRE YLKQAYGQAL AMYHGQTYQI APEQPLGDKT IVPIRVTIID PNGRPPVRLD FQWRKNSQTG N WQAYDMIA EGVSMITTKQ NEWGTLLRTK GIDGLTAQLK SISQQKITLE EKK UniProtKB: Intermembrane phospholipid transport system binding protein MlaC |
-分子 #2: Intermembrane phospholipid transport system binding protein MlaD
分子 | 名称: Intermembrane phospholipid transport system binding protein MlaD タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 6 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 19.593133 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MQTKKNEIWV GIFLLAALLA ALFVCLKAAN VTSIRTEPTY TLYATFDNIG GLKARSPVSI GGVVVGRVAD ITLDPKTYLP RVTLEIEQR YNHIPDTSSL SIRTSGLLGE QYLALNVGFE DPELGTAILK DGDTIQDTKS AMVLEDLIGQ FLYGSKGDDN K NSGDAPAA APGNNETTEP VGTTK UniProtKB: Intermembrane phospholipid transport system binding protein MlaD |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.35 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 97460 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |