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基本情報
登録情報 | ![]() | |||||||||
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タイトル | Polymerase module of yeast CPF in complex with Mpe1, the yPIM of Cft2 and the pre-cleaved CYC1 RNA | |||||||||
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機能・相同性 | ![]() Processing of Intronless Pre-mRNAs / termination of RNA polymerase II transcription, poly(A)-coupled / intracellular organelle / mRNA cleavage and polyadenylation specificity factor complex / mRNA 3'-end processing / termination of RNA polymerase II transcription / : / ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() ![]() 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | |||||||||
手法 | ![]() ![]() | |||||||||
![]() | Rodriguez-Molina JB / Passmore LA | |||||||||
資金援助 | European Union, ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Mpe1 senses the binding of pre-mRNA and controls 3' end processing by CPF. 著者: Juan B Rodríguez-Molina / Francis J O'Reilly / Holly Fagarasan / Eleanor Sheekey / Sarah Maslen / J Mark Skehel / Juri Rappsilber / Lori A Passmore / ![]() ![]() 要旨: Most eukaryotic messenger RNAs (mRNAs) are processed at their 3' end by the cleavage and polyadenylation specificity factor (CPF/CPSF). CPF mediates the endonucleolytic cleavage of the pre-mRNA and ...Most eukaryotic messenger RNAs (mRNAs) are processed at their 3' end by the cleavage and polyadenylation specificity factor (CPF/CPSF). CPF mediates the endonucleolytic cleavage of the pre-mRNA and addition of a polyadenosine (poly(A)) tail, which together define the 3' end of the mature transcript. The activation of CPF is highly regulated to maintain the fidelity of RNA processing. Here, using cryo-EM of yeast CPF, we show that the Mpe1 subunit directly contacts the polyadenylation signal sequence in nascent pre-mRNA. The region of Mpe1 that contacts RNA also promotes the activation of CPF endonuclease activity and controls polyadenylation. The Cft2 subunit of CPF antagonizes the RNA-stabilized configuration of Mpe1. In vivo, the depletion or mutation of Mpe1 leads to widespread defects in transcription termination by RNA polymerase II, resulting in transcription interference on neighboring genes. Together, our data suggest that Mpe1 plays a major role in accurate 3' end processing, activating CPF, and ensuring timely transcription termination. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 166.7 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 25.6 KB 25.6 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 88.8 KB | ||
その他 | ![]() ![]() | 140.7 MB 140.6 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.825 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_14712_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_14712_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : polymerase module-Mpe1-yPIM-RNA
全体 | 名称: polymerase module-Mpe1-yPIM-RNA |
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要素 |
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-超分子 #1: polymerase module-Mpe1-yPIM-RNA
超分子 | 名称: polymerase module-Mpe1-yPIM-RNA / タイプ: complex / キメラ: Yes / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#6 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
-分子 #1: Protein CFT1
分子 | 名称: Protein CFT1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 153.577156 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MNVYDDVLDA TVVSHSLATH FTTSDYEELL VVRTNILSVY RPTRDGKLYL TDEFKFHGLI TDIGLIPQKD SPLSCLLLCT GVAKISILK FNTLTNSIDT LSLHYYEGKF KGKSLVELAK ISTLRMDPGS SCALLFNNDI IAFLPFHVNK NDDDEEEEDE D ENIDDSEL ...文字列: MNVYDDVLDA TVVSHSLATH FTTSDYEELL VVRTNILSVY RPTRDGKLYL TDEFKFHGLI TDIGLIPQKD SPLSCLLLCT GVAKISILK FNTLTNSIDT LSLHYYEGKF KGKSLVELAK ISTLRMDPGS SCALLFNNDI IAFLPFHVNK NDDDEEEEDE D ENIDDSEL IHSMNQKSQG TNTFNKRKRT KLGDKFTAPS VVLVASELYE GAKNIIDIQF LKNFTKPTIA LLYQPKLVWA GN TTISKLP TQYVILTLNI QPAESATKIE STTIAFVKEL PWDLHTIVPV SNGAIIVGTN ELAFLDNTGV LQSTVLLNSF ADK ELQKTK IINNSSLEIM FREKNTTSIW IPSSKSKNGG SNNDETLLLM DLKSNIYYIQ MEAEGRLLIK FDIFKLPIVN DLLK ENSNP KCITRLNATN SNKNMDLFIG FGSGNALVLR LNNLKSTIET REAHNPSSGT NSLMDINDDD DEEMDDLYAD EAPEN GLTT NDSKGTVETV QPFDIELLSS LRNVGPITSL TVGKVSSIDD VVKGLPNPNK NEYSLVATSG NGSGSHLTVI QTSVQP EIE LALKFISITQ IWNLKIKGRD RYLITTDSTK SRSDIYESDN NFKLHKGGRL RRDATTVYIS MFGEEKRIIQ VTTNHLY LY DTHFRRLTTI KFDYEVIHVS VMDPYILVTV SRGDIKIFEL EEKNKRKLLK VDLPEILNEM VITSGLILKS NMCNEFLI G LSKSQEEQLL FTFVTADNQI IFFTKDHNDR IFQLNGVDQL NESLYISTYQ LGDEIVPDPS IKQVMINKLG HDNKEEYLT ILTFGGEIYQ YRKLPQRRSR FYRNVTRNDL AITGAPDNAY AKGVSSIERI MHYFPDYNGY SVIFVTGSVP YILIKEDDST PKIFKFGNI PLVSVTPWSE RSVMCVDDIK NARVYTLTTD NMYYGNKLPL KQIKISNVLD DYKTLQKLVY HERAQLFLVS Y CKRVPYEA LGEDGEKVIG YDENVPHAEG FQSGILLINP KSWKVIDKID FPKNSVVNEM RSSMIQINSK TKRKREYIIA GV ANATTED TPPTGAFHIY DVIEVVPEPG KPDTNYKLKE IFQEEVSGTV STVCEVSGRF MISQSQKVLV RDIQEDNSVI PVA FLDIPV FVTDSKSFGN LLIIGDAMQG FQFIGFDAEP YRMISLGRSM SKFQTMSLEF LVNGGDMYFA ATDADRNVHV LKYA PDEPN SLSGQRLVHC SSFTLHSTNS CMMLLPRNEE FGSPQVPSFQ NVGGQVDGSV FKIVPLSEEK YRRLYVIQQQ IIDRE LQLG GLNPRMERLA NDFYQMGHSM RPMLDFNVIR RFCGLAIDRR KSIAQKAGRH AHFEAWRDII NIEFSMRSLC QGK |
-分子 #2: mRNA 3'-end-processing protein YTH1
分子 | 名称: mRNA 3'-end-processing protein YTH1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 24.594498 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MSLIHPDTAK YPFKFEPFLR QEYSFSLDPD RPICEFYNSR EGPKSCPRGP LCPKKHVLPI FQNKIVCRHW LRGLCKKNDQ CEYLHEYNL RKMPECVFFS KNGYCTQSPD CQYLHIDPAS KIPKCENYEM GFCPLGSSCP RRHIKKVFCQ RYMTGFCPLG K DECDMEHP ...文字列: MSLIHPDTAK YPFKFEPFLR QEYSFSLDPD RPICEFYNSR EGPKSCPRGP LCPKKHVLPI FQNKIVCRHW LRGLCKKNDQ CEYLHEYNL RKMPECVFFS KNGYCTQSPD CQYLHIDPAS KIPKCENYEM GFCPLGSSCP RRHIKKVFCQ RYMTGFCPLG K DECDMEHP QFIIPDEGSK LRIKRDDEIN TRKMDEEKER RLNAIINGEV |
-分子 #3: Cleavage factor two protein 2
分子 | 名称: Cleavage factor two protein 2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 80.993055 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MTYKYNCCDD GSGTTVGSVV RFDNVTLLID PGWNPSKVSY EQCIKYWEKV IPEIDVIILS QPTIECLGAH SLLYYNFTSH FISRIQVYA TLPVINLGRV STIDSYASAG VIGPYDTNKL DLEDIEISFD HIVPLKYSQL VDLRSRYDGL TLLAYNAGVC P GGSIWCIS ...文字列: MTYKYNCCDD GSGTTVGSVV RFDNVTLLID PGWNPSKVSY EQCIKYWEKV IPEIDVIILS QPTIECLGAH SLLYYNFTSH FISRIQVYA TLPVINLGRV STIDSYASAG VIGPYDTNKL DLEDIEISFD HIVPLKYSQL VDLRSRYDGL TLLAYNAGVC P GGSIWCIS TYSEKLVYAK RWNHTRDNIL NAASILDATG KPLSTLMRPS AIITTLDRFG SSQPFKKRSK IFKDTLKKGL SS DGSVIIP VDMSGKFLDL FTQVHELLFE STKINAHTQV PVLILSYARG RTLTYAKSML EWLSPSLLKT WENRNNTSPF EIG SRIKII APNELSKYPG SKICFVSEVG ALINEVIIKV GNSEKTTLIL TKPSFECASS LDKILEIVEQ DERNWKTFPE DGKS FLCDN YISIDTIKEE PLSKEETEAF KVQLKEKKRD RNKKILLVKR ESKKLANGNA IIDDTNGERA MRNQDILVEN VNGVP PIDH IMGGDEDDDE EEENDNLLNL LKDNSEKSAA KKNTEVPVDI IIQPSAASKH KMFPFNPAKI KKDDYGTVVD FTMFLP DDS DNVNQNSRKR PLKDGAKTTS PVNEEDNKNE EEDGYNMSDP ISKRSKHRAS RYSGFSGTGE AENFDNLDYL KIDKTLS KR TISTVNVQLK CSVVILNLQS LVDQRSASII WPSLKSRKIV LSAPKQIQNE EITAKLIKKN IEVVNMPLNK IVEFSTTI |
-分子 #4: Polyadenylation factor subunit 2
分子 | 名称: Polyadenylation factor subunit 2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 53.211117 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MDGHNQNQYQ NQNQIQQSQQ PPLKKYVTQR RSVDVSSPYI NLYYNRRHGL PNLVVEPETS YTIDIMPPNA YRGRDRVINL PSKFTHLSS NKVKHVIPAI QWTPEGRRLV VATYSGEFSL WNASSFTFET LMQAHDSAVT TMKYSHDSDW MISGDADGMI K IWQPNFSM ...文字列: MDGHNQNQYQ NQNQIQQSQQ PPLKKYVTQR RSVDVSSPYI NLYYNRRHGL PNLVVEPETS YTIDIMPPNA YRGRDRVINL PSKFTHLSS NKVKHVIPAI QWTPEGRRLV VATYSGEFSL WNASSFTFET LMQAHDSAVT TMKYSHDSDW MISGDADGMI K IWQPNFSM VKEIDAAHTE SIRDMAFSSN DSKFVTCSDD NILKIWNFSN GKQERVLSGH HWDVKSCDWH PEMGLIASAS KD NLVKLWD PRSGNCISSI LKFKHTVLKT RFQPTKGNLL MAISKDKSCR VFDIRYSMKE LMCVRDETDY MTLEWHPINE SMF TLACYD GSLKHFDLLQ NLNEPILTIP YAHDKCITSL SYNPVGHIFA TAAKDRTIRF WTRARPIDPN AYDDPTYNNK KING WFFGI NNDINAVREK SEFGAAPPPP ATLEPHALPN MNGFINKKPR QEIPGIDSNI KSSTLPGLSI |
-分子 #6: MPE1 isoform 1
分子 | 名称: MPE1 isoform 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 49.711848 KDa |
組換発現 | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
配列 | 文字列: MSSTIFYRFK SQRNTSRILF DGTGLTVFDL KREIIQENKL GDGTDFQLKI YNPDTEEEYD DDAFVIPRST SVIVKRSPAI KSFSVHSRL KGNVGAAALG NATRYVTGRP RVLQKRQHTA TTTANVSGTT EEERIASMFA TQENQWEQTQ EEMSAATPVF F KSQTNKNS ...文字列: MSSTIFYRFK SQRNTSRILF DGTGLTVFDL KREIIQENKL GDGTDFQLKI YNPDTEEEYD DDAFVIPRST SVIVKRSPAI KSFSVHSRL KGNVGAAALG NATRYVTGRP RVLQKRQHTA TTTANVSGTT EEERIASMFA TQENQWEQTQ EEMSAATPVF F KSQTNKNS AQENEGPPPP GYMCYRCGGR DHWIKNCPTN SDPNFEGKRI RRTTGIPKKF LKSIEIDPET MTPEEMAQRK IM ITDEGKF VVQVEDKQSW EDYQRKRENR QIDGDETIWR KGHFKDLPDD LKCPLTGGLL RQPVKTSKCC NIDFSKEALE NAL VESDFV CPNCETRDIL LDSLVPDQDK EKEVETFLKK QEELHGSSKD GNQPETKKMK LMDPTGTAGL NNNTSLPTSV NNGG TPVPP VPLPFGIPPF PMFPMPFMPP TATITNPHQA DASPKK |
-分子 #5: pre-cleaved CYC1
分子 | 名称: pre-cleaved CYC1 / タイプ: rna / ID: 5 / コピー数: 1 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 13.329796 KDa |
配列 | 文字列: UUUAUAGUUA UGUUAGUAUU AAGAACGUUA UUUAUAUUUC AA |
-分子 #7: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 2 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | ![]() |
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![]() | ![]() |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 20 mM HEPES pH 8, 50 mM NaCl, 0.5 mM TCEP |
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グリッド | モデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277.15 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD![]() |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
試料ステージ | ホルダー冷却材: NITROGEN |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 19524 / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
粒子像選択 | 選択した数: 13905256 |
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CTF補正 | ソフトウェア - 名称: Gctf |
初期モデル | モデルのタイプ: EMDB MAP EMDB ID: |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) |
最終 3次元分類 | ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) |
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) / 使用した粒子像数: 846349 |