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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-12103 | |||||||||
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タイトル | Structure of the mycobacterial ESX-5 Type VII Secretion System hexameric pore complex | |||||||||
マップデータ | local refined map of a protomer | |||||||||
試料 |
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キーワード | Mycobacterial ESX-5 Type VII Secretion System / TRANSPORT PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 hydrolase activity / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / membrane / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Mycobacterium xenopi RIVM700367 (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Chojnowski G / Ritter C | |||||||||
引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2021 タイトル: Structure of the mycobacterial ESX-5 type VII secretion system pore complex. 著者: Katherine S H Beckham / Christina Ritter / Grzegorz Chojnowski / Daniel S Ziemianowicz / Edukondalu Mullapudi / Mandy Rettel / Mikhail M Savitski / Simon A Mortensen / Jan Kosinski / Matthias Wilmanns / 要旨: The ESX-5 type VII secretion system is a membrane-spanning protein complex key to the virulence of mycobacterial pathogens. However, the overall architecture of the fully assembled translocation ...The ESX-5 type VII secretion system is a membrane-spanning protein complex key to the virulence of mycobacterial pathogens. However, the overall architecture of the fully assembled translocation machinery and the composition of the central secretion pore have remained unknown. Here, we present the high-resolution structure of the 2.1-megadalton ESX-5 core complex. Our structure captured a dynamic, secretion-competent conformation of the pore within a well-defined transmembrane section, sandwiched between two flexible protein layers at the cytosolic entrance and the periplasmic exit. We propose that this flexibility endows the ESX-5 machinery with large conformational plasticity required to accommodate targeted protein secretion. Compared to known secretion systems, a highly dynamic state of the pore may represent a fundamental principle of bacterial secretion machineries. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_12103.map.gz | 175.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-12103-v30.xml emd-12103.xml | 18.6 KB 18.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_12103.png | 156.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-12103.cif.gz | 7.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12103 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-12103 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_12103_validation.pdf.gz | 482.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_12103_full_validation.pdf.gz | 482.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_12103_validation.xml.gz | 7.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_12103_validation.cif.gz | 8.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12103 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-12103 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_12103.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 347.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | local refined map of a protomer | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.29 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Protomeric unit of the hexameric ESX-5 complex from Mycobacterium...
全体 | 名称: Protomeric unit of the hexameric ESX-5 complex from Mycobacterium xenopi: EccB5, EccC5, EccD5-1, EccD5-2, EccE |
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要素 |
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-超分子 #1: Protomeric unit of the hexameric ESX-5 complex from Mycobacterium...
超分子 | 名称: Protomeric unit of the hexameric ESX-5 complex from Mycobacterium xenopi: EccB5, EccC5, EccD5-1, EccD5-2, EccE タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium xenopi RIVM700367 (バクテリア) 細胞中の位置: membrane |
分子量 | 理論値: 357 KDa |
-分子 #1: EccE5
分子 | 名称: EccE5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium xenopi RIVM700367 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 44.469617 KDa |
組換発現 | 生物種: Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) |
配列 | 文字列: MRAQRRFGLD LSWPRLTGVF LIDVAVLALV SHLPDAWQAN HIAWWTGVGV AVLVTIVAVV TYRRTPLACA LVARVLDRFV DPEMTLTEG CTPALDHQRR FGHDVVGIRE YQGQLVAVVT VEGHEEAPSG RHRNRDAAPA WLPVEAVAAR LRQFDVRLDA I DIVSVGTR ...文字列: MRAQRRFGLD LSWPRLTGVF LIDVAVLALV SHLPDAWQAN HIAWWTGVGV AVLVTIVAVV TYRRTPLACA LVARVLDRFV DPEMTLTEG CTPALDHQRR FGHDVVGIRE YQGQLVAVVT VEGHEEAPSG RHRNRDAAPA WLPVEAVAAR LRQFDVRLDA I DIVSVGTR RTSGRDDVSD VGVDDTGPVD ARQPLDEHHT WLVLRMDPQR NVAAVAARDS VAATLAAATE RLAHDLNGRR WT ARPLTSS EIDDMDATVL AGLQPAHVRP RRRRLKYKQP EGYKEFVTSF WVSPRDITSE TLERLWLPDT EATAVTVRLR PRH GGVEVS AWVRYHSSRR LRRSVWGGLN RLTGRQLDAV CASMPVPTRR PRLVVPAREL HDGEELAVLV GQAPAPSPSP AAAR UniProtKB: Type VII secretion protein EccE |
-分子 #2: EccD5
分子 | 名称: EccD5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium xenopi RIVM700367 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 53.399191 KDa |
組換発現 | 生物種: Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) |
配列 | 文字列: MTAIVEAPQP GAEAIASPQA AVVAIMAADV QIAVVLDAHA PISVMIDPLL KVVNTRLREL GVAPLEAKGR GRWMLCLVDG TPLRPNLSL TEQEVYDGDR LWLKFLEDTE HRSEVIEHIS TAVATNLSKR FAPIDPVVAV QVGATMVAVG VLLGSALLGW W RWQHESWL ...文字列: MTAIVEAPQP GAEAIASPQA AVVAIMAADV QIAVVLDAHA PISVMIDPLL KVVNTRLREL GVAPLEAKGR GRWMLCLVDG TPLRPNLSL TEQEVYDGDR LWLKFLEDTE HRSEVIEHIS TAVATNLSKR FAPIDPVVAV QVGATMVAVG VLLGSALLGW W RWQHESWL PAPFAAVIAV LVLTVATMIL ARSKTVPDRR VGDILLLSGL VPLAVAIAAT APGPVGAPHA VLGFGVFGVA AM LVMRFTG RRLGVYTALV TLCAAATAAG LARMVLLTSA VTLLTCVLLA CVLMYHGAPA LSRWLSGIRL PVFPSATSRW VFE ARPDLP TTVVVSGGGQ PTLEGPASVR DVLLRAERAR SFLTGLLVGL GVLTVVCLAG LCDPHAGRRW LPLLLAAFTF GFLI LRGRS YVDRWQAITL AATAVLIIAA VAVRYVLVSG SPAVLSAGVA VLVLLPAAGL TAAAVVPNTI YSPLFRKIVE WIEYL CLMP IFPLALWLMN VYEAIRYR UniProtKB: Secretion protein Snm4 |
-分子 #3: EccC5
分子 | 名称: EccC5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium xenopi RIVM700367 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 152.946062 KDa |
組換発現 | 生物種: Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) |
配列 | 文字列: MKQGFARPTP ERAPVVKPEN IVLPTPLSVP PPEGKPWWLV VVGVLVVGLL VGMVGMTVAS GSRLFLGAGA IFPIFMIGGV AMMMFGGRF GGQQQMSRPK LDAMRAQFML MLDMLRETAQ ESADSMDANY RWFHPAPTTL AAAVGSSRMW ERQPDGKDLN F GVVRVGVG ...文字列: MKQGFARPTP ERAPVVKPEN IVLPTPLSVP PPEGKPWWLV VVGVLVVGLL VGMVGMTVAS GSRLFLGAGA IFPIFMIGGV AMMMFGGRF GGQQQMSRPK LDAMRAQFML MLDMLRETAQ ESADSMDANY RWFHPAPTTL AAAVGSSRMW ERQPDGKDLN F GVVRVGVG MTRPEVTWGE PQNMPTDIEL EPVTGKALQE FGRYQSVVYN LPKMVSLLVE PWYSLVGERE QVLGLTRAII CQ LAFSHGP DHVQMIVVTS DPDRWDWVKW IPHFGDPRRR DAAGNARMVY TSVREFATEQ AELFAGRGSF TPRHASSSAE TPT PHHVII SDIEDPQWEY VISSEGVDGV TFFDLTGSPL WTGAPQRVLR FTDSAGVIET LPRDRDTWMV IDDNAWFFAL ADQM SEADA EQFAHQMAHW RLAEAYEEIG QRVVQLGARD ILSYYGIDDA GEIDFNTLWS GSGRRDLLSR SRLRIPFGNR ADNGE LLFL DMKSLDEGGD GPHGVMSGTT GSGKSSLVRT VIASLMLAHP PEELQFVLAD LKGGSAVKPF DGVPHVSRII TDLEDD QAL MERFLEAMWG EIARRKEICF SAGVDGAKEY NELRARMKAR GEDMPPLPML VVVIDEFYEW FRIMPTAVDV LDSIGRQ GR AYWVHLMMAS QTIESRAEKL MENMGYRLVL KAQTAGAAQA AGVPNAVNLP SQAGLGYFRK SGDEIIRFQA EYLWRDYR R GSSYDGEEQA PLTHSVDYIR PQLFTTAFAP LEVSVSGPDG QSALPQVVDG EAVNGHRGGD DVDEEEEALR TPKVGTVII DQLRQIDFEP YRLWHPPLDV PVPIDELVNR FLGRPWQQDY GTAKNLVFPI GIIDRPYKHD QPPWTVDTSG AGANVLILGA GGAGKTTAL QTLICAAALT HTPEQVQFYC LAYSGTALTT VANLPHVGGV SGPTDPYGVR RTVAEVLGLV RDRKRSFLEY D VPSMEVFR RRKFGGEPGG VPDDGFGDVY LVIDNYRALA EENEVLIEQV NQIINQGPSF GVHVVATADR ESELRPPVRS GF GSRVELR LAAVEDAKLV RSRFAKDVPP KPGRGMVAVN YVRLDSDPQA GLHTLVARPA LGSTPDAVFE SDSVAAAVRQ VAA GEARPV RRLPARFGLD QLRQVAAADR RQGVGAGGIA WAISELDLQP VYLNFADNAH LMVTGRRECG RTTTLATIMS EIGR IYAPG ASTAPPTSRP SAQVWLVDPR RQLLTVLGSD YVEKFAYNLD GVAAMMDDLA AALARREPPP GLSAEELLSR SWWSG PEIF LIIDDIQQLP PGFDSPLHKA APWVTRAADV GLHVFVTRTF GGWSSAGSDP ILRALHQANA PLLVMDADPD EGFIRG KMK GGPLPRGRGL LMAEDTGVFV QVAATDLRR UniProtKB: FtsK domain-containing protein |
-分子 #4: EccB5
分子 | 名称: EccB5 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Mycobacterium xenopi RIVM700367 (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 53.226367 KDa |
組換発現 | 生物種: Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) |
配列 | 文字列: MPSEQRGQHR SGYGLGLSTR TQVTGYQFLA RRTAMALTRW RVRMEVEPGR RQVLAVVASV SAAGVICLGA LLWSFISPSG QMGESPIIA DRDSGALYVR VGDTLYPALN LASARLIAGR AENPHKVRSS QIAEQPHGPM VGIPGAPSDI SPTSPASSSW L VCDAVTAA ...文字列: MPSEQRGQHR SGYGLGLSTR TQVTGYQFLA RRTAMALTRW RVRMEVEPGR RQVLAVVASV SAAGVICLGA LLWSFISPSG QMGESPIIA DRDSGALYVR VGDTLYPALN LASARLIAGR AENPHKVRSS QIAEQPHGPM VGIPGAPSDI SPTSPASSSW L VCDAVTAA QGVGAPASVT VTVIDGTPDL SGRRHVLSGS DAVVLRYGND TWVIRQGRRS RIDAANRAVL LPLGLTPEQV KQ ASPMSRA LYDALPVGPE LAVPKVPDAG KPANFPGAPA PVGAVLVTPQ ISGPQQYSVV LPDGVQTISP IVAQILQNAG TPA GSMPVV VAPATLARMP VVHGLDLSAY PDSPLNVVNM KENPATCWWW EKTAGEERAR TQVVSGPTVP IATSDTNKVV SLVK ADNTG READRVYYGP NYANFVVVTG NDPAASTAES LWLLSKSGVR FGVDNSREAR TALGLTSTPS PAPWVALRLL APGPM LSRA DALVRHDTLP TDTNPAELAV PK UniProtKB: Type VII secretion protein EccB |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 / 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 支持フィルム - Film thickness: 0.2 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | ||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 283 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 実像数: 27873 / 平均電子線量: 49.34 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 1.7 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C6 (6回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.14) / 使用した粒子像数: 731844 |
初期 角度割当 | タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.14) |
最終 角度割当 | タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 2.14) |