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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-10930 | |||||||||
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タイトル | Cohesin complex with loader gripping DNA | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | Chromosome segregation Sister chromatid cohesion SMC complexes Cohesin ABC-ATPase Mis4-Scc2-NIPBL / DNA BINDING PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 Cohesin Loading onto Chromatin / Resolution of Sister Chromatid Cohesion / SUMOylation of DNA damage response and repair proteins / cohesin loader activity / SMC loading complex / mitotic telomere tethering at nuclear periphery / Scc2-Scc4 cohesin loading complex / : / heterochromatin island / meiotic cohesin complex ...Cohesin Loading onto Chromatin / Resolution of Sister Chromatid Cohesion / SUMOylation of DNA damage response and repair proteins / cohesin loader activity / SMC loading complex / mitotic telomere tethering at nuclear periphery / Scc2-Scc4 cohesin loading complex / : / heterochromatin island / meiotic cohesin complex / cohesin complex / mitotic cohesin complex / chromosome, subtelomeric region / establishment of protein localization to chromatin / rDNA heterochromatin / replication-born double-strand break repair via sister chromatid exchange / condensed chromosome, centromeric region / establishment of mitotic sister chromatid cohesion / chromatin looping / sister chromatid cohesion / mitotic sister chromatid cohesion / nuclear chromosome / mitotic sister chromatid segregation / ATPase activator activity / pericentric heterochromatin / double-strand break repair / single-stranded DNA binding / chromosome / regulation of gene expression / double-stranded DNA binding / cell division / DNA damage response / chromatin binding / chromatin / ATP hydrolysis activity / DNA binding / ATP binding / nucleus / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) (分裂酵母) / Synthetic construct (人工物) / synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.94 Å | |||||||||
データ登録者 | Higashi TL / Eickhoff P | |||||||||
資金援助 | 2件
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引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2020 タイトル: A Structure-Based Mechanism for DNA Entry into the Cohesin Ring. 著者: Torahiko L Higashi / Patrik Eickhoff / Joana S Sousa / Julia Locke / Andrea Nans / Helen R Flynn / Ambrosius P Snijders / George Papageorgiou / Nicola O'Reilly / Zhuo A Chen / Francis J ...著者: Torahiko L Higashi / Patrik Eickhoff / Joana S Sousa / Julia Locke / Andrea Nans / Helen R Flynn / Ambrosius P Snijders / George Papageorgiou / Nicola O'Reilly / Zhuo A Chen / Francis J O'Reilly / Juri Rappsilber / Alessandro Costa / Frank Uhlmann / 要旨: Despite key roles in sister chromatid cohesion and chromosome organization, the mechanism by which cohesin rings are loaded onto DNA is still unknown. Here we combine biochemical approaches and ...Despite key roles in sister chromatid cohesion and chromosome organization, the mechanism by which cohesin rings are loaded onto DNA is still unknown. Here we combine biochemical approaches and cryoelectron microscopy (cryo-EM) to visualize a cohesin loading intermediate in which DNA is locked between two gates that lead into the cohesin ring. Building on this structural framework, we design experiments to establish the order of events during cohesin loading. In an initial step, DNA traverses an N-terminal kleisin gate that is first opened upon ATP binding and then closed as the cohesin loader locks the DNA against the ATPase gate. ATP hydrolysis will lead to ATPase gate opening to complete DNA entry. Whether DNA loading is successful or results in loop extrusion might be dictated by a conserved kleisin N-terminal tail that guides the DNA through the kleisin gate. Our results establish the molecular basis for cohesin loading onto DNA. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_10930.map.gz | 167.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-10930-v30.xml emd-10930.xml | 28.2 KB 28.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_10930.png | 174.6 KB | ||
Filedesc metadata | emd-10930.cif.gz | 9.2 KB | ||
その他 | emd_10930_additional.map.gz emd_10930_half_map_1.map.gz emd_10930_half_map_2.map.gz | 11.5 MB 165 MB 165 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10930 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10930 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_10930_validation.pdf.gz | 938.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_10930_full_validation.pdf.gz | 938.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_10930_validation.xml.gz | 14.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_10930_validation.cif.gz | 17.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10930 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10930 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_10930.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.09 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: density modified map produced with Phenix resolve cryo-EM tool
ファイル | emd_10930_additional.map | ||||||||||||
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注釈 | density modified map produced with Phenix resolve cryo-EM tool | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_10930_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_10930_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Cohesin complex with loader gripping DNA
+超分子 #1: Cohesin complex with loader gripping DNA
+超分子 #2: Cohesin subunit rad21, Structural maintenance of chromosomes prot...
+超分子 #3: DNA (32-MER)
+超分子 #4: Sister chromatid cohesion protein mis4
+分子 #1: Cohesin subunit rad21
+分子 #2: Sister chromatid cohesion protein mis4
+分子 #3: Structural maintenance of chromosomes protein 1
+分子 #4: Structural maintenance of chromosomes protein 3
+分子 #5: DNA (32-MER)
+分子 #6: DNA (32-MER)
+分子 #7: BERYLLIUM TRIFLUORIDE ION
+分子 #8: ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 33.8 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |