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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-7147 | |||||||||
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タイトル | Apoferritin on a holey carbon nanowire grid plunged with Spotiton | |||||||||
マップデータ | Tomogram of apoferritin single particle | |||||||||
試料 |
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生物種 | unidentified (未定義) | |||||||||
手法 | 電子線トモグラフィー法 / クライオ電子顕微鏡法 | |||||||||
データ登録者 | Noble AN / Dandey VP / Wei H / Brasch J / Chase J / Acharya P / Tan Y / Zhang Z / Kim LY / Scapin G ...Noble AN / Dandey VP / Wei H / Brasch J / Chase J / Acharya P / Tan Y / Zhang Z / Kim LY / Scapin G / Rapp M / Eng ET / Rice WJ / Cheng A / Negro CJ / Shapiro L / Kwong PD / Jeruzalmi D / des Georges A / Potter CS / Carragher B | |||||||||
引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2018 タイトル: Routine single particle CryoEM sample and grid characterization by tomography. 著者: Alex J Noble / Venkata P Dandey / Hui Wei / Julia Brasch / Jillian Chase / Priyamvada Acharya / Yong Zi Tan / Zhening Zhang / Laura Y Kim / Giovanna Scapin / Micah Rapp / Edward T Eng / ...著者: Alex J Noble / Venkata P Dandey / Hui Wei / Julia Brasch / Jillian Chase / Priyamvada Acharya / Yong Zi Tan / Zhening Zhang / Laura Y Kim / Giovanna Scapin / Micah Rapp / Edward T Eng / William J Rice / Anchi Cheng / Carl J Negro / Lawrence Shapiro / Peter D Kwong / David Jeruzalmi / Amedee des Georges / Clinton S Potter / Bridget Carragher / 要旨: Single particle cryo-electron microscopy (cryoEM) is often performed under the assumption that particles are not adsorbed to the air-water interfaces and in thin, vitreous ice. In this study, we ...Single particle cryo-electron microscopy (cryoEM) is often performed under the assumption that particles are not adsorbed to the air-water interfaces and in thin, vitreous ice. In this study, we performed fiducial-less tomography on over 50 different cryoEM grid/sample preparations to determine the particle distribution within the ice and the overall geometry of the ice in grid holes. Surprisingly, by studying particles in holes in 3D from over 1000 tomograms, we have determined that the vast majority of particles (approximately 90%) are adsorbed to an air-water interface. The implications of this observation are wide-ranging, with potential ramifications regarding protein denaturation, conformational change, and preferred orientation. We also show that fiducial-less cryo-electron tomography on single particle grids may be used to determine ice thickness, optimal single particle collection areas and strategies, particle heterogeneity, and de novo models for template picking and single particle alignment. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_7147.map.gz | 1.2 GB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-7147-v30.xml emd-7147.xml | 8.4 KB 8.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_7147.png | 272.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7147 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-7147 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_7147_validation.pdf.gz | 78.6 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_7147_full_validation.pdf.gz | 77.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_7147_validation.xml.gz | 499 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7147 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-7147 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7135C 7138C 7139C 7140C 7141C 7142C 7143C 7144C 7145C 7146C 7148C 7149C 7150C 7151C 7152C 7153C 7154C C: 同じ文献を引用 (文献) |
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電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10138 (タイトル: CryoET of apoferritin single particle / Data size: 301.1 Data #1: Whole-frame aligned tilt images along with all other magnification images from the collection [micrographs - single frame] Data #2: Appion-Protomo tilt-series alignments [tilt series]) |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_7147.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1.4 GB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Tomogram of apoferritin single particle | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Apoferritin
全体 | 名称: Apoferritin |
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要素 |
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-超分子 #1: Apoferritin
超分子 | 名称: Apoferritin / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 詳細: Tomography on single particle sample |
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由来(天然) | 生物種: unidentified (未定義) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 電子線トモグラフィー法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
凍結 | 凍結剤: ETHANE / 詳細: Spotiton. |
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切片作成 | その他: NO SECTIONING |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / 平均電子線量: 2.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
詳細 | Appion-Protomo fiducial-less tilt-series alignment |
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最終 再構成 | アルゴリズム: SIMULTANEOUS ITERATIVE (SIRT) / ソフトウェア - 名称: TOMO3D / 使用した粒子像数: 30 |