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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-10707 | |||||||||
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タイトル | Anabaena sp. PCC 7120 Septal Junction Average from Manually Milled Lamellae | |||||||||
マップデータ | Septal junction average generated from 343 particles and 5-fold symmetrizing. Lamellae were generated in using a manual FIB milling approach. | |||||||||
試料 |
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生物種 | Nostoc sp. PCC 7120 (バクテリア) | |||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 30.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Zachs T / Pilhofer M | |||||||||
資金援助 | スイス, European Union, 2件
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引用 | ジャーナル: Elife / 年: 2020 タイトル: Fully automated, sequential focused ion beam milling for cryo-electron tomography. 著者: Tobias Zachs / Andreas Schertel / João Medeiros / Gregor L Weiss / Jannik Hugener / Joao Matos / Martin Pilhofer / 要旨: Cryo-electron tomography (cryoET) has become a powerful technique at the interface of structural biology and cell biology, due to its unique ability for imaging cells in their native state and ...Cryo-electron tomography (cryoET) has become a powerful technique at the interface of structural biology and cell biology, due to its unique ability for imaging cells in their native state and determining structures of macromolecular complexes in their cellular context. A limitation of cryoET is its restriction to relatively thin samples. Sample thinning by cryo-focused ion beam (cryoFIB) milling has significantly expanded the range of samples that can be analyzed by cryoET. Unfortunately, cryoFIB milling is low-throughput, time-consuming and manual. Here, we report a method for fully automated sequential cryoFIB preparation of high-quality lamellae, including rough milling and polishing. We reproducibly applied this method to eukaryotic and bacterial model organisms, and show that the resulting lamellae are suitable for cryoET imaging and subtomogram averaging. Since our method reduces the time required for lamella preparation and minimizes the need for user input, we envision the technique will render previously inaccessible projects feasible. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_10707.map.gz | 273 KB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-10707-v30.xml emd-10707.xml | 7.7 KB 7.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_10707.png | 61.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10707 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10707 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_10707_validation.pdf.gz | 225 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_10707_full_validation.pdf.gz | 224.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_10707_validation.xml.gz | 5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10707 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10707 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | |
電子顕微鏡画像生データ | EMPIAR-10376 (タイトル: Yeast Tilt Series Collected on Lamella Generated by Fully Automated FIB Milling Data size: 2.6 Data #1: Yeast Tilt Series Collected on Lamella Generated by Fully Automated FIB Milling [tilt series]) |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_10707.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 333 KB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Septal junction average generated from 343 particles and 5-fold symmetrizing. Lamellae were generated in using a manual FIB milling approach. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 6.757 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Septal Junction
全体 | 名称: Septal Junction |
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要素 |
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-超分子 #1: Septal Junction
超分子 | 名称: Septal Junction / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: Nostoc sp. PCC 7120 (バクテリア) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | cell |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 2.3 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C5 (5回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 30.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / 使用したサブトモグラム数: 343 |
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抽出 | トモグラム数: 9 / 使用した粒子像数: 343 |
最終 角度割当 | タイプ: OTHER |