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基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-0151 | |||||||||
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タイトル | Rhesus macaque mitochondrial complex I | |||||||||
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生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.1 Å | |||||||||
![]() | Agip ANA / Blaza JN / Fedor JG / Hirst J | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Mammalian Respiratory Complex I Through the Lens of Cryo-EM. 著者: Ahmed-Noor A Agip / James N Blaza / Justin G Fedor / Judy Hirst / ![]() 要旨: Single-particle electron cryomicroscopy (cryo-EM) has led to a revolution in structural work on mammalian respiratory complex I. Complex I (mitochondrial NADH:ubiquinone oxidoreductase), a membrane- ...Single-particle electron cryomicroscopy (cryo-EM) has led to a revolution in structural work on mammalian respiratory complex I. Complex I (mitochondrial NADH:ubiquinone oxidoreductase), a membrane-bound redox-driven proton pump, is one of the largest and most complicated enzymes in the mammalian cell. Rapid progress, following the first 5-Å resolution data on bovine complex I in 2014, has led to a model for mouse complex I at 3.3-Å resolution that contains 96% of the 8,518 residues and to the identification of different particle classes, some of which are assigned to biochemically defined states. Factors that helped improve resolution, including improvements to biochemistry, cryo-EM grid preparation, data collection strategy, and image processing, are discussed. Together with recent structural data from an ancient relative, membrane-bound hydrogenase, cryo-EM on mammalian complex I has provided new insights into the proton-pumping machinery and a foundation for understanding the enzyme's catalytic mechanism. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
ムービー |
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構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 167 MB | ![]() | |
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ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 15.9 KB 15.9 KB | 表示 表示 | ![]() |
FSC (解像度算出) | ![]() | 12.8 KB | 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 39.3 KB | ||
マスクデータ | ![]() | 178 MB | ![]() | |
その他 | ![]() ![]() | 140.7 MB 141 MB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
類似構造データ |
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リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
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マップ
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ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.39 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | ![]() | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_0151_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_0151_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
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試料の構成要素
-全体 : Rhesus macaque mitochondrial complex I
全体 | 名称: Rhesus macaque mitochondrial complex I |
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要素 |
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-超分子 #1: Rhesus macaque mitochondrial complex I
超分子 | 名称: Rhesus macaque mitochondrial complex I / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
分子量 | 理論値: 1 MDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
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試料調製
濃度 | 3 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.14 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil, UltrAuFoil / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE 詳細: UltrAuFoil gold grids (0.6/1) was used for the preparation of macaque complex I grids. In brief, UltrAuFoil gold grids (0.6/1) were glow discharged at 20 mA for 60 sec using a EMITECH glow- ...詳細: UltrAuFoil gold grids (0.6/1) was used for the preparation of macaque complex I grids. In brief, UltrAuFoil gold grids (0.6/1) were glow discharged at 20 mA for 60 sec using a EMITECH glow-discharger unit. Then, the grids were incubated in 5 mM 11-mercaptoundecyl hexaethyleneglycol (SPT-0011P6, SensoPath Technologies) in ethanol for two days under anaerobic conditions. | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: 8-16s blotting.. | ||||||||||||
詳細 | The sample was collected from the peak fraction of a size-exclusion column and was not concentrated. |
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電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 検出モード: INTEGRATING / 平均露光時間: 2.0 sec. / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 倍率(公称値): 59000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |