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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-9852 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of a Q-engaged arrested complex | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | RNA polymerase / Antitermination / TRANSCRIPTION / DNA / RNA | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 negative regulation of termination of DNA-templated transcription / sigma factor antagonist complex / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly ...negative regulation of termination of DNA-templated transcription / sigma factor antagonist complex / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / nitrate assimilation / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA-templated transcription initiation / transcription antitermination / cell motility / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat / protein-containing complex assembly / intracellular iron ion homeostasis / protein dimerization activity / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) / Enterobacteria phage SfI (ファージ) / Enterobacteria phage P21 (ファージ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.08 Å | |||||||||
データ登録者 | Feng Y / Shi J | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2019 タイトル: Structural basis of Q-dependent transcription antitermination. 著者: Jing Shi / Xiang Gao / Tongguan Tian / Zhaoyang Yu / Bo Gao / Aijia Wen / Linlin You / Shenghai Chang / Xing Zhang / Yu Zhang / Yu Feng / 要旨: Bacteriophage Q protein engages σ-dependent paused RNA polymerase (RNAP) by binding to a DNA site embedded in late gene promoter and renders RNAP resistant to termination signals. Here, we report a ...Bacteriophage Q protein engages σ-dependent paused RNA polymerase (RNAP) by binding to a DNA site embedded in late gene promoter and renders RNAP resistant to termination signals. Here, we report a single-particle cryo-electron microscopy (cryo-EM) structure of an intact Q-engaged arrested complex. The structure reveals key interactions responsible for σ-dependent pause, Q engagement, and Q-mediated transcription antitermination. The structure shows that two Q protomers (Q and Q) bind to a direct-repeat DNA site and contact distinct elements of the RNA exit channel. Notably, Q forms a narrow ring inside the RNA exit channel and renders RNAP resistant to termination signals by prohibiting RNA hairpin formation in the RNA exit channel. Because the RNA exit channel is conserved among all multisubunit RNAPs, it is likely to serve as an important contact site for regulators that modify the elongation properties of RNAP in other organisms, as well. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_9852.map.gz | 28.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-9852-v30.xml emd-9852.xml | 21.7 KB 21.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_9852.png | 65.4 KB | ||
Filedesc metadata | emd-9852.cif.gz | 8.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-9852 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-9852 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_9852_validation.pdf.gz | 597.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_9852_full_validation.pdf.gz | 597.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_9852_validation.xml.gz | 5.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_9852_validation.cif.gz | 6.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-9852 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-9852 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_9852.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.307 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : 21Q-engaged arrested complex
+超分子 #1: 21Q-engaged arrested complex
+分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
+分子 #5: RNA polymerase sigma factor RpoD
+分子 #9: Antiterminator Q protein
+分子 #6: DNA (63-MER)
+分子 #8: DNA (63-MER)
+分子 #7: RNA (5'-R(P*AP*UP*AP*AP*GP*GP*UP*GP*GP*GP*GP*UP*UP*AP*GP*UP*GP*A)-3')
+分子 #10: MAGNESIUM ION
+分子 #11: ZINC ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 8 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 8 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 283 K |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 平均電子線量: 56.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: EMDB MAP |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.08 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 64497 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |