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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8573 | |||||||||
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タイトル | HIV-1 CH505 Transmitted Founder SOSIP.664 Env trimer in Complex with the DH576 Fab from the RV305 Trial | |||||||||
マップデータ | Negative Stain EM Reconstruction of the DH576 Fab in complex with the HIV CH505 SOSIP.664 trimer | |||||||||
試料 |
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生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 28.1 Å | |||||||||
データ登録者 | Fera D / Harrison SC | |||||||||
引用 | ジャーナル: PLoS Pathog / 年: 2017 タイトル: Boosting of HIV envelope CD4 binding site antibodies with long variable heavy third complementarity determining region in the randomized double blind RV305 HIV-1 vaccine trial. 著者: David Easterhoff / M Anthony Moody / Daniela Fera / Hao Cheng / Margaret Ackerman / Kevin Wiehe / Kevin O Saunders / Justin Pollara / Nathan Vandergrift / Rob Parks / Jerome Kim / Nelson L ...著者: David Easterhoff / M Anthony Moody / Daniela Fera / Hao Cheng / Margaret Ackerman / Kevin Wiehe / Kevin O Saunders / Justin Pollara / Nathan Vandergrift / Rob Parks / Jerome Kim / Nelson L Michael / Robert J O'Connell / Jean-Louis Excler / Merlin L Robb / Sandhya Vasan / Supachai Rerks-Ngarm / Jaranit Kaewkungwal / Punnee Pitisuttithum / Sorachai Nitayaphan / Faruk Sinangil / James Tartaglia / Sanjay Phogat / Thomas B Kepler / S Munir Alam / Hua-Xin Liao / Guido Ferrari / Michael S Seaman / David C Montefiori / Georgia D Tomaras / Stephen C Harrison / Barton F Haynes / 要旨: The canary pox vector and gp120 vaccine (ALVAC-HIV and AIDSVAX B/E gp120) in the RV144 HIV-1 vaccine trial conferred an estimated 31% vaccine efficacy. Although the vaccine Env AE.A244 gp120 is ...The canary pox vector and gp120 vaccine (ALVAC-HIV and AIDSVAX B/E gp120) in the RV144 HIV-1 vaccine trial conferred an estimated 31% vaccine efficacy. Although the vaccine Env AE.A244 gp120 is antigenic for the unmutated common ancestor of V1V2 broadly neutralizing antibody (bnAbs), no plasma bnAb activity was induced. The RV305 (NCT01435135) HIV-1 clinical trial was a placebo-controlled randomized double-blinded study that assessed the safety and efficacy of vaccine boosting on B cell repertoires. HIV-1-uninfected RV144 vaccine recipients were reimmunized 6-8 years later with AIDSVAX B/E gp120 alone, ALVAC-HIV alone, or a combination of ALVAC-HIV and AIDSVAX B/E gp120 in the RV305 trial. Env-specific post-RV144 and RV305 boost memory B cell VH mutation frequencies increased from 2.9% post-RV144 to 6.7% post-RV305. The vaccine was well tolerated with no adverse events reports. While post-boost plasma did not have bnAb activity, the vaccine boosts expanded a pool of envelope CD4 binding site (bs)-reactive memory B cells with long third heavy chain complementarity determining regions (HCDR3) whose germline precursors and affinity matured B cell clonal lineage members neutralized the HIV-1 CRF01 AE tier 2 (difficult to neutralize) primary isolate, CNE8. Electron microscopy of two of these antibodies bound with near-native gp140 trimers showed that they recognized an open conformation of the Env trimer. Although late boosting of RV144 vaccinees expanded a novel pool of neutralizing B cell clonal lineages, we hypothesize that boosts with stably closed trimers would be necessary to elicit antibodies with greater breadth of tier 2 HIV-1 strains. TRIAL REGISTRATION: ClinicalTrials.gov NCT01435135. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_8573.map.gz | 2.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-8573-v30.xml emd-8573.xml | 16 KB 16 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_8573.png | 35.3 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8573 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8573 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_8573_validation.pdf.gz | 78.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_8573_full_validation.pdf.gz | 77.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_8573_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8573 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8573 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8573.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 18.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Negative Stain EM Reconstruction of the DH576 Fab in complex with the HIV CH505 SOSIP.664 trimer | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.13 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : HIV-1 CH505 Transmitted Founder SOSIP.664 Env trimer in Complex w...
全体 | 名称: HIV-1 CH505 Transmitted Founder SOSIP.664 Env trimer in Complex with the DH576 Fab from the RV305 Trial |
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要素 |
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-超分子 #1: HIV-1 CH505 Transmitted Founder SOSIP.664 Env trimer in Complex w...
超分子 | 名称: HIV-1 CH505 Transmitted Founder SOSIP.664 Env trimer in Complex with the DH576 Fab from the RV305 Trial タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: HEK 293T |
分子量 | 理論値: 50 KDa |
-超分子 #2: CH505 Transmitted Founder Envelope
超分子 | 名称: CH505 Transmitted Founder Envelope / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #2 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: HEK 293T |
-超分子 #3: DH576 Fab
超分子 | 名称: DH576 Fab / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3 / 詳細: fab fragment |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: HEK 293T |
-分子 #1: HIV Envelope
分子 | 名称: HIV Envelope / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: VENLWVTVYY GVPVWKEAKT TLFCASDAKA YEKEVHNVWA THACVPTDPS PQELVLENVT ENFNMWKNDM VDQMHEDIIS LWDQSLKPCV KLTPLCVTLN CSNATVDSSK VYDTRSNVNV TSINNTIMGE MKNCSFNTTT EIRDKEKKEY ALFYRPDVVP LDETSNTSEY ...文字列: VENLWVTVYY GVPVWKEAKT TLFCASDAKA YEKEVHNVWA THACVPTDPS PQELVLENVT ENFNMWKNDM VDQMHEDIIS LWDQSLKPCV KLTPLCVTLN CSNATVDSSK VYDTRSNVNV TSINNTIMGE MKNCSFNTTT EIRDKEKKEY ALFYRPDVVP LDETSNTSEY RLINCNTSAV TQACPKVTFE PIPIHYCAPA GYAILKCNNK TFNGTGPCSN VSTVQCTHGI RPVVSTQLLL NGSLAEKEIV IRSENLTNNA KIIIVHLNTS VEIVCTRPGN NTRKSVRIGP GQTFYATGDI IGDIRQAHCN ISERQWNKTL QEVGKELQKH FPNKTIKYER SAGGDMEIAT HSFNCGGEFF YCNTSNLFNG TYNGTYISTN STSNITLQCR IKQIINMWQG VGRAMYAPPI AGNITCKSNI TGLLLTRDGG TKNNSNETEE TFRPAGGDMR DNWRSELYKY KVVEIQPLGI APTGCKRRVV GRRRRRRAAG LGALFLGFLG AAGSTMGAAS ITLTVQARQL LSGIVQQQSN LLRAPEAQQH MLQLTVWGIK QLQARVLALE RYLKDQQLLG MWGCSGKLIC CTAVPWNTSW SNKSEKDIWD NMTWMQWERE ISNYTETIYM LLEDSQHQQE RNEKDLLALD |
-分子 #2: DH576 Fab Light Chain
分子 | 名称: DH576 Fab Light Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCQASQDID NYLNWYQQKP GKAPKLLIYD ASNLETGVPS RFSGSGSGT SFTLTISSLQ PEDIGTYYCQ KYGSVPFPFG QGTKLEIKRT VAAPSVFIFP PSDEQLKSGT ASVVCLLNNF YPREAKVQWK VDNALQSGNS QESVTEQDSK ...文字列: DIQMTQSPSS LSASVGDRVT ITCQASQDID NYLNWYQQKP GKAPKLLIYD ASNLETGVPS RFSGSGSGT SFTLTISSLQ PEDIGTYYCQ KYGSVPFPFG QGTKLEIKRT VAAPSVFIFP PSDEQLKSGT ASVVCLLNNF YPREAKVQWK VDNALQSGNS QESVTEQDSK DSTYSLSSTL TLSKADYEKH KVYACEVTHQ GLSSPVTKSF NRGEC |
-分子 #3: DH576 Fab Heavy Chain
分子 | 名称: DH576 Fab Heavy Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: EVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCGVSGFTFS NYAIHWVRQA PGKRLEWVAL ISYDGKKQYY LDSVKGRFTI SRDNSKDMVY LQMNSLKAED TAIYYCARDR ARSTGYFGGI YYYYYGMDVW GQGTTVTVS GASTKGPSVF PLAPSSKSTS GG TAALGCL VKDYFPEPVT ...文字列: EVQLVESGGG VVQPGRSLRL SCGVSGFTFS NYAIHWVRQA PGKRLEWVAL ISYDGKKQYY LDSVKGRFTI SRDNSKDMVY LQMNSLKAED TAIYYCARDR ARSTGYFGGI YYYYYGMDVW GQGTTVTVS GASTKGPSVF PLAPSSKSTS GG TAALGCL VKDYFPEPVT VSWNSGALTS GVHTFPAVLQ SSGLYSLSSV VTVPSSSLGT QTY ICNVNH KPSNTKVDKR VEPKSCDKHH HHHH |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.01 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.5 構成要素:
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染色 | タイプ: NEGATIVE / 材質: Uranyl Formate / 詳細: 2% uranyl formate used to stain sample for 20 s | ||||||||||||
グリッド | モデル: EMS / 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE | ||||||||||||
詳細 | HIV-1 CH505 Transmitted Founder SOSIP.664 Env trimer in Complex with the DH576 Fab from the RV305 Trial |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI 12 |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN ULTRASCAN 4000 (4k x 4k) 平均電子線量: 25.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 120 kV / 電子線源: LAB6 |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
試料ステージ | ホルダー冷却材: NITROGEN |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C3 (3回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 28.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: EMAN2 (ver. 2.1) / 使用した粒子像数: 22929 |
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初期 角度割当 | タイプ: COMMON LINE |
最終 角度割当 | タイプ: COMMON LINE |