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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8175 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of an ErmBL-stalled ribosome in complex with A-, P-, and E-tRNA | |||||||||
マップデータ | None | |||||||||
試料 |
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キーワード | Ribosome / ErmBL / Stalling / Translation / Erythromycin | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis ...stringent response / ornithine decarboxylase inhibitor activity / transcription antitermination factor activity, RNA binding / misfolded RNA binding / Group I intron splicing / RNA folding / transcriptional attenuation / endoribonuclease inhibitor activity / RNA-binding transcription regulator activity / positive regulation of ribosome biogenesis / negative regulation of cytoplasmic translation / translational termination / four-way junction DNA binding / DnaA-L2 complex / translation repressor activity / negative regulation of DNA-templated DNA replication initiation / negative regulation of translational initiation / regulation of mRNA stability / mRNA regulatory element binding translation repressor activity / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / positive regulation of RNA splicing / transcription elongation factor complex / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA endonuclease activity / response to reactive oxygen species / transcription antitermination / regulation of cell growth / DNA-templated transcription termination / maintenance of translational fidelity / response to radiation / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosome biogenesis / ribosome binding / regulation of translation / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / molecular adaptor activity / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / translation / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / mRNA binding / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Arenz S / Bock LV | |||||||||
引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2016 タイトル: A combined cryo-EM and molecular dynamics approach reveals the mechanism of ErmBL-mediated translation arrest. 著者: Stefan Arenz / Lars V Bock / Michael Graf / C Axel Innis / Roland Beckmann / Helmut Grubmüller / Andrea C Vaiana / Daniel N Wilson / 要旨: Nascent polypeptides can induce ribosome stalling, regulating downstream genes. Stalling of ErmBL peptide translation in the presence of the macrolide antibiotic erythromycin leads to resistance in ...Nascent polypeptides can induce ribosome stalling, regulating downstream genes. Stalling of ErmBL peptide translation in the presence of the macrolide antibiotic erythromycin leads to resistance in Streptococcus sanguis. To reveal this stalling mechanism we obtained 3.6-Å-resolution cryo-EM structures of ErmBL-stalled ribosomes with erythromycin. The nascent peptide adopts an unusual conformation with the C-terminal Asp10 side chain in a previously unseen rotated position. Together with molecular dynamics simulations, the structures indicate that peptide-bond formation is inhibited by displacement of the peptidyl-tRNA A76 ribose from its canonical position, and by non-productive interactions of the A-tRNA Lys11 side chain with the A-site crevice. These two effects combine to perturb peptide-bond formation by increasing the distance between the attacking Lys11 amine and the Asp10 carbonyl carbon. The interplay between drug, peptide and ribosome uncovered here also provides insight into the fundamental mechanism of peptide-bond formation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_8175.map.gz | 177.9 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-8175-v30.xml emd-8175.xml | 67.7 KB 67.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_8175.png | 29.7 KB | ||
Filedesc metadata | emd-8175.cif.gz | 14.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8175 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8175 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_8175_validation.pdf.gz | 697.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_8175_full_validation.pdf.gz | 697.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_8175_validation.xml.gz | 6.7 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_8175_validation.cif.gz | 7.8 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8175 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8175 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8175.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 190.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | None | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.108 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : ErmBL-stalled E.coli 70S ribosome
+超分子 #1: ErmBL-stalled E.coli 70S ribosome
+分子 #1: 16S ribosomal RNA
+分子 #22: mRNA
+分子 #23: A-site Lysine tRNA Lysine
+分子 #24: P-site tRNA Aspartate
+分子 #25: E-site tRNA Valine
+分子 #26: 23S ribosomal RNA
+分子 #27: 5S ribosomal RNA
+分子 #2: 30S ribosomal protein S2
+分子 #3: 30S ribosomal protein S3
+分子 #4: 30S ribosomal protein S4
+分子 #5: 30S ribosomal protein S5
+分子 #6: 30S ribosomal protein S6
+分子 #7: 30S ribosomal protein S7
+分子 #8: 30S ribosomal protein S8
+分子 #9: 30S ribosomal protein S9
+分子 #10: 30S ribosomal protein S10
+分子 #11: 30S ribosomal protein S11
+分子 #12: 30S ribosomal protein S12
+分子 #13: 30S ribosomal protein S13
+分子 #14: 30S ribosomal protein S14
+分子 #15: 30S ribosomal protein S15
+分子 #16: 30S ribosomal protein S16
+分子 #17: 30S ribosomal protein S17
+分子 #18: 30S ribosomal protein S18
+分子 #19: 30S ribosomal protein S19
+分子 #20: 30S ribosomal protein S20
+分子 #21: 30S ribosomal protein S21
+分子 #28: 50S ribosomal protein L2
+分子 #29: 50S ribosomal protein L3
+分子 #30: 50S ribosomal protein L4
+分子 #31: 50S ribosomal protein L5
+分子 #32: 50S ribosomal protein L6
+分子 #33: 50S ribosomal protein L9
+分子 #34: 50S ribosomal protein L11
+分子 #35: 50S ribosomal protein L13
+分子 #36: 50S ribosomal protein L14
+分子 #37: 50S ribosomal protein L15
+分子 #38: 50S ribosomal protein L16
+分子 #39: 50S ribosomal protein L17
+分子 #40: 50S ribosomal protein L18
+分子 #41: 50S ribosomal protein L19
+分子 #42: 50S ribosomal protein L20
+分子 #43: 50S ribosomal protein L21
+分子 #44: 50S ribosomal protein L22
+分子 #45: 50S ribosomal protein L23
+分子 #46: 50S ribosomal protein L24
+分子 #47: 50S ribosomal protein L25
+分子 #48: 50S ribosomal protein L27
+分子 #49: 50S ribosomal protein L28
+分子 #50: 50S ribosomal protein L29
+分子 #51: 50S ribosomal protein L30
+分子 #52: 50S ribosomal protein L32
+分子 #53: 50S ribosomal protein L33
+分子 #54: 50S ribosomal protein L34
+分子 #55: 50S ribosomal protein L35
+分子 #56: 50S ribosomal protein L36
+分子 #57: ErmBL
+分子 #58: LYSINE
+分子 #59: ERYTHROMYCIN A
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.4 |
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糖包埋 | 材質: vitreous ice |
グリッド | モデル: Quantifoil R3/3 / 材質: COPPER / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 検出モード: INTEGRATING / 平均電子線量: 4.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.2 µm 最小 デフォーカス(公称値): 0.7000000000000001 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: INSILICO MODEL |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF 詳細: Due to image processing in the absence of spatial frequencies higher than 8 angstroms, the FSC value of 0.143 was used for average resolution determination. 使用した粒子像数: 85393 |
初期 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: SPIDER |
最終 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: SPIDER |