+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-8059 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Structural basis of backwards motion in kinesin-14: minus-end directed nKn664 in the nucleotide-free state | |||||||||
マップデータ | None | |||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | kinesin / kinesin-14 / microtubule / ATPase / STRUCTURAL PROTEIN-MOTOR PROTEIN complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 T=3 icosahedral viral capsid / positive regulation of axon guidance / microtubule-based process / structural constituent of cytoskeleton / microtubule cytoskeleton organization / microtubule cytoskeleton / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / regulation of translation / mitotic cell cycle / nervous system development ...T=3 icosahedral viral capsid / positive regulation of axon guidance / microtubule-based process / structural constituent of cytoskeleton / microtubule cytoskeleton organization / microtubule cytoskeleton / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / regulation of translation / mitotic cell cycle / nervous system development / microtubule / protein heterodimerization activity / GTPase activity / GTP binding / structural molecule activity / RNA binding / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Bos taurus (ウシ) / Drosophila melanogaster (キイロショウジョウバエ) | |||||||||
手法 | らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Shigematsu H / Yokoyama T | |||||||||
引用 | ジャーナル: Structure / 年: 2016 タイトル: Structural Basis of Backwards Motion in Kinesin-1-Kinesin-14 Chimera: Implication for Kinesin-14 Motility. 著者: Masahiko Yamagishi / Hideki Shigematsu / Takeshi Yokoyama / Masahide Kikkawa / Mitsuhiro Sugawa / Mari Aoki / Mikako Shirouzu / Junichiro Yajima / Ryo Nitta / 要旨: Kinesin-14 is a unique minus-end-directed microtubule-based motor. A swinging motion of a class-specific N-terminal neck helix has been proposed to produce minus-end directionality. However, it is ...Kinesin-14 is a unique minus-end-directed microtubule-based motor. A swinging motion of a class-specific N-terminal neck helix has been proposed to produce minus-end directionality. However, it is unclear how swinging of the neck helix is driven by ATP hydrolysis utilizing the highly conserved catalytic core among all kinesins. Here, using a motility assay, we show that in addition to the neck helix, the conserved five residues at the C-terminal region in kinesin-14, namely the neck mimic, are necessary to give kinesin-1 an ability to reverse its directionality toward the minus end of microtubules. Our structural analyses further demonstrate that the C-terminal neck mimic, in cooperation with conformational changes in the catalytic core during ATP binding, forms a kinesin-14 bundle with the N-terminal neck helix to swing toward the minus end of microtubules. Thus, the neck mimic plays a crucial role in coupling the chemical ATPase reaction with the mechanical cycle to produce the minus-end-directed motility of kinesin-14. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
---|---|
構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_8059.map.gz | 7.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-8059-v30.xml emd-8059.xml | 15 KB 15 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_8059.png | 161.8 KB | ||
Filedesc metadata | emd-8059.cif.gz | 6.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8059 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-8059 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_8059_validation.pdf.gz | 492.5 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_8059_full_validation.pdf.gz | 492.1 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_8059_validation.xml.gz | 4.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_8059_validation.cif.gz | 5.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8059 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-8059 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_8059.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 8.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | None | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 これらの図は立方格子座標系で作成されたものです | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.284 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
|
-添付データ
-試料の構成要素
+全体 : Minus-end directed Ncd chimera nKn664 in the AMPPNP state complex...
+超分子 #1: Minus-end directed Ncd chimera nKn664 in the AMPPNP state complex...
+超分子 #2: Tubulin alpha-1B chain
+超分子 #3: Tubulin beta-2B chain
+超分子 #4: Protein claret segregational,kinesin-1/kinesin-14,Protein claret ...
+分子 #1: Tubulin alpha-1B chain
+分子 #2: Tubulin beta-2B chain
+分子 #3: Protein claret segregational,kinesin-1/kinesin-14,Protein claret ...
+分子 #4: MAGNESIUM ION
+分子 #5: GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE
+分子 #6: GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE
+分子 #7: TAXOL
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | らせん対称体再構成法 |
試料の集合状態 | filament |
-試料調製
緩衝液 | pH: 6.8 |
---|---|
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TECNAI ARCTICA |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 平均電子線量: 30.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 8.751208 Å 想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: -25.725189 ° 想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C1 (非対称) 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 6.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 詳細: High-resolution noise substitution was performed / 使用した粒子像数: 229516 |
---|---|
初期モデル | モデルのタイプ: EMDB MAP |
最終 角度割当 | タイプ: NOT APPLICABLE |
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: FLEXIBLE FIT |
---|---|
得られたモデル | PDB-5hnx: |