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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7k5w | ||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of heterologous protein complex loaded Thermotoga maritima encapsulin capsid | ||||||
要素 | Maritimacin | ||||||
キーワード | HYDROLASE / encapsulin / baculovirus expression system / cargo loading peptide / complex assembly / METAL BINDING PROTEIN | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 encapsulin nanocompartment / 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素 / peptidase activity / iron ion transport / intracellular iron ion homeostasis / proteolysis 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Thermotoga maritima (バクテリア) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.87 Å | ||||||
データ登録者 | Xiong, X. / Sun, C. / Vago, F.S. / Klose, T. / Zhu, J. / Jiang, W. | ||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Biomolecules / 年: 2020 タイトル: Cryo-EM Structure of Heterologous Protein Complex Loaded Encapsulin Capsid. 著者: Xiansong Xiong / Chen Sun / Frank S Vago / Thomas Klose / Jiankang Zhu / Wen Jiang / 要旨: Encapsulin is a class of nanocompartments that is unique in bacteria and archaea to confine enzymatic activities and sequester toxic reaction products. Here we present a 2.87 Å resolution cryo-EM ...Encapsulin is a class of nanocompartments that is unique in bacteria and archaea to confine enzymatic activities and sequester toxic reaction products. Here we present a 2.87 Å resolution cryo-EM structure of encapsulin with heterologous protein complex loaded. It is the first successful case of expressing encapsulin and heterologous cargo protein in the insect cell system. Although we failed to reconstruct the cargo protein complex structure due to the signal interference of the capsid shell, we were able to observe some unique features of the cargo-loaded encapsulin shell, for example, an extra density at the fivefold pore that has not been reported before. These results would lead to a more complete understanding of the encapsulin cargo assembly process of . | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7k5w.cif.gz | 60 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7k5w.ent.gz | 43.1 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 7k5w.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7k5w_validation.pdf.gz | 994.2 KB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7k5w_full_validation.pdf.gz | 996.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | 7k5w_validation.xml.gz | 29.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7k5w_validation.cif.gz | 40.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k5/7k5w ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k5/7k5w | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
| x 60
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| x 5
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| x 6
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対称性 | 点対称性: (シェーンフリース記号: I (正20面体型対称)) |
-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 31489.787 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Thermotoga maritima (バクテリア) 遺伝子: TM_0785 発現宿主: Insect cell expression vector pTIE1 (その他) 参照: UniProt: Q9WZP2, 加水分解酵素; プロテアーゼ; ペプチド結合加水分解酵素 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Maritimacin / タイプ: COMPLEX / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 0.031 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Thermotoga maritima (バクテリア) |
由来(組換発現) | 生物種: Insect cell expression vector pTIE1 (その他) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: C-flat-2/1 |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: OTHER |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm |
撮影 | 電子線照射量: 56.4 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
電子光学装置 | エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: NONE | |||||||||||||||
対称性 | 点対称性: I (正20面体型対称) | |||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.87 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 112241 / 対称性のタイプ: POINT |