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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 7ckb | ||||||
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タイトル | Simplified Alpha-Carboxysome, T=3 | ||||||
要素 |
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キーワード | VIRUS LIKE PARTICLE / Bacterial Microcompartment / Alpha-carboxysome | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 | ||||||
生物種 | Halothiobacillus neapolitanus (紅色硫黄細菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.24 Å | ||||||
データ登録者 | Tan, Y.Q. / Ali, S. / Xue, B. / Robinson, R.C. / Narita, A. / Yew, W.S. | ||||||
資金援助 | シンガポール, 1件
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引用 | ジャーナル: Biomacromolecules / 年: 2021 タイトル: Structure of a Minimal α-Carboxysome-Derived Shell and Its Utility in Enzyme Stabilization. 著者: Yong Quan Tan / Samson Ali / Bo Xue / Wei Zhe Teo / Lay Hiang Ling / Maybelle Kho Go / Hong Lv / Robert C Robinson / Akihiro Narita / Wen Shan Yew / 要旨: Bacterial microcompartments are proteinaceous shells that encase specialized metabolic processes in bacteria. Recent advances in simplification of these intricate shells have encouraged ...Bacterial microcompartments are proteinaceous shells that encase specialized metabolic processes in bacteria. Recent advances in simplification of these intricate shells have encouraged bioengineering efforts. Here, we construct minimal shells derived from the α-carboxysome, which we term Cso-shell. Using cryogenic electron microscopy, the atomic-level structures of two shell forms were obtained, reinforcing notions of evolutionarily conserved features in bacterial microcompartment shell architecture. Encapsulation peptide sequences that facilitate loading of heterologous protein cargo within the shells were identified. We further provide a first demonstration in utilizing minimal bacterial microcompartment-derived shells for hosting heterologous enzymes. Cso-shells were found to stabilize enzymatic activities against heat shock, presence of methanol co-solvent, consecutive freeze-thawing, and alkaline environments. This study yields insights into α-carboxysome assembly and advances the utility of synthetic bacterial microcompartments as nanoreactors capable of stabilizing enzymes with varied properties and reaction chemistries. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 7ckb.cif.gz | 2.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb7ckb.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 7ckb.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 7ckb_validation.pdf.gz | 1.3 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 7ckb_full_validation.pdf.gz | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | 7ckb_validation.xml.gz | 318.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 7ckb_validation.cif.gz | 501.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ck/7ckb ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ck/7ckb | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 10173.640 Da / 分子数: 60 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Halothiobacillus neapolitanus (紅色硫黄細菌) 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: O85043 #2: タンパク質 | 分子量: 9973.478 Da / 分子数: 120 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Halothiobacillus neapolitanus (strain ATCC 23641 / c2) (紅色硫黄細菌) 株: ATCC 23641 / c2 / 遺伝子: csoS1A, Hneap_0915 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P45689 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Simplified Alpha-Carboxysome, T=3 / タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 1.7 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Halothiobacillus neapolitanus (紅色硫黄細菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.9 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 装置: LEICA EM GP / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 90 % / 凍結前の試料温度: 298 K / 詳細: Blot for 1.0 - 2.5 seconds |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1900 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
撮影 | 電子線照射量: 64.3 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア |
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 94129 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.24 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 11468 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 10.67 Å2 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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