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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 6uz7 | ||||||
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タイトル | K.lactis 80S ribosome with p/PE tRNA and eIF5B | ||||||
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![]() | RIBOSOME / translation / initiation / eIF5B | ||||||
機能・相同性 | ![]() formation of cytoplasmic translation initiation complex / eukaryotic 48S preinitiation complex / regulation of translational initiation / response to cycloheximide / endonucleolytic cleavage to generate mature 3'-end of SSU-rRNA from (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / protein-RNA complex assembly / translation regulator activity / endonucleolytic cleavage in ITS1 to separate SSU-rRNA from 5.8S rRNA and LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / translation initiation factor binding / translation initiation factor activity ...formation of cytoplasmic translation initiation complex / eukaryotic 48S preinitiation complex / regulation of translational initiation / response to cycloheximide / endonucleolytic cleavage to generate mature 3'-end of SSU-rRNA from (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / protein-RNA complex assembly / translation regulator activity / endonucleolytic cleavage in ITS1 to separate SSU-rRNA from 5.8S rRNA and LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / translation initiation factor binding / translation initiation factor activity / rescue of stalled ribosome / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / 90S preribosome / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of LSU-rRNA / cytosolic ribosome assembly / ribosomal large subunit biogenesis / maturation of SSU-rRNA / small-subunit processome / positive regulation of apoptotic signaling pathway / protein kinase C binding / modification-dependent protein catabolic process / rRNA processing / protein tag activity / ribosome biogenesis / ribosome binding / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / small ribosomal subunit rRNA binding / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic small ribosomal subunit / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / rRNA binding / negative regulation of translation / ribosome / protein ubiquitination / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / positive regulation of protein phosphorylation / response to antibiotic / GTPase activity / mRNA binding / ubiquitin protein ligase binding / nucleolus / GTP binding / RNA binding / zinc ion binding / nucleus / metal ion binding / cytoplasm / cytosol 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() ![]() ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.6 Å | ||||||
![]() | Fernandez, I.S. / Huang, B.Y. | ||||||
![]() | ![]() タイトル: Long-range interdomain communications in eIF5B regulate GTP hydrolysis and translation initiation. 著者: Bridget Y Huang / Israel S Fernández / ![]() 要旨: Translation initiation controls protein synthesis by regulating the delivery of the first aminoacyl-tRNA to messenger RNAs (mRNAs). In eukaryotes, initiation is sophisticated, requiring dozens of ...Translation initiation controls protein synthesis by regulating the delivery of the first aminoacyl-tRNA to messenger RNAs (mRNAs). In eukaryotes, initiation is sophisticated, requiring dozens of protein factors and 2 GTP-regulated steps. The GTPase eIF5B gates progression to elongation during the second GTP-regulated step. Using electron cryomicroscopy (cryo-EM), we imaged an in vitro initiation reaction which is set up with purified yeast components and designed to stall with eIF5B and a nonhydrolyzable GTP analog. A high-resolution reconstruction of a "dead-end" intermediate at 3.6 Å allowed us to visualize eIF5B in its ribosome-bound conformation. We identified a stretch of residues in eIF5B, located close to the γ-phosphate of GTP and centered around the universally conserved tyrosine 837 ( numbering), that contacts the catalytic histidine of eIF5B (H480). Site-directed mutagenesis confirmed the essential role that these residues play in regulating ribosome binding, GTP hydrolysis, and translation initiation both in vitro and in vivo. Our results illustrate how eIF5B transmits the presence of a properly delivered initiator aminoacyl-tRNA at the P site to the distant GTPase center through interdomain communications and underscore the importance of the multidomain architecture in translation factors to sense and communicate ribosomal states. | ||||||
履歴 |
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構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 2 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 2.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 351.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 601.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
-RNA鎖 , 5種, 5分子 57823
#1: RNA鎖 | 分子量: 1086985.750 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 38951.105 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#3: RNA鎖 | 分子量: 910658.562 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#81: RNA鎖 | 分子量: 579239.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#83: RNA鎖 | 分子量: 24532.604 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() ![]() |
+タンパク質 , 47種, 47分子 AAACADAEAFAGAHAIAJAMAOAPAQARATAUAVAYAZBaBdBeBfBgBhBkBmBpBqBr...
-60S ribosomal protein ... , 11種, 11分子 ABALASAWAXBbBcBiBlBnBo
#5: タンパク質 | 分子量: 43781.500 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#14: タンパク質 | 分子量: 22702.346 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#21: タンパク質 | 分子量: 20494.939 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#25: タンパク質 | 分子量: 17638.668 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#26: タンパク質 | 分子量: 15746.497 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#30: タンパク質 | 分子量: 7090.360 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#31: タンパク質 | 分子量: 11382.281 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#37: タンパク質 | 分子量: 11128.179 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#40: タンパク質 | 分子量: 6358.640 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#42: タンパク質・ペプチド | 分子量: 3137.985 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#43: タンパク質 | 分子量: 12267.632 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-Ribosomal protein ... , 2種, 2分子 ANBj
#16: タンパク質 | 分子量: 24454.307 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#38: タンパク質 | 分子量: 9968.549 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-40S ribosomal protein ... , 18種, 18分子 ABEGHIMOQVWYZabcde
#48: タンパク質 | 分子量: 28264.525 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
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#49: タンパク質 | 分子量: 28971.643 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#52: タンパク質 | 分子量: 29617.514 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#54: タンパク質 | 分子量: 26970.391 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#55: タンパク質 | 分子量: 21735.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#56: タンパク質 | 分子量: 22642.727 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#60: タンパク質 | 分子量: 14466.398 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#62: タンパク質 | 分子量: 14530.655 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#64: タンパク質 | 分子量: 15874.531 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#69: タンパク質 | 分子量: 9797.949 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#70: タンパク質 | 分子量: 14645.041 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#72: タンパク質 | 分子量: 15194.549 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#73: タンパク質 | 分子量: 12002.116 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#74: タンパク質 | 分子量: 13539.957 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#75: タンパク質 | 分子量: 8884.362 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#76: タンパク質 | 分子量: 7549.824 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#77: タンパク質 | 分子量: 6662.570 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
#78: タンパク質 | 分子量: 7141.421 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() |
-非ポリマー , 2種, 7分子 ![](data/chem/img/ZN.gif)
![](data/chem/img/GCP.gif)
![](data/chem/img/GCP.gif)
#84: 化合物 | ChemComp-ZN / #85: 化合物 | ChemComp-GCP / | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Kluyveromyces lactis 80S ribosome in complex with eIF5B タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#83 / 由来: NATURAL |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: ![]() |
緩衝液 | pH: 6 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Tecnai Polara / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI POLARA 300 |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) |
画像スキャン | 動画フレーム数/画像: 16 |
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解析
EMソフトウェア | 名称: RELION / カテゴリ: 分類 |
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CTF補正 | タイプ: NONE |
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 64815 |
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) |
3次元再構成 | 解像度: 3.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 29712 / 対称性のタイプ: POINT |
原子モデル構築 | B value: 110.6 |
原子モデル構築 | PDB-ID: 3U5B![]() 3u5b Accession code: 3U5B / Source name: PDB / タイプ: experimental model |