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基本情報
| 登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-6878 | |||||||||
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| タイトル | Cryo-EM structure of a nucleolar pre-60S ribosome (Rpf1-TAP) | |||||||||
マップデータ | Unmasked cryo-EM map | |||||||||
試料 |
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キーワード | ribosome / pre-60S / pre-ribosome / protein-RNA complex | |||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報snoRNA release from pre-rRNA / nuclear division / exonucleolytic trimming to generate mature 5'-end of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / endonucleolytic cleavage in ITS1 upstream of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / PeBoW complex / ATP-dependent activity, acting on RNA / rRNA primary transcript binding / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of 5.8S rRNA / cleavage in ITS2 between 5.8S rRNA and LSU-rRNA of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) ...snoRNA release from pre-rRNA / nuclear division / exonucleolytic trimming to generate mature 5'-end of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / endonucleolytic cleavage in ITS1 upstream of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / PeBoW complex / ATP-dependent activity, acting on RNA / rRNA primary transcript binding / maturation of 5.8S rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of 5.8S rRNA / cleavage in ITS2 between 5.8S rRNA and LSU-rRNA of tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / preribosome, small subunit precursor / proteasome binding / Major pathway of rRNA processing in the nucleolus and cytosol / ribosomal large subunit binding / SRP-dependent cotranslational protein targeting to membrane / GTP hydrolysis and joining of the 60S ribosomal subunit / preribosome, large subunit precursor / Formation of a pool of free 40S subunits / Nonsense Mediated Decay (NMD) independent of the Exon Junction Complex (EJC) / Nonsense Mediated Decay (NMD) enhanced by the Exon Junction Complex (EJC) / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / translational elongation / ribosomal large subunit export from nucleus / 90S preribosome / ribonucleoprotein complex binding / ribosomal subunit export from nucleus / maturation of LSU-rRNA / translation initiation factor activity / nuclear periphery / proteasome complex / assembly of large subunit precursor of preribosome / cytosolic ribosome assembly / ribosomal large subunit biogenesis / maturation of LSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / maturation of SSU-rRNA from tricistronic rRNA transcript (SSU-rRNA, 5.8S rRNA, LSU-rRNA) / macroautophagy / maturation of SSU-rRNA / protein catabolic process / small-subunit processome / maintenance of translational fidelity / rRNA processing / nuclear envelope / ribosomal small subunit biogenesis / 5S rRNA binding / ribosomal large subunit assembly / large ribosomal subunit rRNA binding / protein-macromolecule adaptor activity / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / RNA helicase activity / negative regulation of translation / rRNA binding / structural constituent of ribosome / RNA helicase / ribosome / translation / mRNA binding / nucleolus / ATP hydrolysis activity / RNA binding / zinc ion binding / nucleoplasm / ATP binding / identical protein binding / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
| 生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
| 手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.65 Å | |||||||||
データ登録者 | Zhou D / Zhu X / Ye K | |||||||||
引用 | ジャーナル: Protein Cell / 年: 2019タイトル: Cryo-EM structure of an early precursor of large ribosomal subunit reveals a half-assembled intermediate. 著者: Dejian Zhou / Xing Zhu / Sanduo Zheng / Dan Tan / Meng-Qiu Dong / Keqiong Ye / ![]() 要旨: Assembly of eukaryotic ribosome is a complicated and dynamic process that involves a series of intermediates. It is unknown how the highly intertwined structure of 60S large ribosomal subunits is ...Assembly of eukaryotic ribosome is a complicated and dynamic process that involves a series of intermediates. It is unknown how the highly intertwined structure of 60S large ribosomal subunits is established. Here, we report the structure of an early nucleolar pre-60S ribosome determined by cryo-electron microscopy at 3.7 Å resolution, revealing a half-assembled subunit. Domains I, II and VI of 25S/5.8S rRNA pack tightly into a native-like substructure, but domains III, IV and V are not assembled. The structure contains 12 assembly factors and 19 ribosomal proteins, many of which are required for early processing of large subunit rRNA. The Brx1-Ebp2 complex would interfere with the assembly of domains IV and V. Rpf1, Mak16, Nsa1 and Rrp1 form a cluster that consolidates the joining of domains I and II. Our structure reveals a key intermediate on the path to establishing the global architecture of 60S subunits. | |||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| ムービー |
ムービービューア |
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| 構造ビューア | EMマップ: SurfView Molmil Jmol/JSmol |
| 添付画像 |
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ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
| マップデータ | emd_6878.map.gz | 166.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
|---|---|---|---|---|
| ヘッダ (付随情報) | emd-6878-v30.xml emd-6878.xml | 54.9 KB 54.9 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
| FSC (解像度算出) | emd_6878_fsc.xml | 12.8 KB | 表示 | FSCデータファイル |
| 画像 | emd_6878.png | 56.7 KB | ||
| Filedesc metadata | emd-6878.cif.gz | 13.5 KB | ||
| アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6878 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-6878 | HTTPS FTP |
-検証レポート
| 文書・要旨 | emd_6878_validation.pdf.gz | 673.9 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | emd_6878_full_validation.pdf.gz | 673.5 KB | 表示 | |
| XML形式データ | emd_6878_validation.xml.gz | 12.7 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | emd_6878_validation.cif.gz | 17.2 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6878 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-6878 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
| EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
|---|---|
| 「今月の分子」の関連する項目 |
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マップ
| ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_6878.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 注釈 | Unmasked cryo-EM map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.38 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 密度 |
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| 対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
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試料の構成要素
+全体 : Rpf1-TAP pre-60S
+超分子 #1: Rpf1-TAP pre-60S
+分子 #1: 25S rRNA
+分子 #2: 5.8S rRNA
+分子 #3: ITS2 RNA
+分子 #4: Ribosome biogenesis protein RLP7
+分子 #5: Ribosome biogenesis protein 15
+分子 #6: 60S ribosomal protein L3
+分子 #7: 60S ribosomal protein L4-A
+分子 #8: Proteasome-interacting protein CIC1
+分子 #9: 60S ribosomal protein L6-A
+分子 #10: 60S ribosomal protein L7-A
+分子 #11: 60S ribosomal protein L8-A
+分子 #12: 60S ribosomal protein L9-A
+分子 #13: Nucleolar protein 7
+分子 #14: Eukaryotic translation initiation factor 6
+分子 #15: Ribosome production factor 1
+分子 #16: 60S ribosomal protein L13-A
+分子 #17: 60S ribosomal protein L14-A
+分子 #18: 60S ribosomal protein L15-A
+分子 #19: 60S ribosomal protein L16-A
+分子 #20: 60S ribosomal protein L17-A
+分子 #21: 60S ribosomal protein L18-A
+分子 #22: Ribosome biogenesis protein NSA1
+分子 #23: 60S ribosomal protein L20-A
+分子 #24: Ribosomal RNA-processing protein 1
+分子 #25: ATP-dependent RNA helicase HAS1
+分子 #26: Protein MAK16
+分子 #27: Ribosome biogenesis protein BRX1
+分子 #28: rRNA-processing protein EBP2
+分子 #29: 60S ribosomal protein L26-A
+分子 #30: Unassigned
+分子 #31: 60S ribosomal protein L32
+分子 #32: 60S ribosomal protein L33-A
+分子 #33: 60S ribosomal protein L35-A
+分子 #34: 60S ribosomal protein L36-A
+分子 #35: 60S ribosomal protein L37-A
-実験情報
-構造解析
| 手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
|---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
| 試料の集合状態 | particle |
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試料調製
| 緩衝液 | pH: 8 構成要素:
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|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| グリッド | 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR | ||||||||||||
| 凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blot for 1-3 seconds before plunging. |
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電子顕微鏡法
| 顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
|---|---|
| 撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 1983 / 平均露光時間: 1.5 sec. / 平均電子線量: 30.0 e/Å2 |
| 電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
| 電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
| 試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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画像解析
-原子モデル構築 1
| 詳細 | real space refinement |
|---|---|
| 精密化 | 空間: REAL |
| 得られたモデル | ![]() PDB-5z3g: |
ムービー
コントローラー
万見について



キーワード
データ登録者
引用
UCSF Chimera


















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