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万見
- PDB-5wk5: Cryo-EM structure of P. aeruginosa flagellar filaments A443V -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 5wk5
タイトルCryo-EM structure of P. aeruginosa flagellar filaments A443V
要素B-type flagellin
キーワードPROTEIN FIBRIL / bacteria flagella / helical polymers / cryo-EM
機能・相同性
機能・相同性情報


bacterial-type flagellum / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / structural molecule activity / extracellular region
類似検索 - 分子機能
Flagellin hook, IN motif / Flagellin hook IN motif / Flagellin, C-terminal domain, subdomain 2 / Flagellin, C-terminal domain / Bacterial flagellin C-terminal helical region / Flagellin / Flagellin, N-terminal domain / Bacterial flagellin N-terminal helical region
類似検索 - ドメイン・相同性
生物種Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
手法電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / ネガティブ染色法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.2 Å
データ登録者Wang, F. / Postel, S. / Sundberg, E.J. / Egelman, E.H.
資金援助 米国, 1件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM122510 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2017
タイトル: A structural model of flagellar filament switching across multiple bacterial species.
著者: Fengbin Wang / Andrew M Burrage / Sandra Postel / Reece E Clark / Albina Orlova / Eric J Sundberg / Daniel B Kearns / Edward H Egelman /
要旨: The bacterial flagellar filament has long been studied to understand how a polymer composed of a single protein can switch between different supercoiled states with high cooperativity. Here we ...The bacterial flagellar filament has long been studied to understand how a polymer composed of a single protein can switch between different supercoiled states with high cooperativity. Here we present near-atomic resolution cryo-EM structures for flagellar filaments from both Gram-positive Bacillus subtilis and Gram-negative Pseudomonas aeruginosa. Seven mutant flagellar filaments in B. subtilis and two in P. aeruginosa capture two different states of the filament. These reliable atomic models of both states reveal conserved molecular interactions in the interior of the filament among B. subtilis, P. aeruginosa and Salmonella enterica. Using the detailed information about the molecular interactions in two filament states, we successfully predict point mutations that shift the equilibrium between those two states. Further, we observe the dimerization of P. aeruginosa outer domains without any perturbation of the conserved interior of the filament. Our results give new insights into how the flagellin sequence has been "tuned" over evolution.Bacterial flagellar filaments are composed almost entirely of a single protein-flagellin-which can switch between different supercoiled states in a highly cooperative manner. Here the authors present near-atomic resolution cryo-EM structures of nine flagellar filaments, and begin to shed light on the molecular basis of filament switching.
履歴
登録2017年7月24日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02017年10月25日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12017年11月1日Group: Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.journal_volume / _citation.page_first ..._citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title
改定 1.22020年1月1日Group: Author supporting evidence / カテゴリ: pdbx_audit_support / Item: _pdbx_audit_support.funding_organization
改定 1.32024年3月13日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond / database_2
Item: _database_2.pdbx_DOI / _database_2.pdbx_database_accession

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構造の表示

ムービー
  • 登録構造単位
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • マップデータ: EMDB-8855
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
  • EMマップとの重ね合わせ
  • マップデータ: EMDB-8855
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: B-type flagellin
B: B-type flagellin
C: B-type flagellin
D: B-type flagellin
E: B-type flagellin
F: B-type flagellin
G: B-type flagellin
H: B-type flagellin
I: B-type flagellin
J: B-type flagellin
K: B-type flagellin
L: B-type flagellin
M: B-type flagellin
N: B-type flagellin
O: B-type flagellin
P: B-type flagellin
Q: B-type flagellin
R: B-type flagellin
S: B-type flagellin
T: B-type flagellin
U: B-type flagellin
V: B-type flagellin
W: B-type flagellin
X: B-type flagellin
Y: B-type flagellin
Z: B-type flagellin
a: B-type flagellin
b: B-type flagellin
c: B-type flagellin
d: B-type flagellin
e: B-type flagellin
f: B-type flagellin
g: B-type flagellin
h: B-type flagellin
i: B-type flagellin
j: B-type flagellin
k: B-type flagellin
l: B-type flagellin
m: B-type flagellin
n: B-type flagellin
o: B-type flagellin


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)2,021,41941
ポリマ－2,021,41941
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: microscopy, helical filament was observed by negative staining and Cryo-EM
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551
Buried area282190 Å2
ΔGint-856 kcal/mol
Surface area368470 Å2
対称性らせん対称: (回転対称性: 1 / Dyad axis: no / N subunits divisor: 1 / Num. of operations: 20 / Rise per n subunits: 4.61 Å / Rotation per n subunits: 65.75 °)

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要素

#1: タンパク質 ...
B-type flagellin


分子量: 49302.906 Da / 分子数: 41 / 変異: A443V / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) (緑膿菌)
株: ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1
遺伝子: fliC, PA1092 / 発現宿主: Pseudomonas aeruginosa PAO1 (緑膿菌) / 参照: UniProt: P72151

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: FILAMENT / ３次元再構成法: らせん対称体再構成法

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試料調製

構成要素名称: Pseudomonas aeruginosa flagella filament / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT
分子量実験値: NO
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa PAO1 (緑膿菌)
由来(組換発現)生物種: Pseudomonas aeruginosa PAO1 (緑膿菌)
緩衝液pH: 7.4 / 詳細: PBS
試料濃度: 0.1 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: YES / 凍結: YES
染色タイプ: NEGATIVE / 染色剤: negative stain
急速凍結凍結剤: ETHANE / 湿度: 90 %

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD
撮影平均露光時間: 2 sec. / 電子線照射量: 20 e/Å2 / 検出モード: INTEGRATING
フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k)
詳細: Images were stored containing seven parts, where each part represented a set of frames corresponding to a dose of ~20 electrons per Angstrom^2. The full dose image stack was used for the ...詳細: Images were stored containing seven parts, where each part represented a set of frames corresponding to a dose of ~20 electrons per Angstrom^2. The full dose image stack was used for the estimation of the CTF as well as for boxing filaments. Only the first two parts were used for the reconstruction (~5 electrons per Angstrom^2).
画像スキャン動画フレーム数/画像: 7

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解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: dev_2471: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称カテゴリ
1EMAN2粒子像選択
2EPU画像取得
4CTFFIND3CTF補正
7Rosettaモデルフィッティング
9SPIDER初期オイラー角割当
10SPIDER最終オイラー角割当
11SPIDER分類
12SPIDER３次元再構成
13PHENIXモデル精密化
14Cootモデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
らせん対称回転角度/サブユニット: 65.75 ° / 軸方向距離/サブユニット: 4.61 Å / らせん対称軸の対称性: C1
3次元再構成解像度: 4.2 Å / 解像度の算出法: OTHER / 粒子像の数: 102119 / アルゴリズム: BACK PROJECTION / 詳細: model-map FSC 0.38 cut-off / 対称性のタイプ: HELICAL
原子モデル構築空間: REAL
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.008162032
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d1.111291100
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d6.34764862
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.05213735
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.00428003

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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