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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-5676 | |||||||||
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タイトル | Obstruction of Dengue Virus Maturation by Fab Fragments of the 2H2 Antibody | |||||||||
マップデータ | High-concentration 2H2 Fab complexed to immature Dengue virus back-neutralized to pH 7 after lowering to pH 6 | |||||||||
試料 |
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キーワード | Dengue Maturation / Immature Dengue Antibody | |||||||||
生物種 | Dengue virus (デング熱ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 21.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Wang Z / Li L / Penningtona JG / Sheng J / Yap M / Plevk P / Meng G / Sun L / Jiang W / Rossmann MG | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Virol / 年: 2013 タイトル: Obstruction of dengue virus maturation by Fab fragments of the 2H2 antibody. 著者: Zhiqing Wang / Long Li / Janice G Pennington / Ju Sheng / Moh Lan Yap / Pavel Plevka / Geng Meng / Lei Sun / Wen Jiang / Michael G Rossmann / 要旨: The 2H2 monoclonal antibody recognizes the precursor peptide on immature dengue virus and might therefore be a useful tool for investigating the conformational change that occurs when the immature ...The 2H2 monoclonal antibody recognizes the precursor peptide on immature dengue virus and might therefore be a useful tool for investigating the conformational change that occurs when the immature virus enters an acidic environment. During dengue virus maturation, spiky, immature, noninfectious virions change their structure to form smooth-surfaced particles in the slightly acidic environment of the trans-Golgi network, thereby allowing cellular furin to cleave the precursor-membrane proteins. The dengue virions become fully infectious when they release the cleaved precursor peptide upon reaching the neutral-pH environment of the extracellular space. Here we report on the cryo-electron microscopy structures of the immature virus complexed with the 2H2 antigen binding fragments (Fab) at different concentrations and under various pH conditions. At neutral pH and a high concentration of Fab molecules, three Fab molecules bind to three precursor-membrane proteins on each spike of the immature virus. However, at a low concentration of Fab molecules and pH 7.0, only two Fab molecules bind to each spike. Changing to a slightly acidic pH caused no detectable change of structure for the sample with a high Fab concentration but caused severe structural damage to the low-concentration sample. Therefore, the 2H2 Fab inhibits the maturation process of immature dengue virus when Fab molecules are present at a high concentration, because the three Fab molecules on each spike hold the precursor-membrane molecules together, thereby inhibiting the normal conformational change that occurs during maturation. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_5676.map.gz | 40.2 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-5676-v30.xml emd-5676.xml | 11.3 KB 11.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_5676_1.jpg | 190.4 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5676 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-5676 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_5676_validation.pdf.gz | 78.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_5676_full_validation.pdf.gz | 77.5 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_5676_validation.xml.gz | 494 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5676 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-5676 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_5676.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 51.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | High-concentration 2H2 Fab complexed to immature Dengue virus back-neutralized to pH 7 after lowering to pH 6 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 3.72 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : High-concentration Fab Fragment of 2H2 antibody binding to immatu...
全体 | 名称: High-concentration Fab Fragment of 2H2 antibody binding to immature Dengue virus back-neutralized to pH 7 after lowering to pH 6 |
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要素 |
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-超分子 #1000: High-concentration Fab Fragment of 2H2 antibody binding to immatu...
超分子 | 名称: High-concentration Fab Fragment of 2H2 antibody binding to immature Dengue virus back-neutralized to pH 7 after lowering to pH 6 タイプ: sample / ID: 1000 集合状態: Three Fab fragments bind to three pr on each trimeric spike Number unique components: 3 |
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-超分子 #1: Dengue virus
超分子 | 名称: Dengue virus / タイプ: virus / ID: 1 / 詳細: immature virus / NCBI-ID: 12637 / 生物種: Dengue virus / Sci species strain: P16881 / データベース: NCBI / ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: Yes / ウイルス・中空状態: No |
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宿主 | 生物種: Aedes albopictus (ヒトスジシマカ) / 株: C6/36 / 別称: INVERTEBRATES |
ウイルス殻 | Shell ID: 1 / 名称: prM and E / 直径: 600 Å / T番号(三角分割数): 3 |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 / 詳細: 100mM phosphate buffer |
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グリッド | 詳細: Quantifoil 200 mesh |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内温度: 100 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI/PHILIPS CM200FEG |
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温度 | 最低: 80 K / 最高: 105 K / 平均: 100 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 100,000 times magnification |
日付 | 2011年3月8日 |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: NIKON COOLSCAN / デジタル化 - サンプリング間隔: 6 µm / 実像数: 47 / 平均電子線量: 25 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 51040 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 5.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: Film |
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最終 再構成 | アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 21.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: EMAN2 / 使用した粒子像数: 344 |
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: |
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ソフトウェア | 名称: EMFit |
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: RIGID BODY FIT |