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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-44460 | |||||||||
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タイトル | 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA | |||||||||
マップデータ | 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA | |||||||||
試料 |
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キーワード | Angiogenin / RNase / RIBOSOME | |||||||||
生物種 | Oryctolagus cuniculus (ウサギ) / Homo sapiens (ヒト) / Escherichia coli (大腸菌) / Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Loveland AB / Korostelev AA | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2024 タイトル: Structural mechanism of angiogenin activation by the ribosome. 著者: Anna B Loveland / Cha San Koh / Robin Ganesan / Allan Jacobson / Andrei A Korostelev / 要旨: Angiogenin, an RNase-A-family protein, promotes angiogenesis and has been implicated in cancer, neurodegenerative diseases and epigenetic inheritance. After activation during cellular stress, ...Angiogenin, an RNase-A-family protein, promotes angiogenesis and has been implicated in cancer, neurodegenerative diseases and epigenetic inheritance. After activation during cellular stress, angiogenin cleaves tRNAs at the anticodon loop, resulting in translation repression. However, the catalytic activity of isolated angiogenin is very low, and the mechanisms of the enzyme activation and tRNA specificity have remained a puzzle. Here we identify these mechanisms using biochemical assays and cryogenic electron microscopy (cryo-EM). Our study reveals that the cytosolic ribosome is the activator of angiogenin. A cryo-EM structure features angiogenin bound in the A site of the 80S ribosome. The C-terminal tail of angiogenin is rearranged by interactions with the ribosome to activate the RNase catalytic centre, making the enzyme several orders of magnitude more efficient in tRNA cleavage. Additional 80S-angiogenin structures capture how tRNA substrate is directed by the ribosome into angiogenin's active site, demonstrating that the ribosome acts as the specificity factor. Our findings therefore suggest that angiogenin is activated by ribosomes with a vacant A site, the abundance of which increases during cellular stress. These results may facilitate the development of therapeutics to treat cancer and neurodegenerative diseases. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_44460.map.gz | 794.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-44460-v30.xml emd-44460.xml | 17.8 KB 17.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_44460_fsc.xml | 20.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_44460.png | 120.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-44460.cif.gz | 4.5 KB | ||
その他 | emd_44460_additional_1.map.gz emd_44460_half_map_1.map.gz emd_44460_half_map_2.map.gz | 794 MB 166.8 MB 166.8 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-44460 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-44460 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_44460_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_44460_full_validation.pdf.gz | 1 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_44460_validation.xml.gz | 29.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_44460_validation.cif.gz | 38.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-44460 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-44460 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_44460.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 857.4 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.83 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA, low-pass...
ファイル | emd_44460_additional_1.map | ||||||||||||
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注釈 | 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA, low-pass filtered to 5 A, used to visualize tRNA | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA, half map 1
ファイル | emd_44460_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA, half map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA, half map 2
ファイル | emd_44460_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA, half map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA
全体 | 名称: 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA |
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要素 |
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-超分子 #1: 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA
超分子 | 名称: 80S ribosome with H13A angiogenin and tRNA / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 |
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分子量 | 理論値: 4.5 MDa |
-超分子 #2: 80S ribosome
超分子 | 名称: 80S ribosome / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Oryctolagus cuniculus (ウサギ) / 組織: Reticulocyte |
-超分子 #3: H13A angiogenin
超分子 | 名称: H13A angiogenin / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-超分子 #4: tRNA-fMet
超分子 | 名称: tRNA-fMet / タイプ: complex / ID: 4 / 親要素: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
-超分子 #5: tRNA from in vitro transcription system
超分子 | 名称: tRNA from in vitro transcription system / タイプ: complex / ID: 5 / 親要素: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
-超分子 #6: mRNA
超分子 | 名称: mRNA / タイプ: complex / ID: 6 / 親要素: 1 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / Synthetically produced: Yes |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/1 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 278 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 30.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.1 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.3 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |