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- EMDB-41048: Lassa GPC Trimer in complex with Fab 8.11G and nanobody D5 -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-41048
タイトルLassa GPC Trimer in complex with Fab 8.11G and nanobody D5
マップデータSharpened map
試料
  • 複合体: Lassa GPC Trimer in complex with Fab 8.11G and nanobody D5
    • タンパク質・ペプチド: Glycoprotein G1
    • タンパク質・ペプチド: Glycoprotein G2
    • タンパク質・ペプチド: D5 nanobody
    • タンパク質・ペプチド: 8.11G Heavy Chain
    • タンパク質・ペプチド: 8.11G Light Chain
  • リガンド: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
キーワードvaccine / GPC / GP1 / GP2 / VIRAL PROTEIN-IMMUNE SYSTEM complex
機能・相同性
機能・相同性情報


host cell Golgi membrane / receptor-mediated endocytosis of virus by host cell / host cell endoplasmic reticulum membrane / fusion of virus membrane with host endosome membrane / viral envelope / virion attachment to host cell / host cell plasma membrane / virion membrane / membrane / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
Arenavirus glycoprotein, zinc binding domain / Arenavirus glycoprotein / Arenavirus glycoprotein
類似検索 - ドメイン・相同性
Pre-glycoprotein polyprotein GP complex
類似検索 - 構成要素
生物種Lassa virus Josiah (ウイルス) / Camelus bactrianus (フタコブラクダ) / Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.7 Å
データ登録者Gorman J / Kwong PD
資金援助 米国, 2件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)GM103310 米国
Simons FoundationSF349247 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024
タイトル: Cleavage-intermediate Lassa virus trimer elicits neutralizing responses, identifies neutralizing nanobodies, and reveals an apex-situated site-of-vulnerability.
著者: Jason Gorman / Crystal Sao-Fong Cheung / Zhijian Duan / Li Ou / Maple Wang / Xuejun Chen / Cheng Cheng / Andrea Biju / Yaping Sun / Pengfei Wang / Yongping Yang / Baoshan Zhang / Jeffrey C ...著者: Jason Gorman / Crystal Sao-Fong Cheung / Zhijian Duan / Li Ou / Maple Wang / Xuejun Chen / Cheng Cheng / Andrea Biju / Yaping Sun / Pengfei Wang / Yongping Yang / Baoshan Zhang / Jeffrey C Boyington / Tatsiana Bylund / Sam Charaf / Steven J Chen / Haijuan Du / Amy R Henry / Tracy Liu / Edward K Sarfo / Chaim A Schramm / Chen-Hsiang Shen / Tyler Stephens / I-Ting Teng / John-Paul Todd / Yaroslav Tsybovsky / Raffaello Verardi / Danyi Wang / Shuishu Wang / Zhantong Wang / Cheng-Yan Zheng / Tongqing Zhou / Daniel C Douek / John R Mascola / David D Ho / Mitchell Ho / Peter D Kwong /
要旨: Lassa virus (LASV) infection is expanding outside its traditionally endemic areas in West Africa, posing a pandemic biothreat. LASV-neutralizing antibodies, moreover, have proven difficult to elicit. ...Lassa virus (LASV) infection is expanding outside its traditionally endemic areas in West Africa, posing a pandemic biothreat. LASV-neutralizing antibodies, moreover, have proven difficult to elicit. To gain insight into LASV neutralization, here we develop a prefusion-stabilized LASV glycoprotein trimer (GPC), pan it against phage libraries comprising single-domain antibodies (nanobodies) from shark and camel, and identify one, D5, which neutralizes LASV. Cryo-EM analyses reveal D5 to recognize a cleavage-dependent site-of-vulnerability at the trimer apex. The recognized site appears specific to GPC intermediates, with protomers lacking full cleavage between GP1 and GP2 subunits. Guinea pig immunizations with the prefusion-stabilized cleavage-intermediate LASV GPC, first as trimer and then as a nanoparticle, induce neutralizing responses, targeting multiple epitopes including that of D5; we identify a neutralizing antibody (GP23) from the immunized guinea pigs. Collectively, our findings define a prefusion-stabilized GPC trimer, reveal an apex-situated site-of-vulnerability, and demonstrate elicitation of LASV-neutralizing responses by a cleavage-intermediate LASV trimer.
履歴
登録2023年6月13日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年1月3日-
マップ公開2024年1月3日-
更新2024年1月24日-
現状2024年1月24日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_41048.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_41048.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Sharpened map
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.076 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.2
最小 - 最大-1.4000221 - 2.5470073
平均 (標準偏差)0.0048126886 (±0.06640298)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ300300300
Spacing300300300
セルA=B=C: 322.8 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_41048_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
追加マップ: unsharpened map

ファイルemd_41048_additional_1.map
注釈unsharpened map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: density modified (resolve)

ファイルemd_41048_additional_2.map
注釈density modified (resolve)
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: half map B

ファイルemd_41048_half_map_1.map
注釈half map B
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: half map A

ファイルemd_41048_half_map_2.map
注釈half map A
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Lassa GPC Trimer in complex with Fab 8.11G and nanobody D5

全体名称: Lassa GPC Trimer in complex with Fab 8.11G and nanobody D5
要素
  • 複合体: Lassa GPC Trimer in complex with Fab 8.11G and nanobody D5
    • タンパク質・ペプチド: Glycoprotein G1
    • タンパク質・ペプチド: Glycoprotein G2
    • タンパク質・ペプチド: D5 nanobody
    • タンパク質・ペプチド: 8.11G Heavy Chain
    • タンパク質・ペプチド: 8.11G Light Chain
  • リガンド: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose

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超分子 #1: Lassa GPC Trimer in complex with Fab 8.11G and nanobody D5

超分子名称: Lassa GPC Trimer in complex with Fab 8.11G and nanobody D5
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#5
由来(天然)生物種: Lassa virus Josiah (ウイルス)

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分子 #1: Glycoprotein G1

分子名称: Glycoprotein G1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Lassa virus Josiah (ウイルス)
分子量理論値: 22.884879 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: TSLYKGVYEL QTLELNMETL NMTMPLSCTK NNSHHYIMVG NETGLELTLT NTSIINHKFC NLSDAHKKNL YDHALMSIIS TFHLSIPNF NQYEAMSCDF NGGKISVQYN LSHSYAGDAA NHCGTVANGV LQTFMRMAWG GSYIALDSGG CGNWDCIMTS Y QYLIIQNT ...文字列:
TSLYKGVYEL QTLELNMETL NMTMPLSCTK NNSHHYIMVG NETGLELTLT NTSIINHKFC NLSDAHKKNL YDHALMSIIS TFHLSIPNF NQYEAMSCDF NGGKISVQYN LSHSYAGDAA NHCGTVANGV LQTFMRMAWG GSYIALDSGG CGNWDCIMTS Y QYLIIQNT TWEDHCQFSR PSPIGYLGLL SQRTRDIYIS RRRR

UniProtKB: Pre-glycoprotein polyprotein GP complex

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分子 #2: Glycoprotein G2

分子名称: Glycoprotein G2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Lassa virus Josiah (ウイルス)
分子量理論値: 22.14317 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: GTFTWTLSDS EGKDTPGGYC LTRWMLIEAE LKCFGNTAVA KCNEKHDEEF CDMLRLFDFN KQAIQRCKAP AQMSIQLINK AVNALINDQ LIMKNHLRDI MGIPYCNYSK YWYLNHTTTG RTSLPKCWLV SNGSYLNETH FSDDIEQQAD NMITEMLQKE G GGYIPEAP ...文字列:
GTFTWTLSDS EGKDTPGGYC LTRWMLIEAE LKCFGNTAVA KCNEKHDEEF CDMLRLFDFN KQAIQRCKAP AQMSIQLINK AVNALINDQ LIMKNHLRDI MGIPYCNYSK YWYLNHTTTG RTSLPKCWLV SNGSYLNETH FSDDIEQQAD NMITEMLQKE G GGYIPEAP RDGQAYVRKD GEWVLLSTFL GGLVPR

UniProtKB: Pre-glycoprotein polyprotein GP complex

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分子 #3: D5 nanobody

分子名称: D5 nanobody / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Camelus bactrianus (フタコブラクダ)
分子量理論値: 13.228544 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列:
AWQLVESGGG SVQPGGSLTL TCQASKSTFS TSGMRWERQA QGKGVEFVAD ISSDSTRKWY SDSVKGRFTI SRSNWWRTVT LQMNDLKPE DTARYYCKDL ESHHLRGQGT QVTVSSSGQA G

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分子 #4: 8.11G Heavy Chain

分子名称: 8.11G Heavy Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 13.257604 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列:
DQVQLQESGP GLVKPSETLS LTCSISGVST RNYYWSWIRQ SPGKGLEWIG YIFNIGTTNY NPSLKSRLTI SVDTSKNQFS LKITSVTAA DTAVYYCASG FEYGDYTFDY WGQGTPVTVS S

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分子 #5: 8.11G Light Chain

分子名称: 8.11G Light Chain / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 12.101508 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列:
DEIVLTQSPA TLSVSPGGRA SLSCRASQSI GDKLSWYQQK PGQAPRLVIY GAYTRATDIS PRFSGSRSGT DFNLTISRMQ SGDFAVYFC QQYENWPRTF GQGTKLEIKR

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分子 #14: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose

分子名称: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / タイプ: ligand / ID: 14 / コピー数: 23 / 式: NAG
分子量理論値: 221.208 Da
Chemical component information

ChemComp-NAG:
2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose / N-アセチル-β-D-グルコサミン

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度2 mg/mL
緩衝液pH: 7.4 / 詳細: PBS
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 293 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 検出モード: COUNTING / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 2.0 sec. / 平均電子線量: 51.15 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.5 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.0 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

初期モデルモデルのタイプ: NONE
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 3) / 使用した粒子像数: 109878
初期 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
最終 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
最終 3次元分類ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 3)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

5vk2


Chain - Source name: PDB / Chain - Initial model type: experimental model
精密化空間: REAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT
得られたモデル

PDB-8t5c:
Lassa GPC Trimer in complex with Fab 8.11G and nanobody D5

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlc1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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