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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-4099 | |||||||||
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タイトル | Yeast activated spliceosomal B complex | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 maintenance of RNA location / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / RES complex / cellular bud site selection / snoRNA splicing / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / splicing factor binding / U4/U6 snRNP ...maintenance of RNA location / U2-type post-mRNA release spliceosomal complex / RES complex / cellular bud site selection / snoRNA splicing / post-mRNA release spliceosomal complex / generation of catalytic spliceosome for first transesterification step / cis assembly of pre-catalytic spliceosome / splicing factor binding / U4/U6 snRNP / spliceosome conformational change to release U4 (or U4atac) and U1 (or U11) / 7-methylguanosine cap hypermethylation / Prp19 complex / pICln-Sm protein complex / ATP-dependent activity, acting on RNA / snRNP binding / U2-type catalytic step 1 spliceosome / small nuclear ribonucleoprotein complex / pre-mRNA binding / SMN-Sm protein complex / spliceosomal tri-snRNP complex / U2-type spliceosomal complex / mRNA cis splicing, via spliceosome / poly(U) RNA binding / commitment complex / U2-type prespliceosome assembly / U2-type catalytic step 2 spliceosome / U4 snRNP / U2 snRNP / U1 snRNP / U2-type prespliceosome / precatalytic spliceosome / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / generation of catalytic spliceosome for second transesterification step / spliceosomal complex assembly / DNA replication origin binding / mRNA 5'-splice site recognition / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / mRNA 3'-splice site recognition / Dual incision in TC-NER / spliceosomal tri-snRNP complex assembly / DNA replication initiation / U5 snRNA binding / U5 snRNP / mRNA export from nucleus / U2 snRNA binding / U6 snRNA binding / spliceosomal snRNP assembly / positive regulation of cell cycle / pre-mRNA intronic binding / U1 snRNA binding / U4/U6 x U5 tri-snRNP complex / catalytic step 2 spliceosome / positive regulation of RNA splicing / helicase activity / spliceosomal complex / mRNA splicing, via spliceosome / metallopeptidase activity / nucleic acid binding / RNA helicase activity / RNA helicase / response to xenobiotic stimulus / GTPase activity / mRNA binding / chromatin binding / chromatin / GTP binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / RNA binding / ATP binding / identical protein binding / nucleus / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 5.8 Å | |||||||||
データ登録者 | Stark H / Kastner B / Luehrmann R | |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2016 タイトル: Molecular architecture of the Saccharomyces cerevisiae activated spliceosome. 著者: Reinhard Rauhut / Patrizia Fabrizio / Olexandr Dybkov / Klaus Hartmuth / Vladimir Pena / Ashwin Chari / Vinay Kumar / Chung-Tien Lee / Henning Urlaub / Berthold Kastner / Holger Stark / Reinhard Lührmann / 要旨: The activated spliceosome (B) is in a catalytically inactive state and is remodeled into a catalytically active machine by the RNA helicase Prp2, but the mechanism is unclear. Here, we describe a 3D ...The activated spliceosome (B) is in a catalytically inactive state and is remodeled into a catalytically active machine by the RNA helicase Prp2, but the mechanism is unclear. Here, we describe a 3D electron cryomicroscopy structure of the Saccharomyces cerevisiae B complex at 5.8-angstrom resolution. Our model reveals that in B, the catalytic U2/U6 RNA-Prp8 ribonucleoprotein core is already established, and the 5' splice site (ss) is oriented for step 1 catalysis but occluded by protein. The first-step nucleophile-the branchsite adenosine-is sequestered within the Hsh155 HEAT domain and is held 50 angstroms away from the 5'ss. Our structure suggests that Prp2 adenosine triphosphatase-mediated remodeling leads to conformational changes in Hsh155's HEAT domain that liberate the first-step reactants for catalysis. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_4099.map.gz | 59.6 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-4099-v30.xml emd-4099.xml | 15.3 KB 15.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_4099.png | 138.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4099 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4099 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_4099_validation.pdf.gz | 280.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_4099_full_validation.pdf.gz | 279.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_4099_validation.xml.gz | 5.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4099 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4099 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_4099.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : yeast activated spliceosome (BACT)
全体 | 名称: yeast activated spliceosome (BACT) |
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要素 |
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-超分子 #1: yeast activated spliceosome (BACT)
超分子 | 名称: yeast activated spliceosome (BACT) / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#31 |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 株: prp2-1 |
分子量 | 理論値: 3.8 MDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.05 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 7.3 構成要素:
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グリッド | モデル: Quantifoil R3.5/1 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: CONTINUOUS | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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特殊光学系 | 球面収差補正装置: Cs corrector with two hexapoles |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 検出モード: INTEGRATING / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 1.0 sec. / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 倍率(補正後): 74000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.001 mm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
CTF補正 | ソフトウェア - 名称: CTFFIND (ver. 3) |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 5.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3) / 使用した粒子像数: 122000 |
初期 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING |
最終 角度割当 | タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3) |