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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-38934 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of E.coli spermidine transporter PotABC with spermidine | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | ABC transporter / TRANSPORT PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 ABC-type polyamine transporter / ABC-type putrescine transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / transmembrane transport / ATP hydrolysis activity / ATP binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Qiao Z / Gao YG | |||||||||
資金援助 | シンガポール, 1件
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引用 | ジャーナル: Sci Adv / 年: 2024 タイトル: Structural insights into polyamine spermidine uptake by the ABC transporter PotD-PotABC. 著者: Zhu Qiao / Phong Hoa Do / Joshua Yi Yeo / Rya Ero / Zhuowen Li / Liying Zhan / Sandip Basak / Yong-Gui Gao / 要旨: Polyamines, characterized by their polycationic nature, are ubiquitously present in all organisms and play numerous cellular functions. Among polyamines, spermidine stands out as the predominant type ...Polyamines, characterized by their polycationic nature, are ubiquitously present in all organisms and play numerous cellular functions. Among polyamines, spermidine stands out as the predominant type in both prokaryotic and eukaryotic cells. The PotD-PotABC protein complex in , belonging to the adenosine triphosphate-binding cassette transporter family, is a spermidine-preferential uptake system. Here, we report structural details of the polyamine uptake system PotD-PotABC in various states. Our analyses reveal distinct "inward-facing" and "outward-facing" conformations of the PotD-PotABC transporter, as well as conformational changes in the "gating" residues (F222, Y223, D226, and K241 in PotB; Y219 and K223 in PotC) controlling spermidine uptake. Therefore, our structural analysis provides insights into how the PotD-PotABC importer recognizes the substrate-binding protein PotD and elucidates molecular insights into the spermidine uptake mechanism of bacteria. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_38934.map.gz | 57 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-38934-v30.xml emd-38934.xml | 18 KB 18 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_38934.png | 87.5 KB | ||
Filedesc metadata | emd-38934.cif.gz | 8 KB | ||
その他 | emd_38934_half_map_1.map.gz emd_38934_half_map_2.map.gz | 59.5 MB 59.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-38934 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-38934 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_38934_validation.pdf.gz | 901.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_38934_full_validation.pdf.gz | 901.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_38934_validation.xml.gz | 12.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_38934_validation.cif.gz | 14.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-38934 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-38934 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_38934.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 64 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.76 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_38934_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_38934_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : ABC transporter
全体 | 名称: ABC transporter |
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要素 |
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-超分子 #1: ABC transporter
超分子 | 名称: ABC transporter / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#3 |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 147.3 kDa/nm |
-分子 #1: Spermidine/putrescine import ATP-binding protein PotA
分子 | 名称: Spermidine/putrescine import ATP-binding protein PotA タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ABC-type polyamine transporter |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 41.022773 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: SPLVQLAGIR KCFDGKEVIP QLDLTINNGE FLTLLGPSGC GKTTVLRLIA GLETVDSGRI MLDNEDITHV PAENRYVNTV FQSYALFPH MTVFENVAFG LRMQKTPAAE ITPRVMEALR MVQLETFAQR KPHQLSGGQQ QRVAIARAVV NKPRLLLLDQ S LSALDYKL ...文字列: SPLVQLAGIR KCFDGKEVIP QLDLTINNGE FLTLLGPSGC GKTTVLRLIA GLETVDSGRI MLDNEDITHV PAENRYVNTV FQSYALFPH MTVFENVAFG LRMQKTPAAE ITPRVMEALR MVQLETFAQR KPHQLSGGQQ QRVAIARAVV NKPRLLLLDQ S LSALDYKL RKQMQNELKA LQRKLGITFV FVTHDQEEAL TMSDRIVVMR DGRIEQDGTP REIYEEPKNL FVAGFIGEIN MF NATVIER LDEQRVRANV EGRECNIYVN FAVEPGQKLH VLLRPEDLRV EEINDDNHAE GLIGYVRERN YKGMTLESVV ELE NGKMVM VSEFFNEDDP DFDHSLDQKM AINWVESWEV VLAD UniProtKB: Spermidine/putrescine import ATP-binding protein PotA |
-分子 #2: Spermidine/putrescine ABC transporter permease PotB
分子 | 名称: Spermidine/putrescine ABC transporter permease PotB / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 30.813455 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: FQNVVIVTIV GWLVLFVFLP NLMIIGTSFL TRDDASFVKM VFTLDNYTRL LDPLYFEVLL HSLNMALIAT LACLVLGYPF AWFLAKLPH KVRPLLLFLL IVPFWTNSLI RIYGLKIFLS TKGYLNEFLL WLGVIDTPIR IMFTPSAVII GLVYILLPFM V MPLYSSIE ...文字列: FQNVVIVTIV GWLVLFVFLP NLMIIGTSFL TRDDASFVKM VFTLDNYTRL LDPLYFEVLL HSLNMALIAT LACLVLGYPF AWFLAKLPH KVRPLLLFLL IVPFWTNSLI RIYGLKIFLS TKGYLNEFLL WLGVIDTPIR IMFTPSAVII GLVYILLPFM V MPLYSSIE KLDKPLLEAA RDLGASKLQT FIRIIIPLTM PGIIAGCLLV MLPAMGLFYV SDLMGGAKNL LIGNVIKVQF LN IRDWPFG AATSITLTIV MGLMLLVYWR ASRLLN UniProtKB: Spermidine/putrescine ABC transporter permease PotB |
-分子 #3: Spermidine/putrescine transport system permease protein PotC
分子 | 名称: Spermidine/putrescine transport system permease protein PotC タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 27.526998 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: LLRGGFMTAI YAYLYIPIII LIVNSFNSSR FGINWQGFTT KWYSLLMNND SLLQAAQHSL TMAVFSATFA TLIGSLTAVA LYRYRFRGK PFVSGMLFVV MMSPDIVMAI SLLVLFMLLG IQLGFWSLLF SHITFCLPFV VVTVYSRLKG FDVRMLEAAK D LGASEFTI ...文字列: LLRGGFMTAI YAYLYIPIII LIVNSFNSSR FGINWQGFTT KWYSLLMNND SLLQAAQHSL TMAVFSATFA TLIGSLTAVA LYRYRFRGK PFVSGMLFVV MMSPDIVMAI SLLVLFMLLG IQLGFWSLLF SHITFCLPFV VVTVYSRLKG FDVRMLEAAK D LGASEFTI LRKIILPLAM PAVAAGWVLS FTLSMDDVVV SSFVTGPSYE ILPLKIYSMV KVGVSPEVNA LATILLVLSL VM VIASQLI AR UniProtKB: Spermidine/putrescine transport system permease protein PotC |
-分子 #4: Spermidine/putrescine import ATP-binding protein PotA
分子 | 名称: Spermidine/putrescine import ATP-binding protein PotA タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ABC-type polyamine transporter |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 40.820609 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: PLVQLAGIRK CFDGKEVIPQ LDLTINNGEF LTLLGPSGCG KTTVLRLIAG LETVDSGRIM LDNEDITHVP AENRYVNTVF QSYALFPHM TVFENVAFGL RMQKTPAAEI TPRVMEALRM VQLETFAQRK PHQLSGGQQQ RVAIARAVVN KPRLLLLDQS L SALDYKLR ...文字列: PLVQLAGIRK CFDGKEVIPQ LDLTINNGEF LTLLGPSGCG KTTVLRLIAG LETVDSGRIM LDNEDITHVP AENRYVNTVF QSYALFPHM TVFENVAFGL RMQKTPAAEI TPRVMEALRM VQLETFAQRK PHQLSGGQQQ RVAIARAVVN KPRLLLLDQS L SALDYKLR KQMQNELKAL QRKLGITFVF VTHDQEEALT MSDRIVVMRD GRIEQDGTPR EIYEEPKNLF VAGFIGEINM FN ATVIERL DEQRVRANVE GRECNIYVNF AVEPGQKLHV LLRPEDLRVE EINDDNHAEG LIGYVRERNY KGMTLESVVE LEN GKMVMV SEFFNEDDPD FDHSLDQKMA INWVESWEVV LA UniProtKB: Spermidine/putrescine import ATP-binding protein PotA |
-分子 #5: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 4 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-分子 #6: SPERMIDINE
分子 | 名称: SPERMIDINE / タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 1 / 式: SPD |
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分子量 | 理論値: 145.246 Da |
Chemical component information | ChemComp-SPD: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 10 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.5 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.5 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
初期モデル | モデルのタイプ: NONE |
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最終 再構成 | 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 98494 |
初期 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |
最終 角度割当 | タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD |