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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3767 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of a pre-catalytic human spliceosome primed for activation (B complex), 5.4A Map | |||||||||
マップデータ | sharpened, masked map | |||||||||
試料 |
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生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.5 Å | |||||||||
データ登録者 | Bertram K | |||||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2017 タイトル: Cryo-EM Structure of a Pre-catalytic Human Spliceosome Primed for Activation. 著者: Karl Bertram / Dmitry E Agafonov / Olexandr Dybkov / David Haselbach / Majety N Leelaram / Cindy L Will / Henning Urlaub / Berthold Kastner / Reinhard Lührmann / Holger Stark / 要旨: Little is known about the spliceosome's structure before its extensive remodeling into a catalytically active complex. Here, we report a 3D cryo-EM structure of a pre-catalytic human spliceosomal B ...Little is known about the spliceosome's structure before its extensive remodeling into a catalytically active complex. Here, we report a 3D cryo-EM structure of a pre-catalytic human spliceosomal B complex. The U2 snRNP-containing head domain is connected to the B complex main body via three main bridges. U4/U6.U5 tri-snRNP proteins, which are located in the main body, undergo significant rearrangements during tri-snRNP integration into the B complex. These include formation of a partially closed Prp8 conformation that creates, together with Dim1, a 5' splice site (ss) binding pocket, displacement of Sad1, and rearrangement of Brr2 such that it contacts its U4/U6 substrate and is poised for the subsequent spliceosome activation step. The molecular organization of several B-specific proteins suggests that they are involved in negatively regulating Brr2, positioning the U6/5'ss helix, and stabilizing the B complex structure. Our results indicate significant differences between the early activation phase of human and yeast spliceosomes. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_3767.map.gz | 284.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-3767-v30.xml emd-3767.xml | 21 KB 21 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_3767.png | 34.4 KB | ||
その他 | emd_3767_additional.map.gz emd_3767_half_map_1.map.gz emd_3767_half_map_2.map.gz | 244.7 MB 246.1 MB 245.9 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3767 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3767 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_3767_validation.pdf.gz | 386.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_3767_full_validation.pdf.gz | 385.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_3767_validation.xml.gz | 13.9 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3767 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-3767 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3767.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 307.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | sharpened, masked map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.16 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-追加マップ: non-sharpened, masked map
ファイル | emd_3767_additional.map | ||||||||||||
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注釈 | non-sharpened, masked map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half-map 1
ファイル | emd_3767_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half-map 1 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half-map 2
ファイル | emd_3767_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half-map 2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Human B Complex Spliceosome, sharpened map, masked refinement
全体 | 名称: Human B Complex Spliceosome, sharpened map, masked refinement |
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要素 |
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-超分子 #1: Human B Complex Spliceosome, sharpened map, masked refinement
超分子 | 名称: Human B Complex Spliceosome, sharpened map, masked refinement タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#43 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.9 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 80 % / チャンバー内温度: 277 K |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / デジタル化 - サンプリング間隔: 14.0 µm / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 2-17 / 平均露光時間: 0.05 sec. / 平均電子線量: 1.5 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL |
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