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- EMDB-3733: Minor class in a preparation of mitochondrial complex I set in th... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-3733
タイトルMinor class in a preparation of mitochondrial complex I set in the deactive state
マップデータA minor class found in a preparation of mitochondrial complex I set in the deactive state.
試料
  • 複合体: Minor class found in a preparation of mitochondrial complex I set in the deactive state
生物種Bos taurus (ウシ)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 7.5 Å
データ登録者Blaza JN / Vinothkumar KR / Hirst J
引用ジャーナル: Structure / : 2018
タイトル: Structure of the Deactive State of Mammalian Respiratory Complex I.
著者: James N Blaza / Kutti R Vinothkumar / Judy Hirst /
要旨: Complex I (NADH:ubiquinone oxidoreductase) is central to energy metabolism in mammalian mitochondria. It couples NADH oxidation by ubiquinone to proton transport across the energy-conserving inner ...Complex I (NADH:ubiquinone oxidoreductase) is central to energy metabolism in mammalian mitochondria. It couples NADH oxidation by ubiquinone to proton transport across the energy-conserving inner membrane, catalyzing respiration and driving ATP synthesis. In the absence of substrates, active complex I gradually enters a pronounced resting or deactive state. The active-deactive transition occurs during ischemia and is crucial for controlling how respiration recovers upon reperfusion. Here, we set a highly active preparation of Bos taurus complex I into the biochemically defined deactive state, and used single-particle electron cryomicroscopy to determine its structure to 4.1 Å resolution. We show that the deactive state arises when critical structural elements that form the ubiquinone-binding site become disordered, and we propose reactivation is induced when substrate binding to the NADH-reduced enzyme templates their reordering. Our structure both rationalizes biochemical data on the deactive state and offers new insights into its physiological and cellular roles.
履歴
登録2017年5月23日-
ヘッダ(付随情報) 公開2017年5月31日-
マップ公開2018年1月17日-
更新2018年3月21日-
現状2018年3月21日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図(断面を密度値に従い着色)
  • 表面レベル: 0.12
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図(高さに従い着色)
  • 表面レベル: 0.12
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_3733.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈A minor class found in a preparation of mitochondrial complex I set in the deactive state.
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.38 Å/pix.
x 360 pix.
= 496.8 Å
1.38 Å/pix.
x 360 pix.
= 496.8 Å
1.38 Å/pix.
x 360 pix.
= 496.8 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.38 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.12 / ムービー #1: 0.12
最小 - 最大-0.12779298 - 0.5350517
平均 (標準偏差)0.0004159258 (±0.016465593)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ360360360
Spacing360360360
セルA=B=C: 496.8 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.381.381.38
M x/y/z360360360
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z496.800496.800496.800
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS360360360
D min/max/mean-0.1280.5350.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Minor class found in a preparation of mitochondrial complex I set...

全体名称: Minor class found in a preparation of mitochondrial complex I set in the deactive state
要素
  • 複合体: Minor class found in a preparation of mitochondrial complex I set in the deactive state

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超分子 #1: Minor class found in a preparation of mitochondrial complex I set...

超分子名称: Minor class found in a preparation of mitochondrial complex I set in the deactive state
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#44
由来(天然)生物種: Bos taurus (ウシ)
分子量実験値: 1.0 MDa

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度4 mg/mL
緩衝液pH: 7.55
構成要素:
濃度名称
20.0 mMTris-Cl
150.0 mMNaCl
0.04 %Cymal-7
グリッドモデル: Quantifoil UltrAuFoil R0.6/1 / 材質: GOLD / 詳細: The grid was PEGylated before use
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細Monodisperse bovine mitochondrial complex I isolated in the detergent cymal-7

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k)
検出モード: INTEGRATING / デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / デジタル化 - サンプリング間隔: 14.0 µm / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-20 / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2954 / 平均露光時間: 2.5 sec. / 平均電子線量: 80.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 倍率(補正後): 101499 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.1 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.3 µm / 倍率(公称値): 59000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

詳細Images were normalised in Relion
粒子像選択選択した数: 148488
CTF補正ソフトウェア - 名称: RELION / 詳細: CTF parameters were applied internally in Relion
初期モデルモデルのタイプ: EMDB MAP
EMDB ID:

詳細: Filtred to 60 A
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 7.5 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) / 使用した粒子像数: 12048
初期 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
最終 角度割当タイプ: PROJECTION MATCHING / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4)
詳細: Relion uses projection matching in a ML statistical framework
最終 3次元分類クラス数: 3 / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 1.4) / 詳細: Running with 6 classes gave very similar results.
FSC曲線 (解像度の算出)

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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