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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-35575 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of GPI-T with a chimeric GPI-anchored protein | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | cryo-EM / glycosylphosphatidylinositol / GPI / GPI anchored protein / GPI-AP / membrane protein complex / MEMBRANE PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 GPI-anchor transamidase activity / attachment of GPI anchor to protein / GPI-anchor transamidase complex / GPI anchor biosynthetic process / protein retention in ER lumen / Attachment of GPI anchor to uPAR / natural killer cell lectin-like receptor binding / Post-translational modification: synthesis of GPI-anchored proteins / 加水分解酵素 / natural killer cell activation ...GPI-anchor transamidase activity / attachment of GPI anchor to protein / GPI-anchor transamidase complex / GPI anchor biosynthetic process / protein retention in ER lumen / Attachment of GPI anchor to uPAR / natural killer cell lectin-like receptor binding / Post-translational modification: synthesis of GPI-anchored proteins / 加水分解酵素 / natural killer cell activation / regulation of receptor signaling pathway via JAK-STAT / natural killer cell mediated cytotoxicity / protein disulfide isomerase activity / tubulin binding / bioluminescence / antigen processing and presentation of endogenous peptide antigen via MHC class Ib / antigen processing and presentation of endogenous peptide antigen via MHC class I via ER pathway, TAP-independent / generation of precursor metabolites and energy / neuron differentiation / positive regulation of T cell mediated cytotoxicity / cytoplasmic vesicle / protein-containing complex assembly / neuron apoptotic process / receptor ligand activity / immune response / external side of plasma membrane / intracellular membrane-bounded organelle / centrosome / endoplasmic reticulum membrane / cell surface / endoplasmic reticulum / mitochondrion / proteolysis / extracellular space / extracellular region / membrane / plasma membrane / cytosol 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) / Clavularia sp. (無脊椎動物) / synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.85 Å | |||||||||
データ登録者 | Xu Y / Li T / Qu Q / Li D | |||||||||
資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: Structures of liganded glycosylphosphatidylinositol transamidase illuminate GPI-AP biogenesis. 著者: Yidan Xu / Tingting Li / Zixuan Zhou / Jingjing Hong / Yulin Chao / Zhini Zhu / Ying Zhang / Qianhui Qu / Dianfan Li / 要旨: Many eukaryotic receptors and enzymes rely on glycosylphosphatidylinositol (GPI) anchors for membrane localization and function. The transmembrane complex GPI-T recognizes diverse proproteins at a ...Many eukaryotic receptors and enzymes rely on glycosylphosphatidylinositol (GPI) anchors for membrane localization and function. The transmembrane complex GPI-T recognizes diverse proproteins at a signal peptide region that lacks consensus sequence and replaces it with GPI via a transamidation reaction. How GPI-T maintains broad specificity while preventing unintentional cleavage is unclear. Here, substrates- and products-bound human GPI-T structures identify subsite features that enable broad proprotein specificity, inform catalytic mechanism, and reveal a multilevel safeguard mechanism against its promiscuity. In the absence of proproteins, the catalytic site is invaded by a locally stabilized loop. Activation requires energetically unfavorable rearrangements that transform the autoinhibitory loop into crucial catalytic cleft elements. Enzyme-proprotein binding in the transmembrane and luminal domains respectively powers the conformational rearrangement and induces a competent cleft. GPI-T thus integrates various weak specificity regions to form strong selectivity and prevent accidental activation. These findings provide important mechanistic insights into GPI-anchored protein biogenesis. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_35575.map.gz | 79.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-35575-v30.xml emd-35575.xml | 34.3 KB 34.3 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_35575_fsc.xml | 9.2 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_35575.png | 102.9 KB | ||
Filedesc metadata | emd-35575.cif.gz | 9.7 KB | ||
その他 | emd_35575_additional_1.map.gz emd_35575_half_map_1.map.gz emd_35575_half_map_2.map.gz | 42.2 MB 77.7 MB 77.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-35575 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-35575 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_35575_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_35575_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | emd_35575_validation.xml.gz | 17.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_35575_validation.cif.gz | 22.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-35575 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-35575 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_35575.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.932 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: #1
ファイル | emd_35575_additional_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_35575_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_35575_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : Complex of GPI-T with a chimeric GPI-anchored protein
+超分子 #1: Complex of GPI-T with a chimeric GPI-anchored protein
+分子 #1: UL16-binding protein 2,GFP-like fluorescent chromoprotein cFP484
+分子 #2: Glycosylphosphatidylinositol anchor attachment 1 protein,GFP-like...
+分子 #3: GPI-anchor transamidase,GFP-like fluorescent chromoprotein cFP484
+分子 #4: GPI transamidase component PIG-S,GFP-like fluorescent chromoprote...
+分子 #5: GPI transamidase component PIG-T,GFP-like fluorescent chromoprote...
+分子 #6: Phosphatidylinositol glycan anchor biosynthesis class U protein,G...
+分子 #7: Met-Ser-Ser peptide
+分子 #9: CHOLESTEROL HEMISUCCINATE
+分子 #10: MAGNESIUM ION
+分子 #11: [(2~{R})-1-[2-azanylethoxy(oxidanyl)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyl...
+分子 #12: Digitonin
+分子 #13: CALCIUM ION
+分子 #14: 2-acetamido-2-deoxy-beta-D-glucopyranose
+分子 #15: 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine
+分子 #16: [(2R)-1-hexadecanoyloxy-3-[[3-[[(2R)-3-hexadecanoyloxy-2-[(Z)-oct...
+分子 #17: 2-azanylethyl [(2R,3S,4S,5S,6S)-3,4,5,6-tetrakis(oxidanyl)oxan-2-...
+分子 #18: 2-amino-2-deoxy-alpha-D-glucopyranose
+分子 #19: 2-azanylethyl [(2~{S},3~{S},4~{S},5~{S},6~{R})-6-(hydroxymethyl)-...
+分子 #20: [(2R)-1-[[(1S,2R,3R,4S,5S,6R)-2-hexadecanoyloxy-3,4,5,6-tetrakis(...
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 8 mg/mL | ||||||||||||
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緩衝液 | pH: 8 構成要素:
詳細: 0.1 % Digitonin, 150 mM NaCl, 50 mM Tris-HCl, pH 8.0 | ||||||||||||
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 35 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.026000000000000002 kPa | ||||||||||||
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |