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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-34849 | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of E. coli RNAP sigma32 complex | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | transcription / RNA polymerase / sigma factor / heat shock response / TRANSCRIPTION-DNA complex | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 site-specific recombinase activity / invertasome / DNA-binding transcription activator activity / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly ...site-specific recombinase activity / invertasome / DNA-binding transcription activator activity / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / sigma factor activity / bacterial-type flagellum assembly / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / nitrate assimilation / core promoter sequence-specific DNA binding / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / DNA-templated transcription initiation / transcription antitermination / cell motility / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / response to heat / regulation of gene expression / intracellular iron ion homeostasis / DNA recombination / protein dimerization activity / response to antibiotic / DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / membrane / plasma membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) / Escherichia coli (大腸菌) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.49 Å | |||||||||
データ登録者 | Wu S / Ma LX | |||||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: Biomolecules / 年: 2023 タイトル: Structural Insight into the Mechanism of σ32-Mediated Transcription Initiation of Bacterial RNA Polymerase. 著者: Qiang Lu / Taiyu Chen / Jiening Wang / Feng Wang / Wenlong Ye / Lixin Ma / Shan Wu / 要旨: Bacterial RNA polymerases (RNAP) form distinct holoenzymes with different σ factors to initiate diverse gene expression programs. In this study, we report a cryo-EM structure at 2.49 Å of RNA ...Bacterial RNA polymerases (RNAP) form distinct holoenzymes with different σ factors to initiate diverse gene expression programs. In this study, we report a cryo-EM structure at 2.49 Å of RNA polymerase transcription complex containing a temperature-sensitive bacterial σ factor, σ (σ-RPo). The structure of σ-RPo reveals key interactions essential for the assembly of σ-RNAP holoenzyme and for promoter recognition and unwinding by σ. Specifically, a weak interaction between σ and -35/-10 spacer is mediated by T128 and K130 in σ. A histidine in σ, rather than a tryptophan in σ, acts as a wedge to separate the base pair at the upstream junction of the transcription bubble, highlighting the differential promoter-melting capability of different residue combinations. Structure superimposition revealed relatively different orientations between βFTH and σ from other σ-engaged RNAPs and biochemical data suggest that a biased σ-βFTH configuration may be adopted to modulate binding affinity to promoter so as to orchestrate the recognition and regulation of different promoters. Collectively, these unique structural features advance our understanding of the mechanism of transcription initiation mediated by different σ factors. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_34849.map.gz | 117.1 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-34849-v30.xml emd-34849.xml | 23.8 KB 23.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_34849_fsc.xml | 11.3 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_34849.png | 118.3 KB | ||
Filedesc metadata | emd-34849.cif.gz | 8 KB | ||
その他 | emd_34849_additional_1.map.gz emd_34849_half_map_1.map.gz emd_34849_half_map_2.map.gz | 14.6 MB 98.4 MB 98.4 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-34849 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-34849 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_34849_validation.pdf.gz | 1019.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_34849_full_validation.pdf.gz | 1018.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_34849_validation.xml.gz | 18.6 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_34849_validation.cif.gz | 24.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-34849 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-34849 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8hkcMC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_34849.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.851 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: #1
ファイル | emd_34849_additional_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_34849_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_34849_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : Cryo-EM structure of E. coli RNAP sigma32 complex
全体 | 名称: Cryo-EM structure of E. coli RNAP sigma32 complex |
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要素 |
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-超分子 #1: Cryo-EM structure of E. coli RNAP sigma32 complex
超分子 | 名称: Cryo-EM structure of E. coli RNAP sigma32 complex / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2, #6, #3-#5 |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
-分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 36.801016 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MQGSVTEFLK PRLVDIEQVS STHAKVTLEP LERGFGHTLG NALRRILLSS MPGCAVTEVE IDGVLHEYST KEGVQEDILE ILLNLKGLA VRVQGKDEVI LTLNKSGIGP VTAADITHDG DVEIVKPQHV ICHLTDENAS ISMRIKVQRG RGYVPASTRI H SEEDERPI ...文字列: MQGSVTEFLK PRLVDIEQVS STHAKVTLEP LERGFGHTLG NALRRILLSS MPGCAVTEVE IDGVLHEYST KEGVQEDILE ILLNLKGLA VRVQGKDEVI LTLNKSGIGP VTAADITHDG DVEIVKPQHV ICHLTDENAS ISMRIKVQRG RGYVPASTRI H SEEDERPI GRLLVDACYS PVERIAYNVE AARVEQRTDL DKLVIEMETN GTIDPEEAIR RAATILAEQL EAFVDLRDVR QP EVKEEKP EFDPILLRPV DDLELTVRSA NCLKAEAIHY IGDLVQRTEV ELLKTPNLGK KSLTEIKDVL ASRGLSLGMR LEN WPPASI ADEKL UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha |
-分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 151.341406 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MEFVYSYTEK KRIRKDFGKR PQVLDVPYLL SIQLDSFQKF IEQDPEGQYG LEAAFRSVFP IQSYSGNSEL QYVSYRLGEP VFDVQECQI RGVTYSAPLR VKLRLVIYER EAPEGTVKDI KEQEVYMGEI PLMTDNGTFV INGTERVIVS QLHRSPGVFF D SDKGKTHS ...文字列: MEFVYSYTEK KRIRKDFGKR PQVLDVPYLL SIQLDSFQKF IEQDPEGQYG LEAAFRSVFP IQSYSGNSEL QYVSYRLGEP VFDVQECQI RGVTYSAPLR VKLRLVIYER EAPEGTVKDI KEQEVYMGEI PLMTDNGTFV INGTERVIVS QLHRSPGVFF D SDKGKTHS SGKVLYNARI IPYRGSWLDF EFDPKDNLFV RIDRRRKLPA TIILRALNYT TEQILDLFFE KVIFEIRDNK LQ MELVPER LRGETASFDI EANGKVYVEK GRRITARHIR QLEKDDVKLI EVPVEYIAGK VVAKDYIDES TGELICAANM ELS LDLLAK LSQSGHKRIE TLFTNDLDHG PYISETLRVD PTNDRLSALV EIYRMMRPGE PPTREAAESL FENLFFSEDR YDLS AVGRM KFNRSLLREE IEGSGILSKD DIIDVMKKLI DIRNGKGEVD DIDHLGNRRI RSVGEMAENQ FRVGLVRVER AVKER LSLG DLDTLMPQDM INAKPISAAV KEFFGSSQLS QFMDQNNPLS EITHKRRISA LGPGGLTRER AGFEVRDVHP THYGRV CPI ETPEGPNIGL INSLSVYAQT NEYGFLETPY RKVTDGVVTD EIHYLSAIEE GNYVIAQANS NLDEEGHFVE DLVTCRS KG ESSLFSRDQV DYMDVSTQQV VSVGASLIPF LEHDDANRAL MGANMQRQAV PTLRADKPLV GTGMERAVAV DSGVTAVA K RGGVVQYVDA SRIVIKVNED EMYPGEAGID IYNLTKYTRS NQNTCINQMP CVSLGEPVER GDVLADGPST DLGELALGQ NMRVAFMPWN GYNFEDSILV SERVVQEDRF TTIHIQELAC VSRDTKLGPE EITADIPNVG EAALSKLDES GIVYIGAEVT GGDILVGKV TPKGETQLTP EEKLLRAIFG EKASDVKDSS LRVPNGVSGT VIDVQVFTRD GVEKDKRALE IEEMQLKQAK K DLSEELQI LEAGLFSRIR AVLVAGGVEA EKLDKLPRDR WLELGLTDEE KQNQLEQLAE QYDELKHEFE KKLEAKRRKI TQ GDDLAPG VLKIVKVYLA VKRRIQPGDK MAGRHGNKGV ISKINPIEDM PYDENGTPVD IVLNPLGVPS RMNIGQILET HLG MAAKGI GDKINAMLKQ QQEVAKLREF IQRAYDLGAD VRQKVDLSTF SDEEVMRLAE NLRKGMPIAT PVFDGAKEAE IKEL LKLGD LPTSGQIRLY DGRTGEQFER PVTVGYMYML KLNHLVDDKM HARSTGSYSL VTQQPLGGKA QFGGQRFGEM EVWAL EAYG AAYTLQEMLT VKSDDVNGRT KMYKNIVDGN HQMEPGMPES FNVLLKEIRS LGINIELEDE SR UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit beta |
-分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
分子 | 名称: DNA-directed RNA polymerase subunit beta' / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: DNA-directed RNA polymerase |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 157.613078 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MTSKDLLKFL KAQTKTEEFD AIKIALASPD MIRSWSFGEV KKPETINYRT FKPERDGLFC ARIFGPVKDY ECLCGKYKRL KHRGVICEK CGVEVTQTKV RRERMGHIEL ASPTAHIWFL KSLPSRIGLL LDMPLRDIER VLYFESYVVI EGGMTNLERQ Q ILTEEQYL ...文字列: MTSKDLLKFL KAQTKTEEFD AIKIALASPD MIRSWSFGEV KKPETINYRT FKPERDGLFC ARIFGPVKDY ECLCGKYKRL KHRGVICEK CGVEVTQTKV RRERMGHIEL ASPTAHIWFL KSLPSRIGLL LDMPLRDIER VLYFESYVVI EGGMTNLERQ Q ILTEEQYL DALEEFGDEF DAKMGAEAIQ ALLKSMDLEQ ECEQLREELN ETNSETKRKK LTKRIKLLEA FVQSGNKPEW MI LTVLPVL PPDLRPLVPL DGGRFATSDL NDLYRRVINR NNRLKRLLDL AAPDIIVRNE KRMLQEAVDA LLDNGRRGRA ITG SNKRPL KSLADMIKGK QGRFRQNLLG KRVDYSGRSV ITVGPYLRLH QCGLPKKMAL ELFKPFIYGK LELRGLATTI KAAK KMVER EEAVVWDILD EVIREHPVLL NRAPTLHRLG IQAFEPVLIE GKAIQLHPLV CAAYNADFDG DQMAVHVPLT LEAQL EARA LMMSTNNILS PANGEPIIVP SQDVVLGLYY MTRDCVNAKG EGMVLTGPKE AERLYRSGLA SLHARVKVRI TEYEKD ANG ELVAKTSLKD TTVGRAILWM IVPKGLPYSI VNQALGKKAI SKMLNTCYRI LGLKPTVIFA DQIMYTGFAY AARSGAS VG IDDMVIPEKK HEIISEAEAE VAEIQEQFQS GLVTAGERYN KVIDIWAAAN DRVSKAMMDN LQTETVINRD GQEEKQVS F NSIYMMADSG ARGSAAQIRQ LAGMRGLMAK PDGSIIETPI TANFREGLNV LQYFISTHGA RKGLADTALK TANSGYLTR RLVDVAQDLV VTEDDCGTHE GIMMTPVIEG GDVKEPLRDR VLGRVTAEDV LKPGTADILV PRNTLLHEQW CDLLEENSVD AVKVRSVVS CDTDFGVCAH CYGRDLARGH IINKGEAIGV IAAQSIGEPG TQLTMRTFHI GGAASRAAAE SSIQVKNKGS I KLSNVKSV VNSSGKLVIT SRNTELKLID EFGRTKESYK VPYGAVLAKG DGEQVAGGET VANWDPHTMP VITEVSGFVR FT DMIDGQT ITRQTDELTG LSSLVVLDSA ERTAGGKDLR PALKIVDAQG NDVLIPGTDM PAQYFLPGKA IVQLEDGVQI SSG DTLARI PQESGGTKDI TGGLPRVADL FEARRPKEPA ILAEISGIVS FGKETKGKRR LVITPVDGSD PYEEMIPKWR QLNV FEGER VERGDVISDG PEAPHDILRL RGVHAVTRYI VNEVQDVYRL QGVKINDKHI EVIVRQMLRK ATIVNAGSSD FLEGE QVEY SRVKIANREL EANGKVGATY SRDLLGITKA SLATESFISA ASFQETTRVL TEAAVAGKRD ELRGLKENVI VGRLIP AGT GYAYHQDRMR RRAAGEAPAA PQVTAEDASA SLAELLNAGL GGSDNELEHH HHHHHHHHHH GT UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit beta' |
-分子 #6: RNA polymerase sigma factor RpoH
分子 | 名称: RNA polymerase sigma factor RpoH / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 32.513836 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: MTDKMQSLAL APVGNLDSYI RAANAWPMLS ADEERALAEK LHYHGDLEAA KTLILSHLRF VVHIARNYAG YGLPQADLIQ EGNIGLMKA VRRFNPEVGV RLVSFAVHWI KAEIHEYVLR NWRIVKVATT KAQRKLFFNL RKTKQRLGWF NQDEVEMVAR E LGVTSKDV ...文字列: MTDKMQSLAL APVGNLDSYI RAANAWPMLS ADEERALAEK LHYHGDLEAA KTLILSHLRF VVHIARNYAG YGLPQADLIQ EGNIGLMKA VRRFNPEVGV RLVSFAVHWI KAEIHEYVLR NWRIVKVATT KAQRKLFFNL RKTKQRLGWF NQDEVEMVAR E LGVTSKDV REMESRMAAQ DMTFDLSSDD DSDSQPMAPV LYLQDKSSNF ADGIEDDNWE EQAANRLTDA MQGLDERSQD II RARWLDE DNKSTLQELA DRYGVSAERV RQLEKNAMKK LRAAIEA UniProtKB: RNA polymerase sigma factor RpoH |
-分子 #4: DNA (54-MER)
分子 | 名称: DNA (54-MER) / タイプ: dna / ID: 4 / コピー数: 1 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 16.614637 KDa |
配列 | 文字列: (DC)(DC)(DC)(DC)(DC)(DT)(DT)(DG)(DA)(DA) (DG)(DA)(DC)(DG)(DT)(DG)(DG)(DT)(DT)(DT) (DA)(DC)(DG)(DA)(DC)(DC)(DC)(DC)(DA) (DT)(DT)(DT)(DA)(DG)(DT)(DA)(DG)(DT)(DC) (DA) (DA)(DC)(DC)(DG)(DC) ...文字列: (DC)(DC)(DC)(DC)(DC)(DT)(DT)(DG)(DA)(DA) (DG)(DA)(DC)(DG)(DT)(DG)(DG)(DT)(DT)(DT) (DA)(DC)(DG)(DA)(DC)(DC)(DC)(DC)(DA) (DT)(DT)(DT)(DA)(DG)(DT)(DA)(DG)(DT)(DC) (DA) (DA)(DC)(DC)(DG)(DC)(DA)(DG)(DT) (DG)(DA)(DG)(DT)(DG)(DG) |
-分子 #5: DNA (54-MER)
分子 | 名称: DNA (54-MER) / タイプ: dna / ID: 5 / コピー数: 1 / 分類: DNA |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
分子量 | 理論値: 16.663676 KDa |
配列 | 文字列: (DC)(DC)(DA)(DC)(DT)(DC)(DA)(DC)(DT)(DG) (DC)(DG)(DG)(DT)(DT)(DG)(DA)(DC)(DT)(DA) (DC)(DT)(DA)(DA)(DA)(DT)(DG)(DG)(DG) (DG)(DT)(DC)(DG)(DT)(DA)(DA)(DA)(DC)(DC) (DA) (DC)(DG)(DT)(DC)(DT) ...文字列: (DC)(DC)(DA)(DC)(DT)(DC)(DA)(DC)(DT)(DG) (DC)(DG)(DG)(DT)(DT)(DG)(DA)(DC)(DT)(DA) (DC)(DT)(DA)(DA)(DA)(DT)(DG)(DG)(DG) (DG)(DT)(DC)(DG)(DT)(DA)(DA)(DA)(DC)(DC) (DA) (DC)(DG)(DT)(DC)(DT)(DT)(DC)(DA) (DA)(DG)(DG)(DG)(DG)(DG) |
-分子 #7: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 7 / コピー数: 2 / 式: ZN |
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分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-分子 #8: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 8 / コピー数: 1 / 式: MG |
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分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.9 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 平均電子線量: 54.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |