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- EMDB-3241: Cryo-EM reconstruction of caspase-1 CARD -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-3241
タイトルCryo-EM reconstruction of caspase-1 CARD
マップデータReconstruction of caspase-1 CARD filament
試料
  • 試料: Human caspase-1 CARD
  • タンパク質・ペプチド: Caspase-1 CARD
キーワードCaspase-1 / CARD / inflammasome / filament / cryo-EM / signalosome / helical reconstruction / death domain
機能・相同性
機能・相同性情報


caspase-1 / protease inhibitor complex / AIM2 inflammasome complex assembly / The AIM2 inflammasome / AIM2 inflammasome complex / IPAF inflammasome complex / The IPAF inflammasome / icosanoid biosynthetic process / NLRP1 inflammasome complex / cytokine precursor processing ...caspase-1 / protease inhibitor complex / AIM2 inflammasome complex assembly / The AIM2 inflammasome / AIM2 inflammasome complex / IPAF inflammasome complex / The IPAF inflammasome / icosanoid biosynthetic process / NLRP1 inflammasome complex / cytokine precursor processing / canonical inflammasome complex / positive regulation of interleukin-18 production / NLRP3 inflammasome complex / caspase binding / CARD domain binding / osmosensory signaling pathway / positive regulation of tumor necrosis factor-mediated signaling pathway / Interleukin-1 processing / Interleukin-37 signaling / pattern recognition receptor signaling pathway / : / signaling receptor ligand precursor processing / TP53 Regulates Transcription of Caspase Activators and Caspases / pyroptotic inflammatory response / positive regulation of cysteine-type endopeptidase activity involved in apoptotic process / cytokine binding / cysteine-type endopeptidase activator activity involved in apoptotic process / protein autoprocessing / The NLRP3 inflammasome / protein maturation / Pyroptosis / Purinergic signaling in leishmaniasis infection / positive regulation of interleukin-1 beta production / kinase binding / NOD1/2 Signaling Pathway / cellular response to mechanical stimulus / cellular response to type II interferon / positive regulation of inflammatory response / SARS-CoV-1 activates/modulates innate immune responses / regulation of inflammatory response / positive regulation of canonical NF-kappaB signal transduction / endopeptidase activity / cellular response to lipopolysaccharide / regulation of apoptotic process / defense response to virus / microtubule / defense response to bacterium / cysteine-type endopeptidase activity / nucleolus / apoptotic process / signal transduction / protein-containing complex / proteolysis / identical protein binding / plasma membrane / cytoplasm / cytosol
類似検索 - 分子機能
Caspase recruitment domain / CARD domain / CARD caspase recruitment domain profile. / Caspase recruitment domain / Peptidase family C14A, His active site / Caspase family histidine active site. / Peptidase C14, caspase non-catalytic subunit p10 / Peptidase family C14A, cysteine active site / Caspase family cysteine active site. / Caspase family p10 domain profile. ...Caspase recruitment domain / CARD domain / CARD caspase recruitment domain profile. / Caspase recruitment domain / Peptidase family C14A, His active site / Caspase family histidine active site. / Peptidase C14, caspase non-catalytic subunit p10 / Peptidase family C14A, cysteine active site / Caspase family cysteine active site. / Caspase family p10 domain profile. / Peptidase C14A, caspase catalytic domain / Caspase, interleukin-1 beta converting enzyme (ICE) homologues / Peptidase C14, p20 domain / Caspase family p20 domain profile. / : / Caspase domain / Caspase-like domain superfamily / Death-like domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.8 Å
データ登録者Li Y / Lu A / Schmidt FI / Yin Q / Chen S / Fu T-M / Tong AB / Ploegh HL / Mao Y / Wu H
引用ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / : 2016
タイトル: Molecular basis of caspase-1 polymerization and its inhibition by a new capping mechanism.
著者: Alvin Lu / Yang Li / Florian I Schmidt / Qian Yin / Shuobing Chen / Tian-Min Fu / Alexander B Tong / Hidde L Ploegh / Youdong Mao / Hao Wu /
要旨: Inflammasomes are cytosolic caspase-1-activation complexes that sense intrinsic and extrinsic danger signals, and trigger inflammatory responses and pyroptotic cell death. Homotypic interactions ...Inflammasomes are cytosolic caspase-1-activation complexes that sense intrinsic and extrinsic danger signals, and trigger inflammatory responses and pyroptotic cell death. Homotypic interactions among Pyrin domains and caspase recruitment domains (CARDs) in inflammasome-complex components mediate oligomerization into filamentous assemblies. Several cytosolic proteins consisting of only interaction domains exert inhibitory effects on inflammasome assembly. In this study, we determined the structure of the human caspase-1 CARD domain (caspase-1(CARD)) filament by cryo-electron microscopy and investigated the biophysical properties of two caspase-1-like CARD-only proteins: human inhibitor of CARD (INCA or CARD17) and ICEBERG (CARD18). Our results reveal that INCA caps caspase-1 filaments, thereby exerting potent inhibition with low-nanomolar Ki on caspase-1(CARD) polymerization in vitro and inflammasome activation in cells. Whereas caspase-1(CARD) uses six complementary surfaces of three types for filament assembly, INCA is defective in two of the six interfaces and thus terminates the caspase-1 filament.
履歴
登録2015年11月11日-
ヘッダ(付随情報) 公開2015年11月18日-
マップ公開2016年3月30日-
更新2016年6月15日-
現状2016年6月15日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図(断面を密度値に従い着色)
  • 表面レベル: 3.15
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • 表面レベル: 3.15
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-5fna
  • 表面レベル: 3.15
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  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-5fna
  • Jmolによる作画
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_3241.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 15.3 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Reconstruction of caspase-1 CARD filament
ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.87 Å
密度
表面レベル登録者による: 3.15 / ムービー #1: 3.15
最小 - 最大-2.27765226 - 5.90264797
平均 (標準偏差)0.71799731 (±0.87744838)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin-80-80-79
サイズ160160160
Spacing160160160
セルA=B=C: 139.2 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z0.870.870.87
M x/y/z160160160
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z139.200139.200139.200
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS-80-80-79
NC/NR/NS160160160
D min/max/mean-2.2785.9030.718

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Human caspase-1 CARD

全体名称: Human caspase-1 CARD
要素
  • 試料: Human caspase-1 CARD
  • タンパク質・ペプチド: Caspase-1 CARD

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超分子 #1000: Human caspase-1 CARD

超分子名称: Human caspase-1 CARD / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: helical / Number unique components: 1

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分子 #1: Caspase-1 CARD

分子名称: Caspase-1 CARD / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 集合状態: Helical / 組換発現: Yes
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト) / 別称: Human
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 組換株: BL21 DE3 / 組換プラスミド: pDB-HIs-MBP
配列UniProtKB: Caspase-1

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析らせん対称体再構成法
試料の集合状態filament

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試料調製

濃度0.2 mg/mL
緩衝液pH: 8 / 詳細: 20 mM Sodium HEPES, pH 8.0, 150 mM NaCl, 2 mM DTT
グリッド詳細: holey carbon C-flat grids (R1.2/1.3, Photochip, CA), glow discharged
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 100 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 手法: blotted for 3 seconds before plunging

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電子顕微鏡法

顕微鏡OTHER
日付2015年2月2日
撮影カテゴリ: CCD
フィルム・検出器のモデル: DIRECT ELECTRON DE-16 (4k x 4k)
実像数: 200 / 平均電子線量: 20 e/Å2
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系倍率(補正後): 28736 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 0.006 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.001 µm
試料ステージ試料ホルダーモデル: OTHER

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画像解析

詳細The particles were aligned using IHRSR
最終 再構成想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 5.1 Å
想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: 100.2 °
想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C1 (非対称)
アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.8 Å / 解像度の算出法: OTHER / ソフトウェア - 名称: SPIDER, IHRSR
CTF補正詳細: Each micrograph

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlc1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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