+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-29656 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Body2 of G4 RNA-mediated PRC2 dimer from multibody refinement | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | PRC2 / G-quadruplex RNA / RNP complex / chromatin modifier / GENE REGULATION | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Jiarui JS / Vignesh VK | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Science / 年: 2023 タイトル: Structural basis for inactivation of PRC2 by G-quadruplex RNA. 著者: Jiarui Song / Anne R Gooding / Wayne O Hemphill / Brittney D Love / Anne Robertson / Liqi Yao / Leonard I Zon / Trista E North / Vignesh Kasinath / Thomas R Cech / 要旨: Polycomb repressive complex 2 (PRC2) silences genes through trimethylation of histone H3K27. PRC2 associates with numerous precursor messenger RNAs (pre-mRNAs) and long noncoding RNAs (lncRNAs) with ...Polycomb repressive complex 2 (PRC2) silences genes through trimethylation of histone H3K27. PRC2 associates with numerous precursor messenger RNAs (pre-mRNAs) and long noncoding RNAs (lncRNAs) with a binding preference for G-quadruplex RNA. In this work, we present a 3.3-Å-resolution cryo-electron microscopy structure of PRC2 bound to a G-quadruplex RNA. Notably, RNA mediates the dimerization of PRC2 by binding both protomers and inducing a protein interface composed of two copies of the catalytic subunit EZH2, thereby blocking nucleosome DNA interaction and histone H3 tail accessibility. Furthermore, an RNA-binding loop of EZH2 facilitates the handoff between RNA and DNA, another activity implicated in PRC2 regulation by RNA. We identified a gain-of-function mutation in this loop that activates PRC2 in zebrafish. Our results reveal mechanisms for RNA-mediated regulation of a chromatin-modifying enzyme. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
添付画像 |
---|
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_29656.map.gz | 73.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-29656-v30.xml emd-29656.xml | 24.8 KB 24.8 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_29656_fsc.xml | 10.6 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_29656.png | 83.5 KB | ||
マスクデータ | emd_29656_msk_1.map | 103 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-29656.cif.gz | 8.2 KB | ||
その他 | emd_29656_additional_1.map.gz emd_29656_half_map_1.map.gz emd_29656_half_map_2.map.gz | 9.3 MB 74 MB 74 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29656 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-29656 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_29656_validation.pdf.gz | 836.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_29656_full_validation.pdf.gz | 836 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_29656_validation.xml.gz | 17.9 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_29656_validation.cif.gz | 23.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29656 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-29656 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_29656.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 103 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.06344 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_29656_msk_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-追加マップ: #1
ファイル | emd_29656_additional_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_29656_half_map_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_29656_half_map_2.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : G4 RNA-mediated dimer of polycomb repressive complex 2
全体 | 名称: G4 RNA-mediated dimer of polycomb repressive complex 2 |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: G4 RNA-mediated dimer of polycomb repressive complex 2
超分子 | 名称: G4 RNA-mediated dimer of polycomb repressive complex 2 タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
-分子 #1: Polycomb protein SUZ12
分子 | 名称: Polycomb protein SUZ12 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MAPQKHGGGG GGGSGPSAGS GGGGFGGSAA VAAATASGGK SGGGSCGGGG SYSASSSSSA AAAAGAAVLP VKKPKMEHVQ ADHELFLQA FEKPTQIYRF LRTRNLIAPI FLHRTLTYMS HRNSRTNIKR KTFKVDDMLS KVEKMKGEQE SHSLSAHLQL T FTGFFHKN ...文字列: MAPQKHGGGG GGGSGPSAGS GGGGFGGSAA VAAATASGGK SGGGSCGGGG SYSASSSSSA AAAAGAAVLP VKKPKMEHVQ ADHELFLQA FEKPTQIYRF LRTRNLIAPI FLHRTLTYMS HRNSRTNIKR KTFKVDDMLS KVEKMKGEQE SHSLSAHLQL T FTGFFHKN DKPSPNSENE QNSVTLEVLL VKVCHKKRKD VSCPIRQVPT GKKQVPLNPD LNQTKPGNFP SLAVSSNEFE PS NSHMVKS YSLLFRVTRP GRREFNGMIN GETNENIDVN EELPARRKRN REDGEKTFVA QMTVFDKNRR LQLLDGEYEV AMQ EMEECP ISKKRATWET ILDGKRLPPF ETFSQGPTLQ FTLRWTGETN DKSTAPIAKP LATRNSESLH QENKPGSVKP TQTI AVKES LTTDLQTRKE KDTPNENRQK LRIFYQFLYN NNTRQQTEAR DDLHCPWCTL NCRKLYSLLK HLKLCHSRFI FNYVY HPKG ARIDVSINEC YDGSYAGNPQ DIHRQPGFAF SRNGPVKRTP ITHILVCRPK RTKASMSEFL ESEDGEVEQQ RTYSSG HNR LYFHSDTCLP LRPQEMEVDS EDEKDPEWLR EKTITQIEEF SDVNEGEKEV MKLWNLHVMK HGFIADNQMN HACMLFV EN YGQKIIKKNL CRNFMLHLVS MHDFNLISIM SIDKAVTKLR EMQQKLEKGE SASPANEEIT EEQNGTANGF SEINSKEK A LETDSVSGVS KQSKKQKL |
-分子 #2: Polycomb protein EED
分子 | 名称: Polycomb protein EED / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MSEREVSTAP AGTDMPAAKK QKLSSDENSN PDLSGDENDD AVSIESGTNT ERPDTPTNTP NAPGRKSWGK GKWKSKKCKY SFKCVNSLK EDHNQPLFGV QFNWHSKEGD PLVFATVGSN RVTLYECHSQ GEIRLLQSYV DADADENFYT CAWTYDSNTS H PLLAVAGS ...文字列: MSEREVSTAP AGTDMPAAKK QKLSSDENSN PDLSGDENDD AVSIESGTNT ERPDTPTNTP NAPGRKSWGK GKWKSKKCKY SFKCVNSLK EDHNQPLFGV QFNWHSKEGD PLVFATVGSN RVTLYECHSQ GEIRLLQSYV DADADENFYT CAWTYDSNTS H PLLAVAGS RGIIRIINPI TMQCIKHYVG HGNAINELKF HPRDPNLLLS VSKDHALRLW NIQTDTLVAI FGGVEGHRDE VL SADYDLL GEKIMSCGMD HSLKLWRINS KRMMNAIKES YDYNPNKTNR PFISQKIHFP DFSTRDIHRN YVDCVRWLGD LIL SKSCEN AIVCWKPGKM EDDIDKIKPS ESNVTILGRF DYSQCDIWYM RFSMDFWQKM LALGNQVGKL YVWDLEVEDP HKAK CTTLT HHKCGAAIRQ TSFSRDSSIL IAVCDDASIW RWDRLR |
-分子 #3: Histone-binding protein RBBP4
分子 | 名称: Histone-binding protein RBBP4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MADKEAAFDD AVEERVINEE YKIWKKNTPF LYDLVMTHAL EWPSLTAQWL PDVTRPEGKD FSIHRLVLGT HTSDEQNHLV IASVQLPND DAQFDASHYD SEKGEFGGFG SVSGKIEIEI KINHEGEVNR ARYMPQNPCI IATKTPSSDV LVFDYTKHPS K PDPSGECN ...文字列: MADKEAAFDD AVEERVINEE YKIWKKNTPF LYDLVMTHAL EWPSLTAQWL PDVTRPEGKD FSIHRLVLGT HTSDEQNHLV IASVQLPND DAQFDASHYD SEKGEFGGFG SVSGKIEIEI KINHEGEVNR ARYMPQNPCI IATKTPSSDV LVFDYTKHPS K PDPSGECN PDLRLRGHQK EGYGLSWNPN LSGHLLSASD DHTICLWDIS AVPKEGKVVD AKTIFTGHTA VVEDVSWHLL HE SLFGSVA DDQKLMIWDT RSNNTSKPSH SVDAHTAEVN CLSFNPYSEF ILATGSADKT VALWDLRNLK LKLHSFESHK DEI FQVQWS PHNETILASS GTDRRLNVWD LSKIGEEQSP EDAEDGPPEL LFIHGGHTAK ISDFSWNPNE PWVICSVSED NIMQ VWQMA ENIYNDEDPE GSVDPEGQGS |
-分子 #4: Histone-lysine N-methyltransferase EZH2
分子 | 名称: Histone-lysine N-methyltransferase EZH2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MGQTGKKSEK GPVCWRKRVK SEYMRLRQLK RFRRADEVKS MFSSNRQKIL ERTEILNQEW KQRRIQPVHI LTSVSSLRGT RECSVTSDL DFPTQVIPLK TLNAVASVPI MYSWSPLQQN FMVEDETVLH NIPYMGDEVL DQDGTFIEEL IKNYDGKVHG D RECGFIND ...文字列: MGQTGKKSEK GPVCWRKRVK SEYMRLRQLK RFRRADEVKS MFSSNRQKIL ERTEILNQEW KQRRIQPVHI LTSVSSLRGT RECSVTSDL DFPTQVIPLK TLNAVASVPI MYSWSPLQQN FMVEDETVLH NIPYMGDEVL DQDGTFIEEL IKNYDGKVHG D RECGFIND EIFVELVNAL GQYNDDDDDD DGDDPEEREE KQKDLEDHRD DKESRPPRKF PSDKIFEAIS SMFPDKGTAE EL KEKYKEL TEQQLPGALP PECTPNIDGP NAKSVQREQS LHSFHTLFCR RCFKYDCFLH RKCNYSFHAT PNTYKRKNTE TAL DNKPCG PQCYQHLEGA KEFAAALTAE RIKTPPKRPG GRRRGRLPNN SSRPSTPTIN VLESKDTDSD REAGTETGGE NNDK EEEEK KDETSSSSEA NSRCQTPIKM KPNIEPPENV EWSGAEASMF RVLIGTYYDN FCAIARLIGT KTCRQVYEFR VKESS IIAP APAEDVDTPP RKKKRKHRLW AAHCRKIQLK KDGSSNHVYN YQPCDHPRQP CDSSCPCVIA QNFCEKFCQC SSECQN RFP GCRCKAQCNT KQCPCYLAVR ECDPDLCLTC GAADHWDSKN VSCKNCSIQR GSKKHLLLAP SDVAGWGIFI KDPVQKN EF ISEYCGEIIS QDEADRRGKV YDKYMCSFLF NLNNDFVVDA TRKGNKIRFA NHSVNPNCYA KVMMVNGDHR IGIFAKRA I QTGEELFFDY RYSQADALKY VGIEREMEIP |
-分子 #5: protein Jumonji isoform X3
分子 | 名称: protein Jumonji isoform X3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MSKERPKRNI IQKKYDDSDG IPWSEERVVR KVLYLSLKEF KNAQKRQHGE GIAGSLKSVN GLLGNDQSKA LGPASEQSEN EKDDASQVS STSNDVSSSD FEEGPSRKRP RLQAQRKFAQ SQPNSPSTTP VKTVEPLLPP PATQISDLSK RKPKTEDFLT F LCLRGSPA ...文字列: MSKERPKRNI IQKKYDDSDG IPWSEERVVR KVLYLSLKEF KNAQKRQHGE GIAGSLKSVN GLLGNDQSKA LGPASEQSEN EKDDASQVS STSNDVSSSD FEEGPSRKRP RLQAQRKFAQ SQPNSPSTTP VKTVEPLLPP PATQISDLSK RKPKTEDFLT F LCLRGSPA LPSSMVYFGS SQDEEDVEEE DDETEDVKTA NNNASSSCQS TPRKGKTHKH VHNGHVFNGS NRSTREKEPA QK HKSKETT PAKEKHIDHR ADSRREPASV AQPTATPSAG SLAKGLPANH QPPPPHRSAQ DLRKQVTLHV SKVNGVTRMS SLG AGTTSA KKIREVRPSP SKTVKYTATV TKGTVTYTKA KRELVKETKP THHKPSSAVN HTISGKTESS NAKTRKQVLS LGGA STSTG PAASGLKASS RLNPKSCTKE VGGRQLREGL RNSKRRLEEA QQVDKPQSPP KKMKGAAGIA EAPGKKASAA SAEKS LLNG HVKKEVPERS LERNRPKRAT AGKNMPGKQA HGKAEGTPCE NRSTSQPESS HKPHDPQGKP EKGIGKSGWT AMDEIP VLR PSAKEFHDPL IYIESVRAQV EKYGMCRVIP PPDWRPECKL NDEMRFVTQI QHIHKLGRRW GPNVQRLACI KKHLRSQ GI TMDELPLIGG CELDLACFFR LINEMGGMQQ VTDLKKWNKL ADMLRIPKTA QDRLAKLQEA YCQYLLSYDS LSPEEHRR L EKEVLMEKEI LEKRKGPLEG HTENDHHKFH SLPRFEPKNG LIHGVTPRNG FRSKLKEVGQ APLKTGRRRL FAQEKEVVK EEEEDKGVLN DFHKCIYKGR SVSLTTFYRT ARNIMNMCFS KEPAPAEIEQ EYWRLVEEKD CHVAVHCGKV DTNTHGSGFP VGKSEPFSR HGWNLTVLPN NTGSILRHLG AVPGVTIPWL NIGMVFSTSC WSRDQNHLPY IDYLHTGADC IWYCIPAEEE N KLEDVVHT LLQANGTPGL QMLESNVMIS PEVLCKEGIK VHRTVQQSGQ FVVCFPGSFV SKVCCGYSVS ETVHFATTQW TS MGFETAK EMKRRHIAKP FSMEKLLYQI AQAEAKKENG PTLSTISALL DELRDTELRQ RRQLFEAGLH SSARYGSHDG NST VADGKK KPRKWLQLET SERRCQICQH LCYLSMVVQE NENVVFCLEC ALRHVEKQKS CRGLKLMYRY DEEQIISLVN QICG KVSGK HGGIENCLNK PTPKRGPRKR ATVDVPPSRL PSS |
-分子 #6: Zinc finger protein AEBP2
分子 | 名称: Zinc finger protein AEBP2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MAAAITDMAD LEELSRLSPL PPGSPGSAAR GRAEPPEEEE EEEEEEEEAE AEAVAALLLN GGSGGGGGGG GGGVGGGEAE TMSEPSPES ASQAGEDEDE EEDDEEEEDE SSSSGGGEEE SSAESLVGSS GGSSSDETRS LSPGAASSSS GDGDGKEGLE E PKGPRGSQ ...文字列: MAAAITDMAD LEELSRLSPL PPGSPGSAAR GRAEPPEEEE EEEEEEEEAE AEAVAALLLN GGSGGGGGGG GGGVGGGEAE TMSEPSPES ASQAGEDEDE EEDDEEEEDE SSSSGGGEEE SSAESLVGSS GGSSSDETRS LSPGAASSSS GDGDGKEGLE E PKGPRGSQ GGGGGGSSSS SVVSSGGDEG YGTGGGGSSA TSGGRRGSLE MSSDGEPLSR MDSEDSISST IMDVDSTISS GR STPAMMN GQGSTTSSSK NIAYNCCWDQ CQACFNSSPD LADHIRSIHV DGQRGGVFVC LWKGCKVYNT PSTSQSWLQR HML THSGDK PFKCVVGGCN ASFASQGGLA RHVPTHFSQQ NSSKVSSQPK AKEESPSKAG MNKRRKLKNK RRRSLPRPHD FFDA QTLDA IRHRAICFNL SAHIESLGKG HSVVFHSTVI AKRKEDSGKI KLLLHWMPED ILPDVWVNES ERHQLKTKVV HLSKL PKDT ALLLDPNIYR TMPQKRLKRT LIRKVFNLYL SKQ |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.9 詳細: RNP complex buffer (25 mM HEPES pH 7.9, 50 mM KCl, 2 mM MgCl2, 10% glycerol, and 1mM TCEP) EM preparation buffer I (25 mM HEPES pH 7.9, 50 mM KCl, 2.5% glycerol, and 1mM TCEP) EM preparation ...詳細: RNP complex buffer (25 mM HEPES pH 7.9, 50 mM KCl, 2 mM MgCl2, 10% glycerol, and 1mM TCEP) EM preparation buffer I (25 mM HEPES pH 7.9, 50 mM KCl, 2.5% glycerol, and 1mM TCEP) EM preparation buffer II (25 mM HEPES pH 7.9, 50 mM KCl, 2.5% glycerol, 0.01%NP-40, and 1mM TCEP). |
---|---|
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 90 % / チャンバー内温度: 281 K / 装置: LEICA PLUNGER / 詳細: 3s of single side blotting. |
詳細 | We used streptavidin-affinity grid preparation method with biotin-labeled RNA at 100 nM concentration. PRC2 was applied in excess at 600 nM. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
特殊光学系 | エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 18632 / 平均電子線量: 60.0 e/Å2 / 詳細: 60 frames per movie |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 81000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |