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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-27215 | |||||||||
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タイトル | ELIC apo in POPC nanodisc | |||||||||
マップデータ | ||||||||||
試料 |
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キーワード | ELIC / ion channel / pLGIC / STRUCTURAL PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 extracellular ligand-gated monoatomic ion channel activity / regulation of membrane potential / transmembrane signaling receptor activity / neuron projection / signal transduction / identical protein binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Dickeya dadantii (バクテリア) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.14 Å | |||||||||
データ登録者 | Petroff II JT / Deng Z / Rau MJ / Fitzpatrick JAJ / Yuan P / Cheng WWL | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022 タイトル: Open-channel structure of a pentameric ligand-gated ion channel reveals a mechanism of leaflet-specific phospholipid modulation. 著者: John T Petroff / Noah M Dietzen / Ezry Santiago-McRae / Brett Deng / Maya S Washington / Lawrence J Chen / K Trent Moreland / Zengqin Deng / Michael Rau / James A J Fitzpatrick / Peng Yuan / ...著者: John T Petroff / Noah M Dietzen / Ezry Santiago-McRae / Brett Deng / Maya S Washington / Lawrence J Chen / K Trent Moreland / Zengqin Deng / Michael Rau / James A J Fitzpatrick / Peng Yuan / Thomas T Joseph / Jérôme Hénin / Grace Brannigan / Wayland W L Cheng / 要旨: Pentameric ligand-gated ion channels (pLGICs) mediate synaptic transmission and are sensitive to their lipid environment. The mechanism of phospholipid modulation of any pLGIC is not well understood. ...Pentameric ligand-gated ion channels (pLGICs) mediate synaptic transmission and are sensitive to their lipid environment. The mechanism of phospholipid modulation of any pLGIC is not well understood. We demonstrate that the model pLGIC, ELIC (Erwinia ligand-gated ion channel), is positively modulated by the anionic phospholipid, phosphatidylglycerol, from the outer leaflet of the membrane. To explore the mechanism of phosphatidylglycerol modulation, we determine a structure of ELIC in an open-channel conformation. The structure shows a bound phospholipid in an outer leaflet site, and structural changes in the phospholipid binding site unique to the open-channel. In combination with streamlined alchemical free energy perturbation calculations and functional measurements in asymmetric liposomes, the data support a mechanism by which an anionic phospholipid stabilizes the activated, open-channel state of a pLGIC by specific, state-dependent binding to this site. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
添付画像 |
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-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_27215.map.gz | 20.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-27215-v30.xml emd-27215.xml | 20.6 KB 20.6 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_27215_fsc.xml | 6.4 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_27215.png | 97.1 KB | ||
Filedesc metadata | emd-27215.cif.gz | 6.2 KB | ||
その他 | emd_27215_additional_1.map.gz emd_27215_half_map_1.map.gz emd_27215_half_map_2.map.gz | 16.5 MB 16.7 MB 16.7 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-27215 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-27215 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_27215_validation.pdf.gz | 766.8 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_27215_full_validation.pdf.gz | 766.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_27215_validation.xml.gz | 12 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_27215_validation.cif.gz | 16.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-27215 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-27215 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 8d63MC 8d64C 8d65C 8d66C 8d67C 8vuwC 27220 C: 同じ文献を引用 (文献) M: このマップから作成された原子モデル |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_27215.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 22.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
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-添付データ
-追加マップ: #1
ファイル | emd_27215_additional_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #2
ファイル | emd_27215_half_map_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: #1
ファイル | emd_27215_half_map_2.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : ELIC apo in POPC nanodisc
全体 | 名称: ELIC apo in POPC nanodisc |
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要素 |
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-超分子 #1: ELIC apo in POPC nanodisc
超分子 | 名称: ELIC apo in POPC nanodisc / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1 |
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由来(天然) | 生物種: Dickeya dadantii (バクテリア) |
-分子 #1: Erwinia ligand-gated ion channel
分子 | 名称: Erwinia ligand-gated ion channel / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 5 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Dickeya dadantii (バクテリア) |
分子量 | 理論値: 36.879 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: APADNAADAR PVDVSVSIFI NKIYGVNTLE QTYKVDGYIV AQWTGKPRKT PGDKPLIVEN TQIERWINNG LWVPALEFIN VVGSPDTGN KRLMLFPDGR VIYNARFLGS FSNDMDFRLF PFDRQQFVLE LEPFSYNNQQ LRFSDIQVYT ENIDNEEIDE W WIRGKAST ...文字列: APADNAADAR PVDVSVSIFI NKIYGVNTLE QTYKVDGYIV AQWTGKPRKT PGDKPLIVEN TQIERWINNG LWVPALEFIN VVGSPDTGN KRLMLFPDGR VIYNARFLGS FSNDMDFRLF PFDRQQFVLE LEPFSYNNQQ LRFSDIQVYT ENIDNEEIDE W WIRGKAST HISDIRYDHL SSVQPNQNEF SRITVRIDAV RNPSYYLWSF ILPLGLIIAA SWSVFWLESF SERLQTSFTL ML TVVAYAF YTSNILPRLP YTTVIDQMII AGYGSIFAAI LLIIFAHHRQ ANGVEDDLLI QRCRLAFPLG FLAIGCVLVI RGI TL UniProtKB: Gamma-aminobutyric-acid receptor subunit beta-1 |
-分子 #2: 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine
分子 | 名称: 1-palmitoyl-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine / タイプ: ligand / ID: 2 / コピー数: 5 / 式: LBN |
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分子量 | 理論値: 760.076 Da |
Chemical component information | ChemComp-LBN: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 7.5 |
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グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: OTHER / 前処理 - 気圧: 9.332 kPa / 詳細: H2 27.5 sccm O2 6.4 sccm |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: Blot for 2 seconds before plunging. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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温度 | 最低: 82.0 K / 最高: 84.0 K |
特殊光学系 | 球面収差補正装置: Microscope was equipped with a Cs corrector エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - サイズ - 横: 3838 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3710 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 平均露光時間: 8.0 sec. / 平均電子線量: 1.65 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 150.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 1.0 µm / 倍率(補正後): 105000 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 0.01 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.5 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 105000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL |
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得られたモデル | PDB-8d63: |