+
データを開く
-
基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-23716 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | E.coli RNAP-RapA elongation complex | |||||||||
![]() | RNAP-RapA elongation complex | |||||||||
![]() |
| |||||||||
![]() | Swi2/snf2 / RapA / ATPase / RNA polymerase / TRANSFERASE-HYDROLASE-DNA-RNA complex | |||||||||
機能・相同性 | ![]() hydrolase activity, acting on acid anhydrides / ATP-dependent chromatin remodeler activity => GO:0140658 / DNA-directed RNA polymerase complex / helicase activity / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / protein dimerization activity / DNA-templated transcription ...hydrolase activity, acting on acid anhydrides / ATP-dependent chromatin remodeler activity => GO:0140658 / DNA-directed RNA polymerase complex / helicase activity / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / protein dimerization activity / DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / ATP binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() ![]() | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å | |||||||||
![]() | Shi W / Liu B | |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Structural basis for activation of Swi2/Snf2 ATPase RapA by RNA polymerase. 著者: Wei Shi / Wei Zhou / Ming Chen / Yang Yang / Yangbo Hu / Bin Liu / ![]() ![]() 要旨: RapA is a bacterial RNA polymerase (RNAP)-associated Swi2/Snf2 ATPase that stimulates RNAP recycling. The ATPase activity of RapA is autoinhibited by its N-terminal domain (NTD) but activated with ...RapA is a bacterial RNA polymerase (RNAP)-associated Swi2/Snf2 ATPase that stimulates RNAP recycling. The ATPase activity of RapA is autoinhibited by its N-terminal domain (NTD) but activated with RNAP bound. Here, we report a 3.4-Å cryo-EM structure of Escherichia coli RapA-RNAP elongation complex, in which the ATPase active site of RapA is structurally remodeled. In this process, the NTD of RapA is wedged open by RNAP β' zinc-binding domain (ZBD). In addition, RNAP β flap tip helix (FTH) forms extensive hydrophobic interactions with RapA ATPase core domains. Functional assay demonstrates that removing the ZBD or FTH of RNAP significantly impairs its ability to activate the ATPase activity of RapA. Our results provide the structural basis of RapA ATPase activation by RNAP, through the active site remodeling driven by the ZBD-buttressed large-scale opening of NTD and the direct interactions between FTH and ATPase core domains. | |||||||||
履歴 |
|
-
構造の表示
ムービー |
![]() |
---|---|
構造ビューア | EMマップ: ![]() ![]() ![]() |
添付画像 |
-
ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | ![]() | 204 MB | ![]() | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | ![]() ![]() | 24.2 KB 24.2 KB | 表示 表示 | ![]() |
画像 | ![]() | 110.2 KB | ||
Filedesc metadata | ![]() | 9.1 KB | ||
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 520.3 KB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | ![]() | 519.9 KB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 7.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 8.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-
リンク
EMDBのページ | ![]() ![]() |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-
マップ
ファイル | ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | RNAP-RapA elongation complex | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.89 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
|
-添付データ
-
試料の構成要素
+全体 : RNAP-RapA elongation complex
+超分子 #1: RNAP-RapA elongation complex
+分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
+分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
+分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
+分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
+分子 #5: RNA polymerase-associated protein RapA
+分子 #6: Nontemplate DNA (39-MER)
+分子 #7: Template DNA (39-MER)
+分子 #8: RNA (5'-R(P*AP*UP*CP*GP*GP*CP*UP*CP*A)-3')
+分子 #9: ZINC ION
+分子 #10: MAGNESIUM ION
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
![]() | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-
試料調製
濃度 | 5 mg/mL |
---|---|
緩衝液 | pH: 7.5 |
グリッド | モデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER / メッシュ: 200 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: NITROGEN |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 296 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-
電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 3218 / 平均露光時間: 32.0 sec. / 平均電子線量: 40.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: ![]() |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.4 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.0 µm / 倍率(公称値): 96000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |