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- EMDB-21516: Cryo-EM structure of anti-CRISPR AcrIF9, bound to the type I-F cr... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-21516
タイトルCryo-EM structure of anti-CRISPR AcrIF9, bound to the type I-F crRNA-guided CRISPR surveillance complex
マップデータanti-CRISPR AcrIF9 bound to the type I-F crRNA-guided CRISPR surveillance complex
試料
  • 複合体: Anti-CRISPR AcrIF9 bound to the type I-F crRNA-guided CRISPR surveillance complex
    • 複合体: Type I-F crRNA-guided CRISPR surveillance complex
      • タンパク質・ペプチド: CRISPR-associated protein Csy1
      • タンパク質・ペプチド: Type I-F CRISPR-associated protein Csy2
      • タンパク質・ペプチド: CRISPR-associated protein Csy3
      • RNA: RNA (60-MER)
      • タンパク質・ペプチド: CRISPR-associated endonuclease Cas6/Csy4
    • 複合体: Anti-CRISPR AcrIF9
      • タンパク質・ペプチド: anti-CRISPR AcrIF9
キーワードtype I-F CRISPR RNA-guided surveillance complex / Csy complex / IMMUNE SYSTEM-RNA complex (免疫系)
機能・相同性
機能・相同性情報


maintenance of CRISPR repeat elements / defense response to virus / endonuclease activity / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / RNA binding
類似検索 - 分子機能
CRISPR-associated protein Csy1 / CRISPR-associated protein (Cas_Csy1) / CRISPR-associated endoribonuclease Cas6/Csy4, subtype I-F/YPEST / CRISPR-associated endoribonuclease Cas6/Csy4, subtype I-F/YPEST superfamily / CRISPR-associated protein (Cas_Csy4) / CRISPR-associated protein Csy2 / CRISPR-associated protein (Cas_Csy2) / CRISPR-associated protein Csy3 / CRISPR-associated protein (Cas_Csy3)
類似検索 - ドメイン・相同性
CRISPR type I-F/YPEST-associated protein Csy3 / CRISPR type I-F/YPEST-associated protein Csy2 / SH3b domain-containing protein / CRISPR-associated protein Csy1 / CRISPR-associated protein Csy2 / CRISPR-associated protein Csy3 / CRISPR-associated endonuclease Cas6/Csy4
類似検索 - 構成要素
生物種Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) / Proteus penneri (バクテリア)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.9 Å
データ登録者Hirschi M / Santiago-Frangos A
資金援助 米国, 3件
OrganizationGrant number国
National Institutes of Health/Office of the DirectorDP2EB020402 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R35GM134867 米国
National Institutes of Health/Office of the DirectorS10OD021634 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2020
タイトル: AcrIF9 tethers non-sequence specific dsDNA to the CRISPR RNA-guided surveillance complex.
著者: Marscha Hirschi / Wang-Ting Lu / Andrew Santiago-Frangos / Royce Wilkinson / Sarah M Golden / Alan R Davidson / Gabriel C Lander / Blake Wiedenheft /
要旨: Bacteria have evolved sophisticated adaptive immune systems, called CRISPR-Cas, that provide sequence-specific protection against phage infection. In turn, phages have evolved a broad spectrum of ...Bacteria have evolved sophisticated adaptive immune systems, called CRISPR-Cas, that provide sequence-specific protection against phage infection. In turn, phages have evolved a broad spectrum of anti-CRISPRs that suppress these immune systems. Here we report structures of anti-CRISPR protein IF9 (AcrIF9) in complex with the type I-F CRISPR RNA-guided surveillance complex (Csy). In addition to sterically blocking the hybridization of complementary dsDNA to the CRISPR RNA, our results show that AcrIF9 binding also promotes non-sequence-specific engagement with dsDNA, potentially sequestering the complex from target DNA. These findings highlight the versatility of anti-CRISPR mechanisms utilized by phages to suppress CRISPR-mediated immune systems.
履歴
登録2020年3月4日-
ヘッダ(付随情報) 公開2020年5月13日-
マップ公開2020年5月13日-
更新2024年3月6日-
現状2024年3月6日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.015
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（円筒半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.015
  • UCSF Chimeraによる作画
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  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-6w1x
  • 表面レベル: 0.015
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ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_21516.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_21516.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈anti-CRISPR AcrIF9 bound to the type I-F crRNA-guided CRISPR surveillance complex
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.15 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.015 / ムービー #1: 0.015
最小 - 最大-0.061401043 - 0.11653317
平均 (標準偏差)-0.000022094737 (±0.004716737)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ200200200
Spacing200200200
セルA=B=C: 230.0 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.151.151.15
M x/y/z200200200
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z230.000230.000230.000
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS200200200
D min/max/mean-0.0610.117-0.000

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添付データ

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試料の構成要素

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全体 : Anti-CRISPR AcrIF9 bound to the type I-F crRNA-guided CRISPR surv...

全体名称: Anti-CRISPR AcrIF9 bound to the type I-F crRNA-guided CRISPR surveillance complex
要素
  • 複合体: Anti-CRISPR AcrIF9 bound to the type I-F crRNA-guided CRISPR surveillance complex
    • 複合体: Type I-F crRNA-guided CRISPR surveillance complex
      • タンパク質・ペプチド: CRISPR-associated protein Csy1
      • タンパク質・ペプチド: Type I-F CRISPR-associated protein Csy2
      • タンパク質・ペプチド: CRISPR-associated protein Csy3
      • RNA: RNA (60-MER)
      • タンパク質・ペプチド: CRISPR-associated endonuclease Cas6/Csy4
    • 複合体: Anti-CRISPR AcrIF9
      • タンパク質・ペプチド: anti-CRISPR AcrIF9

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超分子 #1: Anti-CRISPR AcrIF9 bound to the type I-F crRNA-guided CRISPR surv...

超分子名称: Anti-CRISPR AcrIF9 bound to the type I-F crRNA-guided CRISPR surveillance complex
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#6

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超分子 #2: Type I-F crRNA-guided CRISPR surveillance complex

超分子名称: Type I-F crRNA-guided CRISPR surveillance complex / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#5
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)

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超分子 #3: Anti-CRISPR AcrIF9

超分子名称: Anti-CRISPR AcrIF9 / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #6
由来(天然)生物種: Proteus penneri (バクテリア)

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分子 #1: CRISPR-associated protein Csy1

分子名称: CRISPR-associated protein Csy1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 49.194168 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MTSPLPTPTW QELRQFIESF IQERLQGKLD KLQPDEDDKR QTLLATHRRE AWLADAARRV GQLQLVTHTL KPIHPDARGS NLHSLPQAP GQPGLAGSHE LGDRLVSDVV GNAAALDVFK FLSLQYQGKN LLNWLTEDSA EALQALSDNA EQAREWRQAF I GITTVKGA ...文字列:
MTSPLPTPTW QELRQFIESF IQERLQGKLD KLQPDEDDKR QTLLATHRRE AWLADAARRV GQLQLVTHTL KPIHPDARGS NLHSLPQAP GQPGLAGSHE LGDRLVSDVV GNAAALDVFK FLSLQYQGKN LLNWLTEDSA EALQALSDNA EQAREWRQAF I GITTVKGA PASHSLAKQL YFPLPGSGYH LLAPLFPTSL VHHVHALLRE ARFGDAAKAA REARSRQESW PHGFSEYPNL AI QKFGGTK PQNISQLNNE RRGENWLLPS LPPNWQRQNV NAPMRHSSVF EHDFGRTPEV SRLTRTLQRF LAKTVHNNLA IRQ RRAQLV AQICDEALQY AARLRELEPG WSATPGCQLH DAEQLWLDPL RAQTDETFLQ RRLRGDWPAE VGNRFANWLN RAVS SDSQI LGSPEAAQWS QELSKELTMF KEILEDERD

UniProtKB: CRISPR-associated protein Csy1

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分子 #2: Type I-F CRISPR-associated protein Csy2

分子名称: Type I-F CRISPR-associated protein Csy2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 36.244074 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MSVTDPEALL LLPRLSIQNA NAISSPLTWG FPSPGAFTGF VHALQRRVGI SLDIELDGVG IVCHRFEAQI SQPAGKRTKV FNLTRNPLN RDGSTAAIVE EGRAHLEVSL LLGVHGDGLD DHPAQEIARQ VQEQAGAMRL AGGSILPWCN ERFPAPNAEL L MLGGSDEQ ...文字列:
MSVTDPEALL LLPRLSIQNA NAISSPLTWG FPSPGAFTGF VHALQRRVGI SLDIELDGVG IVCHRFEAQI SQPAGKRTKV FNLTRNPLN RDGSTAAIVE EGRAHLEVSL LLGVHGDGLD DHPAQEIARQ VQEQAGAMRL AGGSILPWCN ERFPAPNAEL L MLGGSDEQ RRKNQRRLTR RLLPGFALVS REALLQQHLE TLRTTLPEAT TLDALLDLCR INFEPPATSS EEEASPPDAA WQ VRDKPGW LVPIPAGYNA LSPLYLPGEV RNARDRETPL RFVENLFGLG EWLSPHRVAA LSDLLWYHHA EPDKGLYRWS TPR FVEHAI A

UniProtKB: CRISPR type I-F/YPEST-associated protein Csy2

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分子 #3: CRISPR-associated protein Csy3

分子名称: CRISPR-associated protein Csy3 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 6 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 39.778594 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MKSSHHHHHH ENLYFQSNAS KPILSTASVL AFERKLDPSD ALMSAGAWAQ RDASQEWPAV TVREKSVRGT ISNRLKTKDR DPAKLDASI QSPNLQTVDV ANLPSDADTL KVRFTLRVLG GAGTPSACND AAYRDKLLQT VATYVNDQGF AELARRYAHN L ANARFLWR ...文字列:
MKSSHHHHHH ENLYFQSNAS KPILSTASVL AFERKLDPSD ALMSAGAWAQ RDASQEWPAV TVREKSVRGT ISNRLKTKDR DPAKLDASI QSPNLQTVDV ANLPSDADTL KVRFTLRVLG GAGTPSACND AAYRDKLLQT VATYVNDQGF AELARRYAHN L ANARFLWR NRVGAEAVEV RINHIRQGEV ARAWRFDALA IGLRDFKADA ELDALAELIA SGLSGSGHVL LEVVAFARIG DG QEVFPSQ ELILDKGDKK GQKSKTLYSV RDAAAIHSQK IGNALRTIDT WYPDEDGLGP IAVEPYGSVT SQGKAYRQPK QKL DFYTLL DNWVLRDEAP AVEQQHYVIA NLIRGGVFGE AEEK

UniProtKB: CRISPR type I-F/YPEST-associated protein Csy3

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分子 #5: CRISPR-associated endonuclease Cas6/Csy4

分子名称: CRISPR-associated endonuclease Cas6/Csy4 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
EC番号: 加水分解酵素; エステル加水分解酵素
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 21.427504 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MDHYLDIRLR PDPEFPPAQL MSVLFGKLHQ ALVAQGGDRI GVSFPDLDES RSRLGERLRI HASADDLRAL LARPWLEGLR DHLQFGEPA VVPHPTPYRQ VSRVQAKSNP ERLRRRLMRR HDLSEEEARK RIPDTVARAL DLPFVTLRSQ STGQHFRLFI R HGPLQVTA EEGGFTCYGL SKGGFVPWF

UniProtKB: CRISPR-associated endonuclease Cas6/Csy4

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分子 #6: anti-CRISPR AcrIF9

分子名称: anti-CRISPR AcrIF9 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Proteus penneri (バクテリア)
分子量理論値: 7.863849 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MKSTYIIKEV QNINSDREGV KVETTSLTSA KRIASKNQFF HGTVLRIESE SGNWLAYKED GKRWIECE

UniProtKB: SH3b domain-containing protein

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分子 #4: RNA (60-MER)

分子名称: RNA (60-MER) / タイプ: rna / ID: 4 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
分子量理論値: 19.265404 KDa
配列文字列:
CUAAGAAAUU CACGGCGGGC UUGAUGUCCG CGUCUACCUG GUUCACUGCC GUGUAGGCAG

GENBANK: GENBANK: HQ326201.1

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度2.5 mg/mL
緩衝液pH: 7.5
構成要素:
濃度式
20.0 mMHEPES
100.0 mMNaCl塩化ナトリウム
2.5 %glycerolグリセリン
1.0 mMTCEP
グリッドモデル: Quantifoil, UltrAuFoil, R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: PLASMA CLEANING / 前処理 - 時間: 7 sec. / 前処理 - 雰囲気: OTHER / 詳細: unspecified
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 277 K / 装置: HOMEMADE PLUNGER

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TALOS ARCTICA
電子線加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 1.2 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.8 µm / 倍率（公称値）: 36000
試料ステージホルダー冷却材: NITROGEN
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
検出モード: COUNTING / 実像数: 1653 / 平均露光時間: 13.2 sec. / 平均電子線量: 66.0 e/Å2
実験機器
モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 1571636
初期モデルモデルのタイプ: NONE
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 使用した粒子像数: 285707

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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