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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1961 | |||||||||
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タイトル | Symmetry-free cryo-EM map of TRiC-AMP-PNP | |||||||||
マップデータ | symmetry-free cryo-EM density of TRiC-AMP-PNP | |||||||||
試料 |
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キーワード | TRiC/CCT / chaperonin / cryo-EM / protein folding | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 Association of TriC/CCT with target proteins during biosynthesis / RHOBTB2 GTPase cycle / RHOBTB1 GTPase cycle / chaperonin-containing T-complex / Cooperation of PDCL (PhLP1) and TRiC/CCT in G-protein beta folding / Neutrophil degranulation / ATP-dependent protein folding chaperone / unfolded protein binding / protein folding / ATP hydrolysis activity / ATP binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Bos taurus (ウシ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10.7 Å | |||||||||
データ登録者 | Cong Y / Schroder GF / Meyer AS / Jakana J / Ma B / Dougherty MT / Schmid MF / Reissmann S / Levitt M / Ludtke SL ...Cong Y / Schroder GF / Meyer AS / Jakana J / Ma B / Dougherty MT / Schmid MF / Reissmann S / Levitt M / Ludtke SL / Frydman J / Chiu W | |||||||||
引用 | ジャーナル: EMBO J / 年: 2012 タイトル: Symmetry-free cryo-EM structures of the chaperonin TRiC along its ATPase-driven conformational cycle. 著者: Yao Cong / Gunnar F Schröder / Anne S Meyer / Joanita Jakana / Boxue Ma / Matthew T Dougherty / Michael F Schmid / Stefanie Reissmann / Michael Levitt / Steven L Ludtke / Judith Frydman / Wah Chiu / 要旨: The eukaryotic group II chaperonin TRiC/CCT is a 16-subunit complex with eight distinct but similar subunits arranged in two stacked rings. Substrate folding inside the central chamber is triggered ...The eukaryotic group II chaperonin TRiC/CCT is a 16-subunit complex with eight distinct but similar subunits arranged in two stacked rings. Substrate folding inside the central chamber is triggered by ATP hydrolysis. We present five cryo-EM structures of TRiC in apo and nucleotide-induced states without imposing symmetry during the 3D reconstruction. These structures reveal the intra- and inter-ring subunit interaction pattern changes during the ATPase cycle. In the apo state, the subunit arrangement in each ring is highly asymmetric, whereas all nucleotide-containing states tend to be more symmetrical. We identify and structurally characterize an one-ring closed intermediate induced by ATP hydrolysis wherein the closed TRiC ring exhibits an observable chamber expansion. This likely represents the physiological substrate folding state. Our structural results suggest mechanisms for inter-ring-negative cooperativity, intra-ring-positive cooperativity, and protein-folding chamber closure of TRiC. Intriguingly, these mechanisms are different from other group I and II chaperonins despite their similar architecture. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1961.map.gz | 10.3 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1961-v30.xml emd-1961.xml | 10.7 KB 10.7 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_1961.png | 105.9 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1961 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1961 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1961_validation.pdf.gz | 216.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1961_full_validation.pdf.gz | 215.2 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1961_validation.xml.gz | 5.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1961 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1961 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1961.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 11.1 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | symmetry-free cryo-EM density of TRiC-AMP-PNP | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.4 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : bovine TRiC/CCT in the AMP-PNP state
全体 | 名称: bovine TRiC/CCT in the AMP-PNP state |
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要素 |
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-超分子 #1000: bovine TRiC/CCT in the AMP-PNP state
超分子 | 名称: bovine TRiC/CCT in the AMP-PNP state / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: 16-mer / Number unique components: 2 |
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分子量 | 実験値: 1 MDa / 理論値: 1 MDa |
-分子 #1: bovine TRiC
分子 | 名称: bovine TRiC / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: TRiC or CCT / 集合状態: 16-mer / 組換発現: No |
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由来(天然) | 生物種: Bos taurus (ウシ) / 別称: bovine |
分子量 | 実験値: 1 MDa / 理論値: 1 MDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1 mg/mL |
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グリッド | 詳細: 200-mesh Quantifoil holey grid |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 101 K / 装置: OTHER / 詳細: Vitrification instrument: FEI vitrobot / 手法: Two-side blotting for 1 second before plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 3200FSC |
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温度 | 平均: 101 K |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism correction |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: JEOL in-column omega energy filter エネルギーフィルター - エネルギー下限: 0.0 eV エネルギーフィルター - エネルギー上限: 20.0 eV |
撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM デジタル化 - スキャナー: NIKON SUPER COOLSCAN 9000 デジタル化 - サンプリング間隔: 6.35 µm / 実像数: 700 / 平均電子線量: 18 e/Å2 |
Tilt angle min | 0 |
Tilt angle max | 0 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 4.1 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Side entry / 試料ホルダーモデル: JEOL 3200FSC CRYOHOLDER |
-画像解析
CTF補正 | 詳細: each micrograph |
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最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 10.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: EMAN1.8 詳細: A recently developed 2-D fast rotational matching (FRM2D) algorithm for image alignment, available in EMAN 1.8, was adopted in the refinement steps 使用した粒子像数: 29374 |