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- EMDB-15039: BcsH-BcsD 'beads-on-a-string' filament, local refine -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-15039
タイトルBcsH-BcsD 'beads-on-a-string' filament, local refine
マップデータBcsHD 'beads-on-a-string' filaments : Unsharpened locally refined map of a BcsH-bound dimer of BcsD octamers
試料
  • 複合体: BcsHD 'beads-on-a-string' cis-filaments
    • タンパク質・ペプチド: Cellulose biosynthesis protein
    • タンパク質・ペプチド: BcsH fragment
  • リガンド: water
機能・相同性Cellulose-complementing protein / Cellulose-complementing protein A / Cellulose synthase operon protein D, bacterial / Cellulose synthase subunit D superfamily / Cellulose synthase subunit D / cellulose biosynthetic process / Cellulose-complementing protein / Cellulose biosynthesis protein
機能・相同性情報
生物種Komagataeibacter hansenii ATCC 23769 (バクテリア)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.6 Å
データ登録者Krasteva PV / Abidi W / Decossas M
資金援助European Union, フランス, 2件
OrganizationGrant number国
European Research Council (ERC)BioMatrix-ERC-2017-StGEuropean Union
Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) フランス
引用ジャーナル: Sci Adv / 年: 2022
タイトル: Bacterial crystalline cellulose secretion via a supramolecular BcsHD scaffold.
著者: Wiem Abidi / Marion Decossas / Lucía Torres-Sánchez / Lucie Puygrenier / Sylvie Létoffé / Jean-Marc Ghigo / Petya V Krasteva /
要旨: Cellulose, the most abundant biopolymer on Earth, is not only the predominant constituent of plants but also a key extracellular polysaccharide in the biofilms of many bacterial species. Depending on ...Cellulose, the most abundant biopolymer on Earth, is not only the predominant constituent of plants but also a key extracellular polysaccharide in the biofilms of many bacterial species. Depending on the producers, chemical modifications, and three-dimensional assemblies, bacterial cellulose (BC) can present diverse degrees of crystallinity. Highly ordered, or crystalline, cellulose presents great economical relevance due to its ever-growing number of biotechnological applications. Even if some acetic acid bacteria have long been identified as BC superproducers, the molecular mechanisms determining the secretion of crystalline versus amorphous cellulose remain largely unknown. Here, we present structural and mechanistic insights into the role of the accessory subunits BcsH (CcpAx) and BcsD (CesD) that determine crystalline BC secretion in the lineage. We show that oligomeric BcsH drives the assembly of BcsD into a supramolecular cytoskeletal scaffold that likely stabilizes the cellulose-extruding synthase nanoarrays through an unexpected inside-out mechanism for secretion system assembly.
履歴
登録2022年5月26日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年12月28日-
マップ公開2022年12月28日-
更新2022年12月28日-
現状2022年12月28日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_15039.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_15039.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 347.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈BcsHD 'beads-on-a-string' filaments : Unsharpened locally refined map of a BcsH-bound dimer of BcsD octamers
ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.839 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.23
最小 - 最大-0.30165786 - 1.0365735
平均 (標準偏差)0.00065345335 (±0.026039476)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ450450450
Spacing450450450
セルA=B=C: 377.55 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_15039_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: BcsHD 'beads-on-a-string' filaments : Autosharpened locally refined map...

ファイルemd_15039_additional_1.map
注釈BcsHD 'beads-on-a-string' filaments : Autosharpened locally refined map of a BcsH-bound dimer of BcsD octamers
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #1

ファイルemd_15039_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: BcsHD 'beads-on-a-string' filaments : half map B

ファイルemd_15039_half_map_2.map
注釈BcsHD 'beads-on-a-string' filaments : half map B
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : BcsHD 'beads-on-a-string' cis-filaments

全体名称: BcsHD 'beads-on-a-string' cis-filaments
要素
  • 複合体: BcsHD 'beads-on-a-string' cis-filaments
    • タンパク質・ペプチド: Cellulose biosynthesis protein
    • タンパク質・ペプチド: BcsH fragment
  • リガンド: water

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超分子 #1: BcsHD 'beads-on-a-string' cis-filaments

超分子名称: BcsHD 'beads-on-a-string' cis-filaments / タイプ: complex / ID: 1 / キメラ: Yes / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#2
詳細: G. hansenii BcsHD complex purified after the co-expression of hexahistidine tagged BcsH C-terminal domain and full-length BcsD. IMAC purification via BcsH, tag and linker removed during purification
由来(天然)生物種: Komagataeibacter hansenii ATCC 23769 (バクテリア)
株: ATCC 23769

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分子 #1: Cellulose biosynthesis protein

分子名称: Cellulose biosynthesis protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1
詳細: BcsD from Gluconacetobacter hansenii ATCC 23769 expressed recombinantly in BL21 Star DE3 cells
コピー数: 18 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Komagataeibacter hansenii ATCC 23769 (バクテリア)
分子量理論値: 17.532963 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌)
配列文字列:
MGSTIFEKKP DFTLFLQTLS WEIDDQVGIE VRNELLREVG RGMGTRIMPP PCQTVDKLQI ELNALLALIG WGTVTLELLS EDQSLRIVH ENLPQVGSAG EPSGTWLAPV LEGLYGRWVT SQAGAFGDYV VTRDVDAEDL NAVPRQTIIM YMRVRSSAT

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分子 #2: BcsH fragment

分子名称: BcsH fragment / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2
詳細: BcsH C-terminal domain from G. hansenii expressed from a pProEx-Htb vector with a HRV3c-cleavable hexahistidine tag
コピー数: 12 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Komagataeibacter hansenii ATCC 23769 (バクテリア)
分子量理論値: 9.919921 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli BL21 (大腸菌)
配列文字列:
MSYYHHHHHH DYDIPTTLEV LFQGPMGSTK TDTNSSQASR PGSPVASPDG SPTMAEVFMT LGGRATELLS PRPSLREALL RRRENEEES

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分子 #3: water

分子名称: water / タイプ: ligand / ID: 3 / コピー数: 105 / 式: HOH
分子量理論値: 18.015 Da
Chemical component information

ChemComp-HOH:
WATER

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態filament

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試料調製

濃度0.5 mg/mL
緩衝液pH: 8 / 詳細: 20 mM NaCl, 100 mM NaCL
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 293 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV
詳細Filaments of various sizes eluting in the void volume of a Superdex 200 Increase size-exclusion column.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Quantum LS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
平均電子線量: 49.9 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.75 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 0.48 µm
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 2849271
詳細: Autopicked particles using cryoSPARC's template picker function. The templates were generated by 2D classification and class selection on ~3000 manually particles.
初期モデルモデルのタイプ: OTHER / 詳細: Ab-initio model generated in cryoSPARC
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 2.6 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 3) / 使用した粒子像数: 1425195
初期 角度割当タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 詳細: Ab-initio model generated in cryoSPARC
最終 角度割当タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 詳細: Ab-initio model generated in cryoSPARC
最終 3次元分類クラス数: 3 / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC (ver. 3)
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

3a8e


Chain - Chain ID: A
詳細Model building with Coot, refinement with Phenix and Namdinator
精密化空間: REAL / プロトコル: BACKBONE TRACE
得られたモデル

PDB-7zzq:
BcsH-BcsD 'beads-on-a-string' filament, local refine

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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