+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-14098 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Structure of the human inner kinetochore CCAN complex | |||||||||
マップデータ | main map | |||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | INNER KINETOCHORE / CCAN / COMPLEX / DNA BINDING PROTEIN / CELL CYCLE | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 Mis6-Sim4 complex / positive regulation of protein localization to kinetochore / centromere complex assembly / kinetochore organization / spindle attachment to meiosis I kinetochore / metaphase chromosome alignment / kinetochore binding / sex differentiation / CENP-A containing chromatin assembly / centromeric DNA binding ...Mis6-Sim4 complex / positive regulation of protein localization to kinetochore / centromere complex assembly / kinetochore organization / spindle attachment to meiosis I kinetochore / metaphase chromosome alignment / kinetochore binding / sex differentiation / CENP-A containing chromatin assembly / centromeric DNA binding / chordate embryonic development / negative regulation of epithelial cell apoptotic process / kinetochore assembly / attachment of mitotic spindle microtubules to kinetochore / inner kinetochore / condensed chromosome, centromeric region / mitotic sister chromatid segregation / centriolar satellite / chromosome, centromeric region / chromosome organization / Amplification of signal from unattached kinetochores via a MAD2 inhibitory signal / pericentric heterochromatin / Mitotic Prometaphase / EML4 and NUDC in mitotic spindle formation / Deposition of new CENPA-containing nucleosomes at the centromere / Resolution of Sister Chromatid Cohesion / NRIF signals cell death from the nucleus / mitotic spindle organization / positive regulation of epithelial cell proliferation / chromosome segregation / RHO GTPases Activate Formins / kinetochore / nuclear matrix / Separation of Sister Chromatids / actin cytoskeleton / mitotic cell cycle / chromosome / midbody / nuclear body / cell adhesion / protein heterodimerization activity / cell division / regulation of DNA-templated transcription / nucleolus / apoptotic process / signal transduction / DNA binding / nucleoplasm / identical protein binding / membrane / nucleus / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.6 Å | |||||||||
データ登録者 | Vetter IR / Pesenti M / Raisch T | |||||||||
資金援助 | 1件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2022 タイトル: Structure of the human inner kinetochore CCAN complex and its significance for human centromere organization. 著者: Marion E Pesenti / Tobias Raisch / Duccio Conti / Kai Walstein / Ingrid Hoffmann / Dorothee Vogt / Daniel Prumbaum / Ingrid R Vetter / Stefan Raunser / Andrea Musacchio / 要旨: Centromeres are specialized chromosome loci that seed the kinetochore, a large protein complex that effects chromosome segregation. A 16-subunit complex, the constitutive centromere associated ...Centromeres are specialized chromosome loci that seed the kinetochore, a large protein complex that effects chromosome segregation. A 16-subunit complex, the constitutive centromere associated network (CCAN), connects between the specialized centromeric chromatin, marked by the histone H3 variant CENP-A, and the spindle-binding moiety of the kinetochore. Here, we report a cryo-electron microscopy structure of human CCAN. We highlight unique features such as the pseudo GTPase CENP-M and report how a crucial CENP-C motif binds the CENP-LN complex. The CCAN structure has implications for the mechanism of specific recognition of the CENP-A nucleosome. A model consistent with our structure depicts the CENP-C-bound nucleosome as connected to the CCAN through extended, flexible regions of CENP-C. An alternative model identifies both CENP-C and CENP-N as specificity determinants but requires CENP-N to bind CENP-A in a mode distinct from the classical nucleosome octamer. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
添付画像 |
---|
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_14098.map.gz | 201 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-14098-v30.xml emd-14098.xml | 31.2 KB 31.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_14098_fsc.xml emd_14098_fsc_2.xml | 13.8 KB 13.8 KB | 表示 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_14098.png | 195.5 KB | ||
マスクデータ | emd_14098_msk_1.map emd_14098_msk_2.map emd_14098_msk_3.map | 216 MB 216 MB 216 MB | マスクマップ | |
Filedesc metadata | emd-14098.cif.gz | 9.6 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14098 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-14098 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_14098_validation.pdf.gz | 672.1 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | emd_14098_full_validation.pdf.gz | 671.7 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_14098_validation.xml.gz | 13.4 KB | 表示 | |
CIF形式データ | emd_14098_validation.cif.gz | 18.2 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-14098 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-14098 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 7qooMC M: このマップから作成された原子モデル C: 同じ文献を引用 (文献) |
---|---|
類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|---|
「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_14098.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | main map | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 0.7 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_14098_msk_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-マスク #2
ファイル | emd_14098_msk_2.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-マスク #3
ファイル | emd_14098_msk_3.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
+全体 : human inner kinetochore CCAN complex
+超分子 #1: human inner kinetochore CCAN complex
+分子 #1: Centromere protein C
+分子 #2: Centromere protein H
+分子 #3: Centromere protein I
+分子 #4: Centromere protein K
+分子 #5: Centromere protein L
+分子 #6: Centromere protein M
+分子 #7: Centromere protein N
+分子 #8: Centromere protein O
+分子 #9: Centromere protein P
+分子 #10: Centromere protein U
+分子 #11: Centromere protein Q
+分子 #12: Centromere protein R
+分子 #13: Centromere protein T
+分子 #14: Centromere protein W
+分子 #15: Unknown protein
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 1.5 mg/mL |
---|---|
緩衝液 | pH: 6.8 / 詳細: 0.0025% Triton |
グリッド | モデル: UltrAuFoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 286 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 詳細: blot for 3.5 seconds at blot force -3. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
特殊光学系 | 位相板: VOLTA PHASE PLATE / エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 実像数: 1540 / 平均電子線量: 76.8 e/Å2 詳細: Images were collected in movie mode with 80 frames per image in superresolution mode with 0.35 A/px (0.7A native) |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1.2 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.6 µm / 倍率(公称値): 130000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
精密化 | 空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL |
---|---|
得られたモデル | PDB-7qoo: |