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- EMDB-13097: human DEPTOR in a complex with mutant human mTORC1 A1459P -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-13097
タイトルhuman DEPTOR in a complex with mutant human mTORC1 A1459P
マップデータmTORC1 with mTOR A1459P mutant in a complex with DEPTOR
試料
  • 複合体: COMPLEX OF HUMAN MUTANT MTORC1 A1459P WITH THE INHIBITORY PROTEIN DEPTOR
    • 複合体: mTORC1 with mutant A1459P mTOR
      • タンパク質・ペプチド: Serine/threonine-protein kinase mTOR
      • タンパク質・ペプチド: Target of rapamycin complex subunit LST8
      • タンパク質・ペプチド: Regulatory-associated protein of mTOR
    • 複合体: DEPTOR
      • タンパク質・ペプチド: DEP domain-containing mTOR-interacting protein
機能・相同性
機能・相同性情報


negative regulation of TORC2 signaling / regulation of extrinsic apoptotic signaling pathway / positive regulation of cytoplasmic translational initiation / positive regulation of pentose-phosphate shunt / RNA polymerase III type 1 promoter sequence-specific DNA binding / RNA polymerase III type 2 promoter sequence-specific DNA binding / T-helper 1 cell lineage commitment / regulation of locomotor rhythm / positive regulation of wound healing, spreading of epidermal cells / cellular response to leucine starvation ...negative regulation of TORC2 signaling / regulation of extrinsic apoptotic signaling pathway / positive regulation of cytoplasmic translational initiation / positive regulation of pentose-phosphate shunt / RNA polymerase III type 1 promoter sequence-specific DNA binding / RNA polymerase III type 2 promoter sequence-specific DNA binding / T-helper 1 cell lineage commitment / regulation of locomotor rhythm / positive regulation of wound healing, spreading of epidermal cells / cellular response to leucine starvation / regulation of membrane permeability / heart valve morphogenesis / TFIIIC-class transcription factor complex binding / negative regulation of lysosome organization / RNA polymerase III type 3 promoter sequence-specific DNA binding / TORC2 complex / TORC1 complex / positive regulation of transcription of nucleolar large rRNA by RNA polymerase I / regulation of autophagosome assembly / calcineurin-NFAT signaling cascade / nucleus localization / TORC1 signaling / voluntary musculoskeletal movement / positive regulation of odontoblast differentiation / regulation of osteoclast differentiation / positive regulation of keratinocyte migration / cellular response to L-leucine / MTOR signalling / Amino acids regulate mTORC1 / cellular response to nutrient / energy reserve metabolic process / phosphatidic acid binding / Energy dependent regulation of mTOR by LKB1-AMPK / negative regulation of cell size / ruffle organization / protein serine/threonine kinase inhibitor activity / positive regulation of osteoclast differentiation / cellular response to osmotic stress / enzyme-substrate adaptor activity / negative regulation of protein localization to nucleus / anoikis / cardiac muscle cell development / negative regulation of TOR signaling / positive regulation of transcription by RNA polymerase III / negative regulation of calcineurin-NFAT signaling cascade / regulation of myelination / regulation of cell size / Macroautophagy / positive regulation of oligodendrocyte differentiation / negative regulation of macroautophagy / positive regulation of actin filament polymerization / lysosome organization / positive regulation of myotube differentiation / protein kinase inhibitor activity / protein kinase activator activity / behavioral response to pain / oligodendrocyte differentiation / Constitutive Signaling by AKT1 E17K in Cancer / mTORC1-mediated signalling / germ cell development / CD28 dependent PI3K/Akt signaling / cellular response to nutrient levels / positive regulation of phosphoprotein phosphatase activity / social behavior / HSF1-dependent transactivation / positive regulation of TOR signaling / TOR signaling / neuronal action potential / positive regulation of translational initiation / response to amino acid / positive regulation of G1/S transition of mitotic cell cycle / regulation of macroautophagy / endomembrane system / 'de novo' pyrimidine nucleobase biosynthetic process / positive regulation of autophagy / positive regulation of epithelial to mesenchymal transition / positive regulation of lamellipodium assembly / positive regulation of lipid biosynthetic process / heart morphogenesis / cardiac muscle contraction / regulation of cellular response to heat / positive regulation of stress fiber assembly / negative regulation of TORC1 signaling / 14-3-3 protein binding / cytoskeleton organization / positive regulation of endothelial cell proliferation / T cell costimulation / cellular response to amino acid starvation / cellular response to starvation / phagocytic vesicle / positive regulation of glycolytic process / negative regulation of autophagy / protein serine/threonine kinase activator activity / response to nutrient levels / response to nutrient / post-embryonic development / VEGFR2 mediated vascular permeability / positive regulation of peptidyl-threonine phosphorylation / regulation of signal transduction by p53 class mediator / Regulation of PTEN gene transcription
類似検索 - 分子機能
DEP domain-containing mTOR-interacting protein, DEP domain 1 / DEP domain-containing mTOR-interacting protein, DEP domain 2 / Raptor, N-terminal CASPase-like domain / Raptor N-terminal CASPase like domain / Raptor N-terminal CASPase like domain / Regulatory associated protein of TOR / Target of rapamycin complex subunit LST8 / Domain of unknown function DUF3385, target of rapamycin protein / Serine/threonine-protein kinase mTOR domain / Domain of unknown function ...DEP domain-containing mTOR-interacting protein, DEP domain 1 / DEP domain-containing mTOR-interacting protein, DEP domain 2 / Raptor, N-terminal CASPase-like domain / Raptor N-terminal CASPase like domain / Raptor N-terminal CASPase like domain / Regulatory associated protein of TOR / Target of rapamycin complex subunit LST8 / Domain of unknown function DUF3385, target of rapamycin protein / Serine/threonine-protein kinase mTOR domain / Domain of unknown function / FKBP12-rapamycin binding domain / Serine/threonine-protein kinase TOR / FKBP12-rapamycin binding domain superfamily / FKBP12-rapamycin binding domain / HEAT repeat / HEAT repeat / Rapamycin binding domain / Domain found in Dishevelled, Egl-10, and Pleckstrin (DEP) / DEP domain profile. / Domain found in Dishevelled, Egl-10, and Pleckstrin / DEP domain / PIK-related kinase, FAT / FAT domain / FATC domain / FATC / FATC domain / PIK-related kinase / FAT domain profile. / FATC domain profile. / Quinoprotein alcohol dehydrogenase-like superfamily / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinases signature 1. / Phosphatidylinositol 3/4-kinase, conserved site / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinases signature 2. / Phosphatidylinositol 3-/4-kinase, catalytic domain superfamily / Phosphoinositide 3-kinase, catalytic domain / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinase / Phosphatidylinositol 3- and 4-kinases catalytic domain profile. / Phosphatidylinositol 3-/4-kinase, catalytic domain / PDZ domain profile. / Domain present in PSD-95, Dlg, and ZO-1/2. / PDZ domain / PDZ superfamily / Armadillo-like helical / Tetratricopeptide-like helical domain superfamily / Armadillo-type fold / G-protein beta WD-40 repeat / Winged helix DNA-binding domain superfamily / WD40 repeat, conserved site / Trp-Asp (WD) repeats signature. / Trp-Asp (WD) repeats profile. / Trp-Asp (WD) repeats circular profile. / WD domain, G-beta repeat / WD40 repeats / WD40 repeat / WD40-repeat-containing domain superfamily / Winged helix-like DNA-binding domain superfamily / WD40/YVTN repeat-like-containing domain superfamily / Protein kinase-like domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
Serine/threonine-protein kinase mTOR / Regulatory-associated protein of mTOR / DEP domain-containing mTOR-interacting protein / Target of rapamycin complex subunit LST8
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.7 Å
データ登録者Heimhalt M / Berndt A / Wagstaff J / Anandapadamanaban M / Perisic O / Maslen S / McLaughlin S / Yu W-H / Masson GR / Boland A ...Heimhalt M / Berndt A / Wagstaff J / Anandapadamanaban M / Perisic O / Maslen S / McLaughlin S / Yu W-H / Masson GR / Boland A / Ni X / Yamashita K / Murshudov GN / Skehel M / Freund SM / Williams RL
資金援助 英国, 3件
OrganizationGrant number国
Medical Research Council (MRC, United Kingdom)MC_U105184308 英国
Cancer Research UKC14801/A21211 英国
European Molecular Biology Organization (EMBO)EMBO ALTF 603-2019 英国
引用ジャーナル: Elife / 年: 2021
タイトル: Bipartite binding and partial inhibition links DEPTOR and mTOR in a mutually antagonistic embrace.
著者: Maren Heimhalt / Alex Berndt / Jane Wagstaff / Madhanagopal Anandapadamanaban / Olga Perisic / Sarah Maslen / Stephen McLaughlin / Conny Wing-Heng Yu / Glenn R Masson / Andreas Boland / ...著者: Maren Heimhalt / Alex Berndt / Jane Wagstaff / Madhanagopal Anandapadamanaban / Olga Perisic / Sarah Maslen / Stephen McLaughlin / Conny Wing-Heng Yu / Glenn R Masson / Andreas Boland / Xiaodan Ni / Keitaro Yamashita / Garib N Murshudov / Mark Skehel / Stefan M Freund / Roger L Williams /
要旨: The mTORC1 kinase complex regulates cell growth, proliferation, and survival. Because mis-regulation of DEPTOR, an endogenous mTORC1 inhibitor, is associated with some cancers, we reconstituted ...The mTORC1 kinase complex regulates cell growth, proliferation, and survival. Because mis-regulation of DEPTOR, an endogenous mTORC1 inhibitor, is associated with some cancers, we reconstituted mTORC1 with DEPTOR to understand its function. We find that DEPTOR is a unique mTORC1 inhibitor that may have evolved to preserve feedback inhibition of PI3K. Counterintuitively, mTORC1 activated by RHEB or oncogenic mutation is much more potently inhibited by DEPTOR. Although DEPTOR partially inhibits mTORC1, mTORC1 prevents this inhibition by phosphorylating DEPTOR, a mutual antagonism that requires no exogenous factors. Structural analyses of the mTORC1/DEPTOR complex showed DEPTOR's PDZ domain interacting with the mTOR FAT region, and the unstructured linker preceding the PDZ binding to the mTOR FRB domain. The linker and PDZ form the minimal inhibitory unit, but the N-terminal tandem DEP domains also significantly contribute to inhibition.
履歴
登録2021年6月18日-
ヘッダ(付随情報) 公開2021年9月8日-
マップ公開2021年9月8日-
更新2022年2月23日-
現状2022年2月23日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

ムービー
  • 表面図（断面を密度値に従い着色）
  • 表面レベル: 0.01
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 表面図（半径に従い着色）
  • 表面レベル: 0.01
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • あてはめたモデルとの重ね合わせ
  • 原子モデル: PDB-7owg
  • 表面レベル: 0.01
  • UCSF Chimeraによる作画
  • ダウンロード
  • 単純化した表面モデル + あてはめた原子モデル
  • 原子モデルPDB-7owg
  • Jmolによる作画
  • ダウンロード
ムービービューア
構造ビューアEMマップ:
SurfViewMolmilJmol/JSmol
添付画像

emd_13097.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_13097.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 80.2 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈mTORC1 with mTOR A1459P mutant in a complex with DEPTOR
ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.1 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.01 / ムービー #1: 0.01
最小 - 最大-0.013817274 - 0.038300518
平均 (標準偏差)0.00045145763 (±0.0027693997)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ276276276
Spacing276276276
セルA=B=C: 303.6 Å
α=β=γ: 90.0 °

CCP4マップ ヘッダ情報:

modeImage stored as Reals
Å/pix. X/Y/Z1.11.11.1
M x/y/z276276276
origin x/y/z0.0000.0000.000
length x/y/z303.600303.600303.600
α/β/γ90.00090.00090.000
MAP C/R/S123
start NC/NR/NS000
NC/NR/NS276276276
D min/max/mean-0.0140.0380.000

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_13097_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: mTORC1 with mTOR A1459P mutant in a complex with DEPTOR half map 2

ファイルemd_13097_half_map_1.map
注釈mTORC1 with mTOR A1459P mutant in a complex with DEPTOR half map 2
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: mTORC1 with mTOR A1459P mutant in a complex with DEPTOR half map 1

ファイルemd_13097_half_map_2.map
注釈mTORC1 with mTOR A1459P mutant in a complex with DEPTOR half map 1
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : COMPLEX OF HUMAN MUTANT MTORC1 A1459P WITH THE INHIBITORY PROTEIN...

全体名称: COMPLEX OF HUMAN MUTANT MTORC1 A1459P WITH THE INHIBITORY PROTEIN DEPTOR
要素
  • 複合体: COMPLEX OF HUMAN MUTANT MTORC1 A1459P WITH THE INHIBITORY PROTEIN DEPTOR
    • 複合体: mTORC1 with mutant A1459P mTOR
      • タンパク質・ペプチド: Serine/threonine-protein kinase mTOR
      • タンパク質・ペプチド: Target of rapamycin complex subunit LST8
      • タンパク質・ペプチド: Regulatory-associated protein of mTOR
    • 複合体: DEPTOR
      • タンパク質・ペプチド: DEP domain-containing mTOR-interacting protein

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超分子 #1: COMPLEX OF HUMAN MUTANT MTORC1 A1459P WITH THE INHIBITORY PROTEIN...

超分子名称: COMPLEX OF HUMAN MUTANT MTORC1 A1459P WITH THE INHIBITORY PROTEIN DEPTOR
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
詳細: An mTORC1 complex bound to two copies of DEPTOR. Each mTORC1 complex consists of a dimer of an mTOR/LST8/RAPTOR heterotrimer. The mTOR is an A1459P mutant.
分子量理論値: 46.3 MDa

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超分子 #2: mTORC1 with mutant A1459P mTOR

超分子名称: mTORC1 with mutant A1459P mTOR / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#2, #4 / 詳細: mTORC1 with mutant A1459P mTOR
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組換細胞: Expi293F / 組換プラスミド: pOPL146, pOPL95 and pOPL119

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超分子 #3: DEPTOR

超分子名称: DEPTOR / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3 / 詳細: DEPTOR is a natural inhibitor of mTORC1
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 組換株: LOBSTR / 組換プラスミド: pOPL138

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分子 #1: Serine/threonine-protein kinase mTOR

分子名称: Serine/threonine-protein kinase mTOR / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: non-specific serine/threonine protein kinase
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 287.570312 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MLGTGPAAAT TAATTS(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK) (UNK)SRNEET(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) ...文字列:
MLGTGPAAAT TAATTS(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK) (UNK)SRNEET(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)EMSQE E(UNK)TRFYDQLN HHIFELVSSS DANERKGGIL AIASLIGVEG GNATRI GRF ANYLRNLLPS NDPVVMEMAS KAIGRLAMAG DTFTAEYVEF EVKRALEWLG ADRNEGRRHA AVLVLRELAI SVPTFFF QQ VQPFFDNIFV AVWDPKQAIR EGAVAALRAC LILTTQREPK EMQKPQWYRH TFEEAEKGFD ETLAKEKGMN RDDRIHGA L LILNELVRIS SMEGERLREE MEEITQQQLV HDKYCKDLMG FGTKPRHITP FTSFQAVQPQ QSNALVGLLG YSSHQGLMG FGTSPSPAKS T(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK) (UNK)(UNK)(UNK)(UNK)(UNK)KCRNS KNSLIQMTIL NLLPRLAAFR PSAFT DTQY LQDTMNHVLS CVKKEKERTA AFQALGLLSV AVRSEFKVYL PRVLDIIRAA LPPKDFAHKR QKAMQVDATV FTCISM LAR AMGPGIQQDI KELLEPMLAV GLSPALTAVL YDLSRQIPQL KKDIQDGLLK MLSLVLMHKP LRHPGMPKGL AHQLASP GL TTLPEASDVG SITLALRTLG SFEFEGHSLT QFVRHCADHF LNSEHKEIRM EAARTCSRLL TPSIHLISGH AHVVSQTA V QVVADVLSKL LVVGITDPDP DIRYCVLASL DERFDAHLAQ AENLQALFVA LNDQVFEIRE LAICTVGRLS SMNPAFVMP FLRKMLIQIL TELEHSGIGR IKEQSARMLG HLVSNAPRLI RPYMEPILKA LILKLKDPDP DPNPGVINNV LATIGELAQV SGLEMRKWV DELFIIIMDM LQDSSLLAKR QVALWTLGQL VASTGYVVEP YRKYPTLLEV LLNFLKTEQN QGTRREAIRV L GLLGALDP YKHKVNIGMI DQSRDASAVS LSESKSSQDS SDYSTSEMLV NMGNLPLDEF YPAVSMVALM RIFRDQSLSH HH TMVVQAI TFIFKSLGLK CVQFLPQVMP TFLNVIRVCD GAIREFLFQQ LGMLVSFVKS HIRPYMDEIV TLMREFWVMN TSI QSTIIL LIEQIVVALG GEFKLYLPQL IPHMLRVFMH DNSPGRIVSI KLLAAIQLFG ANLDDYLHLL LPPIVKLFDA PEAP LPSRK AALETVDRLT ESLDFTDYAS RIIHPIVRTL DQSPELRSTA MDTLSSLVFQ LGKKYQIFIP MVNKVLVRHR INHQR YDVL ICRIVKGYTL ADEEEDPLIY QHRMLRSGQG DALASGPVET GPMKKLHVST INLQKAWGAA RRVSKDDWLE WLRRLS LEL LKDSSSPSLR SCWALAQAYN PMARDLFNAA FVSCWSELNE DQQDELIRSI ELALTSQDIA EVTQTLLNLA EFMEHSD KG PLPLRDDNGI VLLGERAAKC RAYAKALHYK ELEFQKGPTP AILESLISIN NKLQQPEAAA GVLEYAMKHF GELEIQAT W YEKLHEWEDP LVAYDKKMDT NKDDPELMLG RMRCLEALGE WGQLHQQCCE KWTLVNDETQ AKMARMAAAA AWGLGQWDS MEEYTCMIPR DTHDGAFYRA VLALHQDLFS LAQQCIDKAR DLLDAELTAM AGESYSRAYG AMVSCHMLSE LEEVIQYKLV PERREIIRQ IWWERLQGCQ RIVEDWQKIL MVRSLVVSPH EDMRTWLKYA SLCGKSGRLA LAHKTLVLLL GVDPSRQLDH P LPTVHPQV TYAYMKNMWK SARKIDAFQH MQHFVQTMQQ QAQHAIATED QQHKQELHKL MARCFLKLGE WQLNLQGINE ST IPKVLQY YSAATEHDRS WYKAWHAWAV MNFEAVLHYK HQNQARDEKK KLRHASGANI TNATTAATTA ATATTTASTE GSN SESEAE STENSPTPSP LQKKVTEDLS KTLLMYTVPA VQGFFRSISL SRGNNLQDTL RVLTLWFDYG HWPDVNEALV EGVK AIQID TWLQVIPQLI ARIDTPRPLV GRLIHQLLTD IGRYHPQALI YPLTVASKST TTARHNAANK ILKNMCEHSN TLVQQ AMMV SEELIRVAIL WHEMWHEGLE EASRLYFGER NVKGMFEVLE PLHAMMERGP QTLKETSFNQ AYGRDLMEAQ EWCRKY MKS GNVKDLTQAW DLYYHVFRRI SKQLPQLTSL ELQYVSPKLL MCRDLELAVP GTYDPNQPII RIQSIAPSLQ VITSKQR PR KLTLMGSNGH EFVFLLKGHE DLRQDERVMQ LFGLVNTLLA NDPTSLRKNL SIQRYAVIPL STNSGLIGWV PHCDTLHA L IRDYREKKKI LLNIEHRIML RMAPDYDHLT LMQKVEVFEH AVNNTAGDDL AKLLWLKSPS SEVWFDRRTN YTRSLAVMS MVGYILGLGD RHPSNLMLDR LSGKILHIDF GDCFEVAMTR EKFPEKIPFR LTRMLTNAME VTGLDGNYRI TCHTVMEVLR EHKDSVMAV LEAFVYDPLL NWRLMDTNTK GNKRSRTRTD SYSAGQSVEI LDGVELGEPA HKKTGTTVPE SIHSFIGDGL V KPEALNKK AIQIINRVRD KLTGRDFSHD DTLDVPTQVE LLIKQATSHE NLCQCYIGWC PFW

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分子 #2: Target of rapamycin complex subunit LST8

分子名称: Target of rapamycin complex subunit LST8 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 35.91009 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MNTSPGTVGS DPVILATAGY DHTVRFWQAH SGICTRTVQH QDSQVNALEV TPDRSMIAAA GYQHIRMYDL NSNNPNPIIS YDGVNKNIA SVGFHEDGRW MYTGGEDCTA RIWDLRSRNL QCQRIFQVNA PINCVCLHPN QAELIVGDQS GAIHIWDLKT D HNEQLIPE ...文字列:
MNTSPGTVGS DPVILATAGY DHTVRFWQAH SGICTRTVQH QDSQVNALEV TPDRSMIAAA GYQHIRMYDL NSNNPNPIIS YDGVNKNIA SVGFHEDGRW MYTGGEDCTA RIWDLRSRNL QCQRIFQVNA PINCVCLHPN QAELIVGDQS GAIHIWDLKT D HNEQLIPE PEVSITSAHI DPDASYMAAV NSTGNCYVWN LTGGIGDEVT QLIPKTKIPA HTRYALQCRF SPDSTLLATC SA DQTCKIW RTSNFSLMTE LSIKSGNPGE SSRGWMWGCA FSGDSQYIVT ASSDNLARLW CVETGEIKRE YGGHQKAVVC LAF NDSVLG

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分子 #3: DEP domain-containing mTOR-interacting protein

分子名称: DEP domain-containing mTOR-interacting protein / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 46.365832 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MEEGGSTGSA GSDSSTSGSG GAQQRELERM AEVLVTGEQL RLRLHEEKVI KDRRHHLKTY PNCFVAKELI DWLIEHKEAS DRETAIKLM QKLADRGIIH HVCDEHKEFK DVKLFYRFRK DDGTFPLDNE VKAFMRGQRL YEKLMSPENT LLQPREEEGV K YERTFMAS ...文字列:
MEEGGSTGSA GSDSSTSGSG GAQQRELERM AEVLVTGEQL RLRLHEEKVI KDRRHHLKTY PNCFVAKELI DWLIEHKEAS DRETAIKLM QKLADRGIIH HVCDEHKEFK DVKLFYRFRK DDGTFPLDNE VKAFMRGQRL YEKLMSPENT LLQPREEEGV K YERTFMAS EFLDWLVQEG EATTRKEAEQ LCHRLMEHGI IQHVSSKHPF VDSNLLYQFR MNFRRRRRLM ELLNEKSPSS QE THDSPFC LRKQSHDNRK STSFMSVSPS KEIKIVSAVR RSSMSSCGSS GYFSSSPTLS SSPPVLCNPK SVLKRPVTSE ELL TPGAPY ARKTFTIVGD AVGWGFVVRG SKPCHIQAVD PSGPAAAAGM KVCQFVVSVN GLNVLHVDYR TVNNLILTGP RTIV MEVME ELEC

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分子 #4: Regulatory-associated protein of mTOR

分子名称: Regulatory-associated protein of mTOR / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
分子量理論値: 149.200016 KDa
組換発現生物種: Homo sapiens (ヒト)
配列文字列: MESEMLQSPL LGLGEEDEAD LTDWNLPLAF MKKRHCEKIE GSKSLAQSWR MKDRMKTVSV ALVLCLNVGV DPPDVVKTTP CARLECWID PLSMGPQKAL ETIGANLQKQ YENWQPRARY KQSLDPTVDE VKKLCTSLRR NAKEERVLFH YNGHGVPRPT V NGEVWVFN ...文字列:
MESEMLQSPL LGLGEEDEAD LTDWNLPLAF MKKRHCEKIE GSKSLAQSWR MKDRMKTVSV ALVLCLNVGV DPPDVVKTTP CARLECWID PLSMGPQKAL ETIGANLQKQ YENWQPRARY KQSLDPTVDE VKKLCTSLRR NAKEERVLFH YNGHGVPRPT V NGEVWVFN KNYTQYIPLS IYDLQTWMGS PSIFVYDCSN AGLIVKSFKQ FALQREQELE VAAINPNHPL AQMPLPPSMK NC IQLAACE ATELLPMIPD LPADLFTSCL TTPIKIALRW FCMQKCVSLV PGVTLDLIEK IPGRLNDRRT PLGELNWIFT AIT DTIAWN VLPRDLFQKL FRQDLLVASL FRNFLLAERI MRSYNCTPVS SPRLPPTYMH AMWQAWDLAV DICLSQLPTI IEEG TAFRH SPFFAEQLTA FQVWLTMGVE NRNPPEQLPI VLQVLLSQVH RLRALDLLGR FLDLGPWAVS LALSVGIFPY VLKLL QSSA RELRPLLVFI WAKILAVDSS CQADLVKDNG HKYFLSVLAD PYMPAEHRTM TAFILAVIVN SYHTGQEACL QGNLIA ICL EQLNDPHPLL RQWVAICLGR IWQNFDSARW CGVRDSAHEK LYSLLSDPIP EVRCAAVFAL GTFVGNSAER TDHSTTI DH NVAMMLAQLV SDGSPMVRKE LVVALSHLVV QYESNFCTVA LQFIEEEKNY ALPSPATTEG GSLTPVRDSP CTPRLRSV S SYGNIRAVAT ARSLNKSLQN LSLTEESGGA VAFSPGNLST SSSASSTLGS PENEEHILSF ETIDKMRRAS SYSSLNSLI GVSFNSVYTQ IWRVLLHLAA DPYPEVSDVA MKVLNSIAYK ATVNARPQRV LDTSSLTQSA PASPTNKGVH IHQAGGSPPA SSTSSSSLT NDVAKQPVSR DLPSGRPGTT GPAGAQYTPH SHQFPRTRKM FDKGPEQTAD DADDAAGHKS FISATVQTGF C DWSARYFA QPVMKIPEEH DLESQIRKER EWRFLRNSRV RRQAQQVIQK GITRLDDQIF LNRNPGVPSV VKFHPFTPCI AV ADKDSIC FWDWEKGEKL DYFHNGNPRY TRVTAMEYLN GQDCSLLLTA TDDGAIRVWK NFADLEKNPE MVTAWQGLSD MLP TTRGAG MVVDWEQETG LLMSSGDVRI VRIWDTDREM KVQDIPTGAD SCVTSLSCDS HRSLIVAGLG DGSIRVYDRR MALS ECRVM TYREHTAWVV KASLQKRPDG HIVSVSVNGD VRIFDPRMPE SVNVLQIVKG LTALDIHPQA DLIACGSVNQ FTAIY NSSG ELINNIKYYD GFMGQRVGAI SCLAFHPHWP HLAVGSNDYY ISVYSVEKRV R

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

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試料調製

濃度0.6 mg/mL
緩衝液pH: 7.5
詳細: 50 mM HEPES, pH 7.5, 200 mM NaCl, 1 mM TCEP, 1 mM MgCl2, 500 uM AMP-PNP
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 95 % / チャンバー内温度: 287 K / 装置: FEI VITROBOT MARK I / 詳細: blotting time of 2 s and a force of -15..
詳細Purified mutant mTORC1 A1459P and DEPTOR were preincubated in the presence of MgCl2 and AMP-PNP for 20 min and used for cryo-EM grid preparation.

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
温度最低: 100.0 K / 最高: 100.0 K
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / デジタル化 - サイズ - 横: 6000 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4000 pixel / 撮影したグリッド数: 2 / 実像数: 4759 / 平均露光時間: 2.5 sec. / 平均電子線量: 56.0 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: -3.0 µm
最小 デフォーカス（公称値）: -1.4000000000000001 µm
倍率（公称値）: 81000
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 376784
CTF補正ソフトウェア - 名称: CTFFIND (ver. 4.1)
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C2 (2回回転対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 4.7 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION / 使用した粒子像数: 500000
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: RELION
最終 3次元分類クラス数: 1 / ソフトウェア - 名称: RELION
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

初期モデルPDB ID:

6bcx


Chain - Chain ID: B / Chain - Residue range: 1-2549
精密化空間: RECIPROCAL / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 温度因子: 145.7 / 当てはまり具合の基準: Correlation
得られたモデル

PDB-7owg:
human DEPTOR in a complex with mutant human mTORC1 A1459P

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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