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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-1146 | |||||||||
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タイトル | Quaternary polymorphism of replicative helicase G40P: structural mapping and domain rearrangement. | |||||||||
マップデータ | Bacteriophage SPP1 helicase G40P: C3C6 architecture | |||||||||
試料 |
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生物種 | Bacillus phage SPP1 (ファージ) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 24.0 Å | |||||||||
データ登録者 | Nunez-Ramirez R / Robledo Y / mesa P / Alonso JC | |||||||||
引用 | ジャーナル: J Mol Biol / 年: 2006 タイトル: Quaternary polymorphism of replicative helicase G40P: structural mapping and domain rearrangement. 著者: Rafael Núñez-Ramírez / Yolanda Robledo / Pablo Mesa / Silvia Ayora / Juan Carlos Alonso / José María Carazo / Luis Enrique Donate / 要旨: Quaternary polymorphism is a distinctive structural feature of the DnaB family of replicative DNA hexameric helicases. The Bacillus subtilis bacteriophage SPP1 gene 40 product (G40P) belongs to this ...Quaternary polymorphism is a distinctive structural feature of the DnaB family of replicative DNA hexameric helicases. The Bacillus subtilis bacteriophage SPP1 gene 40 product (G40P) belongs to this family. Three different quaternary states have been described for G40P homohexamers, two of them with C(3) symmetry, and the other with C(6) symmetry. We present three-dimensional reconstructions of the different architectures of G40P hexamers and a variant lacking the N-terminal domain. Comparison of the G40P and the deletion mutant structures sheds new light on the functional roles of the N and C-terminal domains, at the same time that it allows the direct structural mapping of these domains. Based on this new information, hybrid EM/X-ray models are presented for all the different symmetries. These results suggest that quaternary polymorphism of hexameric helicases may be implicated in the translocation along the DNA. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_1146.map.gz | 1.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-1146-v30.xml emd-1146.xml | 8.4 KB 8.4 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | 1146.gif | 8.5 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1146 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-1146 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_1146_validation.pdf.gz | 200.7 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_1146_full_validation.pdf.gz | 199.8 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_1146_validation.xml.gz | 4.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1146 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-1146 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_1146.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 1.9 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | Bacteriophage SPP1 helicase G40P: C3C6 architecture | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 4.1 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : C3C6 architecture of Bacteriophage SPP1
全体 | 名称: C3C6 architecture of Bacteriophage SPP1 |
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要素 |
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-超分子 #1000: C3C6 architecture of Bacteriophage SPP1
超分子 | 名称: C3C6 architecture of Bacteriophage SPP1 / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: Homohexamer / Number unique components: 1 |
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分子量 | 実験値: 300 KDa / 理論値: 300 KDa / 手法: gel filtration chromatography |
-分子 #1: helicase
分子 | 名称: helicase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 6 / 集合状態: Hexamer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Bacillus phage SPP1 (ファージ) / 株: SPP1 / 細胞: Bacteria |
分子量 | 実験値: 300 KDa / 理論値: 300 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) / 組換プラスミド: pCB506 |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.2 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7 詳細: 50mM HEPES, 50mM NaCl, 10mM MgCl2, 1mM ATP, 1mM dithithreitol |
染色 | タイプ: NEGATIVE 詳細: Grids with adsorbed protein stained on 2% uranyl acetate for 1 minute |
グリッド | 詳細: collodion/carbon coated 400 mesh copper grid |
凍結 | 凍結剤: NONE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 2000EX |
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撮影 | カテゴリ: FILM / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM / デジタル化 - スキャナー: ZEISS SCAI / デジタル化 - サンプリング間隔: 21 µm / 実像数: 40 / 平均電子線量: 20 e/Å2 / ビット/ピクセル: 8 |
電子線 | 加速電圧: 80 kV / 電子線源: TUNGSTEN HAIRPIN |
電子光学系 | 照射モード: OTHER / 撮影モード: OTHER / 倍率(公称値): 60000 |
試料ステージ | 試料ホルダー: Eucentric / 試料ホルダーモデル: OTHER |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C3 (3回回転対称) / アルゴリズム: OTHER / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 24.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.5 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: SPIDER Xmipp / 使用した粒子像数: 700 |
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